亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        乙酸乙酯沙蠶提取物對金黃色葡萄球菌抑菌活性研究

        2019-11-20 07:03:30劉海鵬
        現(xiàn)代農(nóng)村科技 2019年11期

        劉海鵬

        (衡水學院生命科學系 河北 衡水 053000)

        金黃色葡萄球菌是常見的引起皮膚感染和食物中毒的致病菌[1],易引起不同程度的化膿性炎癥,擴散疾病,如肺炎、菌血癥和敗血癥等。隨著抗菌藥物在醫(yī)學和獸醫(yī)臨床上的廣泛應用,金黃色葡萄球菌的耐藥性越來越高,已經(jīng)進化出了抵抗免疫系統(tǒng)攻擊的種類[2]。沙蠶是一類生活在海邊潮間帶的海洋生物,體內(nèi)含有多種生物活性成分,是可利用的重要的藥物資源[3],因此研究和開發(fā)沙蠶體內(nèi)抗菌活性成分對解決耐藥菌株有重要意義。采用乙酸乙酯對沙蠶體內(nèi)活性物質(zhì)進行提取,并對提取物進行金黃色葡萄球菌體外抑菌實驗,為沙蠶體內(nèi)生物活性物質(zhì)的開發(fā)提供理論和實驗依據(jù)。

        1 材料與方法

        1.1 試驗材料

        1.1.1 樣品與菌株。沙蠶,采購于山東舟山某水產(chǎn)養(yǎng)殖場。金黃色葡萄球菌,衡水學院微生物實驗室提供。

        1.1.2 主要儀器。電熱鼓風干燥箱、XDSY-2000A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、SW-CT-IF超凈工作臺、高壓蒸汽滅菌鍋、超聲波震蕩儀。

        1.2 試驗方法

        1.2.1 沙蠶提取物的制備。將清水洗凈的沙蠶烘干、粉碎后研磨成粉末狀,將乙酸乙酯和沙蠶混勻,超聲波震蕩儀中震蕩30min,重復3次,所得濾液置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中濃縮,最后所得溶液用乙酸乙酯稀釋至濃度為100mg/ml,高壓滅菌后,放于4℃冰箱保存,備用。

        1.2.2 菌懸液的制備。無菌條件下,將活化的金黃色葡萄球菌接種至LB培養(yǎng)基進行恒溫培養(yǎng),并計算菌懸液濃度。取1 ml已制備好的菌懸液加到9 ml無菌水中進行10倍倍比稀釋,取1×10-5、1×10-6、1×10-7、1×10-8、1×10-9等5種稀釋度涂板,每個濃度做3個平行,做好標記,將涂好后的培養(yǎng)基倒置于37℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2 d。選擇每個平板上長有50~300個菌落的稀釋度計算菌落形成單位數(shù)。計算公式:每1 ml樣品中菌落形成單位數(shù)(CFU)=同一稀釋度3次重復的平均菌落數(shù)稀釋倍數(shù),最后配制成濃度為1×106cfu/ml的菌液備用。

        1.2.3 沙蠶提取物最小抑菌濃度(MIC)的測定。采用試管二倍稀釋法測定每種沙蠶活性提取物的最低抑菌濃度(MIC)。取已處理好的無菌試管,通過試管二倍稀釋法,制備試管提取物,濃度分別為50 mg/ml、12.5 mg/ml、 3.13 mg/ml、 0.78 mg/ml、 0.195 mg/ml、0.098 mg/ml,同時做空白對照和溶劑對照,空白對照不含提取物藥液,溶劑對照不含提取物但含有等劑量相應溶劑。

        1.2.4 體外抑菌圈直徑測定。利用牛津杯法[4]測定沙蠶提取物體外抑菌圈直徑。用移液槍吸取100 μl沙蠶提取物注入牛津杯內(nèi),將平板培養(yǎng)基在37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h后觀察并測量抑制圈的直徑大小。每種提取物做3個重復,取平均值。結(jié)果判定,抑菌圈直徑小于10 mm為輕度抑菌,抑菌圈直徑10~15 mm為中度抑菌,抑菌圈直徑15~20 mm為高度抑菌,抑菌直徑大于20 mm為極度抑菌。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 體外抑菌圈的測定。由表1可知,乙酸乙酯沙蠶提取物對金黃色葡萄球菌有中度抑菌效果。其抑菌圈直徑平均值為11.49 mm,空白對照組和乙酸乙酯抑菌圈直徑均為0 mm,無抑菌效果。

        表1 不同沙蠶提取物體外抑菌圈直徑及抑菌效果

        2.2 最小抑菌濃度(MIC)的測定。由表2可知,乙酸乙酯沙蠶提取物金黃色葡萄球菌的MIC值為0.195 mg/ml。

        表2 乙酸乙酯沙蠶提取物對金黃色葡萄球菌MIC的測定

        3 討論

        由于抗生素的大量使用,使得臨床上金黃色葡萄球菌的抗藥性越來越強,因此發(fā)現(xiàn)新的抗菌藥物迫在眉睫。本試驗通過使用乙酸乙酯對沙蠶體內(nèi)活性物質(zhì)提取,發(fā)現(xiàn)其提取物對金黃色葡萄球菌具備一定的抗菌性,表明沙蠶體內(nèi)的活性生物物質(zhì)有一定抗菌性,為今后相關研究打下了一定基礎。

        在本試驗中,通過體外抑菌效果的測定,表明在沙蠶體內(nèi)存在某些生物活性物質(zhì),這些物質(zhì)具有天然抗菌的作用,但抗菌效果并不顯著,需要進一步對乙酸乙酯粗提物進行分化,看看是哪些具體的成分起到了抗菌作用。

        baoyu网址国产最新| 人人爽人人爱| 国产福利午夜波多野结衣| 无码AⅤ最新av无码专区| 成人性生交大片免费看l| 无码av中文一区二区三区桃花岛| 欧美成人一区二区三区| 无码在线观看123| 日韩精品视频av在线观看| 少妇被又大又粗又爽毛片久久黑人| 国产午夜亚洲精品午夜鲁丝片 | 日韩精品视频在线观看免费| 九一精品少妇一区二区三区| 亚洲乱码中文字幕久久孕妇黑人| 欧美性videos高清精品| 亚洲免费毛片网| 99精品久久精品一区| 成人免费直播| 国产精品福利影院| 精品女同av一区二区三区| 人妻夜夜爽天天爽三区丁香花| 乱人伦中文无码视频| аⅴ天堂一区视频在线观看| 国产91极品身材白皙| 国产午夜手机精彩视频| 国产99r视频精品免费观看| 中文字幕av久久激情亚洲精品| 干日本少妇一区二区三区| 亚洲性爱视频| 国产精品av在线一区二区三区| 色婷婷亚洲一区二区三区在线| 中文无码伦av中文字幕| 国产精品6| 极品少妇在线观看视频| 综合亚洲伊人午夜网| 欧美性videos高清精品| 中文字幕精品永久在线| 亚洲国产高清精品在线| 国产乱子伦在线观看| 四虎国产精品成人影院| 久久久精品亚洲一区二区国产av|