孔祥玲 郝玉花 程文偉 郝玉貴

【關(guān)鍵詞】 蘇云金桿菌;中毒;分析

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2019.28.028

蘇云金桿菌又名蘇云金芽孢桿菌（Bacillus thuringiensis， Bt）， 是革蘭陽(yáng)性桿菌， 因其產(chǎn)生的毒素對(duì)多種害蟲(chóng)有特異的毒殺作用， 而且對(duì)人類和其他非目標(biāo)昆蟲(chóng)沒(méi)有毒性， 對(duì)環(huán)境無(wú)污染， 目前廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)和林業(yè)病蟲(chóng)害防治。但是關(guān)于人蘇云金桿菌中毒的病例報(bào)道較為少見(jiàn)。選取本科2016年1月～2019年1月收治的5例蘇云金桿菌中毒患者， 現(xiàn)就其臨床特點(diǎn)分析報(bào)告如下。

1 臨床資料

1. 1 一般資料 選擇本科2016年1月～2019年1月收治的5例蘇云金桿菌中毒患者作為研究對(duì)象， 患者均為口服中毒， 其中男1例， 女4例;年齡22～50歲， 平均年齡（31±10）歲。所有患者均有明確服毒史， 服毒量50～300 g（可濕性粉劑）， 其中1例服毒50 g（8000 IU/mg）， 1例服毒200 g（8000 IU/mg）， 1例服毒200 g（16000 IU/mg）， 1例服毒300 g（16000 IU/mg），?1例服毒100 ml懸浮液劑（8000 IU/μl）。服毒至洗胃時(shí)間為30 min～4 h， 所有患者服毒前無(wú)其他明確病史。

1. 2 臨床表現(xiàn) 中毒患者主要表現(xiàn)為胃腸道癥狀， 3例患者出現(xiàn)明顯的惡心、嘔吐， 其中2例伴有腹痛、腹瀉;1例患者服毒300 g（16000 IU/mg）， 開(kāi)始出現(xiàn)胃腸道癥狀， 7 d后出現(xiàn)反應(yīng)遲鈍、昏迷， 最后死亡;1例患者僅伴有輕微的頭暈、惡心， 無(wú)嘔吐， 無(wú)腹痛、腹瀉。

1. 3 實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果 白細(xì)胞計(jì)數(shù)或中性粒細(xì)胞比率升高3例， 降低1例， 血鉀降低3例， 肌酸激酶（CK）升高2例， 血漿D-二聚體升高2例， 1例出現(xiàn)雙側(cè)額頂顳枕葉、島葉、半卵圓中心、放射冠、內(nèi)囊、外囊、胼胝體、橋腦、橋臂、小腦半球、小腦蚓部可見(jiàn)大片狀信號(hào)異常， 考慮中毒性腦病。

1. 4 治療及轉(zhuǎn)歸 除1例服毒50 g約4 h的患者給予催吐治療， 1例服毒6 d在當(dāng)?shù)刂委熜Ч钷D(zhuǎn)本院繼續(xù)治療外， 其他3例患者均給予洗胃， 全胃腸道洗消治療， 同時(shí)給予保胃、保肝、保腎、補(bǔ)液、利尿等治療， 1例服毒200 g（16000 IU/mg）患者給予血液灌流治療。經(jīng)過(guò)積極治療， 4例患者治愈出院， 1例患者中毒時(shí)間長(zhǎng)， 錯(cuò)過(guò)血液灌流最佳時(shí)機(jī)， 出現(xiàn)中毒性腦病， 雖經(jīng)積極治療， 最后死亡。

2 討論

蘇云金桿菌是需氧革蘭陽(yáng)性芽孢桿菌， 其殺蟲(chóng)機(jī)制是在形成芽孢時(shí)可產(chǎn)生一種對(duì)鱗翅目、雙翅目及鞘翅目等昆蟲(chóng)幼蟲(chóng)具有特異性毒殺作用的殺蟲(chóng)晶體蛋白質(zhì)（insecticidal Crystal Proteins， ICPs）， 即δ-內(nèi)毒素， 而對(duì)哺乳動(dòng)物和非靶標(biāo)生物無(wú)害[1-3]， 所以由蘇云金桿菌制成的農(nóng)藥說(shuō)明書(shū)和有關(guān)文獻(xiàn)均認(rèn)為蘇云金桿菌生物農(nóng)藥對(duì)人畜是安全的。

但隨著蘇云金桿菌研究的快速深入發(fā)展， 每年都有新的菌株和毒素被鑒定出來(lái)， 其殺蟲(chóng)譜也越來(lái)越寬廣[4]， 產(chǎn)生的毒素除了含有殺蟲(chóng)的δ-內(nèi)毒素、營(yíng)養(yǎng)期殺蟲(chóng)蛋白（VIP）及外毒素[5]， 近年來(lái)還發(fā)現(xiàn)蘇云金桿菌含有可能對(duì)人及哺乳動(dòng)物有毒性的腸毒素、溶血素等蛋白質(zhì)成分的毒素[6]。根據(jù)周幗萍等[7]的研究報(bào)道， 蠟狀芽孢桿菌能產(chǎn)生一種嘔吐毒素和多種腸毒素， 可引發(fā)嘔吐型和腹瀉型食物中毒[8]， 而蘇云金桿菌與蠟狀芽孢桿菌間的區(qū)別微小， 僅在于蘇云金桿菌在芽胞形成時(shí)， 可產(chǎn)生ICPs， 經(jīng)基因組同源性分析， 蘇云金桿菌與蠟狀芽孢桿菌在基因水平上無(wú)明顯的差別， 因此， 蘇云金桿菌也可能產(chǎn)生類似蠟狀芽孢桿菌的腸毒素， 對(duì)人產(chǎn)生毒性作用。根據(jù)Cerstiaens[9]的研究， 已經(jīng)被證實(shí)Cry1C毒素在體外濃度為20 ?g/ml時(shí)， 對(duì)原代培養(yǎng)的毒蛾神經(jīng)元有毒性作用;也有研究蘇云金桿菌亞致死劑量的生物合成殺蟲(chóng)劑對(duì)雌性大鼠妊娠期生殖器官的影響[10]， 表明亞致死劑量的殺蟲(chóng)劑可能對(duì)人類產(chǎn)生慢性毒性;也有一些個(gè)案報(bào)道蘇云金桿菌能夠引起局部及全身感染， 如眼內(nèi)炎、心內(nèi)膜炎、腦膜炎、牙周炎、骨髓炎、傷口感染和敗血癥等[11-13]， 嚴(yán)重有急性橫貫性脊髓炎[14]和死亡病例報(bào)告[15]。

綜上所述， 雖然理論上講蘇云金桿菌對(duì)人無(wú)毒性作用， 但是從以上一些研究及個(gè)案報(bào)道中仍可以得出蘇云金桿菌對(duì)人類可能存在的中毒風(fēng)險(xiǎn)， 所以對(duì)于口服中毒患者， 要積極洗胃、全胃腸道灌洗， 必要時(shí)血液凈化治療， 防止嚴(yán)重不良事件的發(fā)生。

3 附病例報(bào)告

患者， 女， 49歲， 因“自服蘇云金桿菌殺蟲(chóng)劑農(nóng)藥6 d， 反應(yīng)遲鈍1 d”入住本院?；颊呷朐呵? d自服蘇云金桿菌殺蟲(chóng)劑（16000 IU/mg）農(nóng)藥300 g， 服藥后出現(xiàn)惡心、嘔吐， 嘔吐物為胃內(nèi)容物， 伴腹痛、腹瀉， 無(wú)胸痛、胸悶， 無(wú)出汗， 無(wú)意識(shí)喪失， 無(wú)抽搐， 無(wú)大小便失禁， 約2 h后被家屬發(fā)現(xiàn)， 送到當(dāng)?shù)蒯t(yī)院， 給予洗胃、導(dǎo)瀉、利尿及對(duì)癥治療?；颊咧饾u出現(xiàn)納差， 精神萎靡， 反應(yīng)遲鈍， 言語(yǔ)不清， 考慮病情較重， 轉(zhuǎn)本院治療?；颊呒韧w健。入院后查體：體溫（T）36.3 ℃， 呼吸（R）18次/min， 脈搏（P）75次/min， 血壓（BP）140/75 mm Hg（1 mmHg = 0.133 kPa）， 血氧飽和度（SpO2） 98%， 昏睡， 言語(yǔ)不清， 雙側(cè)瞳孔等大等圓， 直徑0.4 cm， 伸舌居中， 頸軟， 四肢腱反射（+++）， 肌張力正常， 肌力3級(jí)， 雙下肢病理征（+）。入院后輔助檢查：血常規(guī)：紅細(xì)胞3.5×1012/L， 血紅蛋白132 g/L， 白細(xì)胞6.4×109/L， 血小板169×109/L， 降鈣素原、血糖、電解質(zhì)、心肌酶譜、肝腎功能、甲狀腺功能、風(fēng)濕免疫系列、凝血系列、動(dòng)脈血?dú)庵笜?biāo)分析均正常， 全腹部CT未見(jiàn)明顯異常， 腦脊液檢查：腦脊液無(wú)色透明， 壓力220 cm H2O（1 cm H2O=0.098 kPa）， 細(xì)胞數(shù)正常， 蛋白含量0.56 g/L， 糖、氯化物含量是正常， 病毒系列檢測(cè)陰性， 細(xì)菌和真菌培養(yǎng)結(jié)果陰性。顱腦磁共振成像（MRI）結(jié)果：雙側(cè)額頂顳枕葉、島葉、半卵圓中心、放射冠、內(nèi)囊、外囊、胼胝體、橋腦、橋臂、小腦半球、小腦蚓部可見(jiàn)大片狀信號(hào)異常， 磁共振彌散加權(quán)成像（DWI）高信號(hào)， 表觀擴(kuò)散系數(shù)（ADC）呈低信號(hào)。見(jiàn)圖1。考慮中毒性腦病。給予激素、維生素及對(duì)癥支持治療， 入院第2天患者出現(xiàn)昏迷， 呼吸微弱， 心率減慢， 立即給予氣管插管、氣囊輔助通氣， 腎上腺素應(yīng)用， 搶救30 min無(wú)效， 宣布死亡。

參考文獻(xiàn)

[1] 鄭起連， 郭雅潔， 林倩男， 等. Cry毒素自然進(jìn)化與作用機(jī)制研究進(jìn)展. 生物技術(shù)進(jìn)展， 2016， 6（1）：14-18.

[2] Bravo A， Likitvivatanavong S， Gill SS， et al. Bacillus thuringiensis： A story of a successful bioinsecticide. Insect Biochem Mol Biol， 2011， 41（7）：423-431.

[3] 張航. 蘇云金芽孢桿菌的研究進(jìn)展. 科學(xué)技術(shù)創(chuàng)新， 2016（34）：244-245.

[4] 黃必旺， 黃志鵬， 關(guān)雄. 蘇云金芽孢桿菌腸毒素的研究進(jìn)展. 中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào)， 2008， 24（3）：292-295.

[5] 蔡啟良， 劉子鐸， 喻子牛. 蘇云金芽胞桿菌生物活性成分研究進(jìn)展. 應(yīng)用與環(huán)境生物學(xué)報(bào)， 2003， 9（2）：207-212.

[6] 洪欽陽(yáng)， 肖水華， 鄒情雅， 等. 蘇云金芽胞桿菌生物活性成分研究進(jìn)展. 生物技術(shù)進(jìn)展， 2013， 3（2）：85-89.

[7] 周幗萍， 袁志明. 蠟狀芽孢桿菌（Bacillus celreus）污染及其對(duì)食品安全的影響. 食品科學(xué)， 2007， 28（3）：357-361.

[8] Jackson SG， Goodbrand RB， Ahmed R， et al. Bacillus cereus and Bacillus thuringiensis isolated in a gastroenteritis outbreak investigation. Lett Appl Microbiol， 1995， 21（2）：103-105.

[9] Cerstiaens A， Verleyen P， Van Rie J， et al. Effect of Bacillus thuringiensis Cry1 toxins in insect hemolymph and their neurotoxicity in brain cells of Lymantria dispar. Appl Environ Microbiol， 2001， 67（9）：3923-3927.

[10] Lemos AJ， Siqueira HA， Wanderley-Teixeira V， et al. Effect of sub-lethal doses of Bacillus thuringiensis subsp. Aizawai and deltamethrin with regard to fertility and organ toxicity in pregnant albino rats. Exp Toxicol Pathol， 2013， 65（5）：489-495.

[11] Celandroni F， Salvetti S， Senesi S， et al. Bacillus thuringiensis， membrane-damaging toxins acting on mammalian cells. FEMS Microbiol Lett， 2014， 361（2）：95-103.

[12] Ghelardi E， Celandroni F， Salvetti S， et al. Bacillus thuringiensis pulmonary infection： critical role for bacterial membrane-damaging toxins and host neutrophils. Microbes Infect， 2007， 9（5）：591-598.

[13] Kuroki R， Kawakami K， Qin L， et al. Nosocomial Bacteremia Caused by Biofilm-Forming Bacillus cereus and Bacillus thuringiensis. Intern Med， 2009， 48（10）：791-796.

[14] Han J， Cheng Y， Wang MS. Bacillus Thuringiensis Poisoning Related Acute Transverse Myelitis. Can J Neurol Sci， 2013， 40（3）：435-437.

[15] 徐智忠. 生物農(nóng)藥蘇云金桿菌有機(jī)茶葉殺蟲(chóng)劑中毒1例. 中國(guó)急救醫(yī)學(xué)， 2015， 35（12）：436-437.

[收稿日期：2019-06-27]