潘美民，李文娟，蔣芳清，楊麗暉，譚永衛(wèi)，何 娟，阮建文，蔡春琳

丙型肝炎病毒（HCV）感染是引起慢性肝炎、肝硬化和肝癌的重要原因之一[1]。據(jù)世界衛(wèi)生組織估計(jì)，全球約有2億人感染過HCV，感染范圍非常廣，呈世界性分布。在急性HCV感染階段，病毒自發(fā)清除率約為15%～45%之間，感染進(jìn)展為慢性丙型肝炎（CHC）的比例在55%～85%之間[2]。我國(guó)屬于HCV感染高發(fā)區(qū)之一。一旦人體感染HCV后，便很難清除病毒，感染持續(xù)將進(jìn)展成為慢性丙型肝炎[3]。有研究表明，丙型肝炎肝硬化易發(fā)展為肝癌[4]。部分急性HCV感染者可通過固有免疫和適應(yīng)免疫自發(fā)清除病毒，但其具體作用機(jī)制尚不明確[5]。本研究檢測(cè)了HCV感染者血清白細(xì)胞介素-17A（interleukin-17A，IL-17A）、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（fibroblast growth factor，F(xiàn)GF）和IL-7水平，以探討它們與HCV感染自發(fā)清除的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2017年1月～2018年1月我院診治的HCV感染者70例，符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)分會(huì)制定的《丙型肝炎防治指南（2015年更新版）》的標(biāo)準(zhǔn)[6]，其中慢性丙型肝炎患者52例，男性27例，女性25例；平均年齡為（56.2±5.9）歲。HCV感染自發(fā)清除者18例，男性10例，女性8例；平均年齡為（57.5±7.0）歲。HCV感染自發(fā)清除定義為血清抗-HCV陽(yáng)性，而血清HCV RNA陰性，血生化指標(biāo)正常。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并甲型肝炎、乙型肝炎病毒感染；②妊娠、肝腎功能不全、心腦疾病、糖尿??；③有酒精性肝病、自身免疫性肝病。另選擇30名健康人作為對(duì)照組，男性17例，女性13例；平均年齡為（56.6±7.8）歲。三組人群在年齡和性別等一般資料方面比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核通過，受試者簽署書面知情同意書。

1.2 檢測(cè) 使用美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特有限公司生產(chǎn)的AU5800全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)ALT和AST；使用美國(guó)雅培公司提供的i200全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀檢測(cè)外周血抗-HCV；采用RT-PCR法檢測(cè)HCV RNA（江萊生物有限公司，T100 PCR儀由美國(guó)生命醫(yī)學(xué)產(chǎn)品有限公司生產(chǎn)）；采用ELISA法檢測(cè)血清細(xì)胞因子IL-17A、FGF和IL-7水平（HBS-1096A酶標(biāo)儀為南京德鐵實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司生產(chǎn)）。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 22.0軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料的比較采用x2檢驗(yàn)，計(jì)量資料以（±s）表示，采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，三組間計(jì)量資料的比較采用單因素方差分析，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 慢性丙型肝炎患者與HCV感染自發(fā)清除者一般資料比較 慢性丙型肝炎患者與HCV感染自發(fā)清除者性別構(gòu)成和年齡差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05，表1）；在本組慢性丙型肝炎患者中，感染HCV基因亞型以1b、2a型為主；慢性丙型肝炎患者血清ALT和AST水平顯著高于HCV感染自發(fā)清除者（P＜0.05，表2）。

表1 慢性丙型肝炎與HCV感染自發(fā)清除人群一般資料[n（%）]比較

2.2 慢性丙型肝炎患者、HCV感染自發(fā)清除者與健康人血清細(xì)胞因子水平比較 慢性丙型肝炎患者血清IL-17A、FGF和IL-7水平均顯著低于HCV感染自發(fā)清除者或健康人（P＜0.05），而HCV感染自發(fā)清除者血清IL-17A、FGF和IL-7水平也顯著低于健康人（P＜0.05，表3）。

表2 兩組血生化和病毒學(xué)指標(biāo)（±s）比較

表2 兩組血生化和病毒學(xué)指標(biāo)（±s）比較

與HCV感染自發(fā)清除組比，①P＜0.05

例數(shù) HCV RNA（IU/ml） ALT（U/L） AST（U/L）慢性丙型肝炎 52 5.8±1.1 61.1±50.5① 57.0±42.8①感染自發(fā)清除 18 - 25.0±14.2 25.5±9.4

表3 三組人群血清細(xì)胞因子水平（±s）比較

表3 三組人群血清細(xì)胞因子水平（±s）比較

與健康人比，①P＜0.05；與HCV感染自發(fā)清除者比，②P＜0.05

例數(shù) IL-17A（ng/L） FGF（ng/L） IL-7（ng/L）慢性丙型肝炎 52 0.25±0.13①② 0.51±0.13①② 0.49±0.12①②感染自發(fā)清除 18 0.75±0.14① 0.93±0.11① 0.71±0.10①健康人 30 1.35±0.12 1.49±0.12 0.99±0.12

3 討論

自HCV被發(fā)現(xiàn)以來，全世界已有3%人感染HCV，而其中大約15%～45%感染者在急性期可自發(fā)的清除病毒，大部分的HCV感染者將轉(zhuǎn)變?yōu)槁员透窝譡7]。慢性丙型肝炎患者肝臟發(fā)生纖維化，進(jìn)而轉(zhuǎn)變?yōu)楦斡不谋嚷蚀蠹s有10%～20%，而在如此多的肝硬化患者中，每年發(fā)生肝細(xì)胞癌的患者大約有1%～5%，發(fā)生肝功能失代償?shù)幕颊叽蠹s有3%～6%[8]。HCV感染的病程可由于患者自身情況的不同而不同，細(xì)胞因子的多樣性不僅影響著HCV感染的自然史，還影響了患者對(duì)病毒的自發(fā)清除。在急性HCV感染階段，患者可通過固有免疫和適應(yīng)免疫自發(fā)地清除病毒，而其具體作用機(jī)制尚不明確。因此，目前如何清除病毒、防止病毒復(fù)制和傳染、控制病毒的傳播，成為降低全球HCV感染率的首要問題，不僅對(duì)提升感染者生活質(zhì)量，延長(zhǎng)感染者壽命有著十分重要的意義[9，10]，也對(duì)降低全球人群HCV感染率有重要意義。

細(xì)胞因子是細(xì)胞間信號(hào)傳遞的分子，主要通過結(jié)合相應(yīng)受體來調(diào)控免疫應(yīng)答、調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)、分化與效應(yīng)發(fā)揮，介導(dǎo)炎性反應(yīng)等[11]。IL-17A是由Th17、Tc17和B淋巴細(xì)胞等多種細(xì)胞分泌的炎性因子，其可誘導(dǎo)IL-6和TNF-α等細(xì)胞因子生成，而且IL-17A能夠產(chǎn)生較強(qiáng)的致炎效應(yīng)[12]。IL-17A是Th17分泌的細(xì)胞因子，而Th17很可能在感染的早期階段誘發(fā)組織炎癥，并通過IL-17A的誘導(dǎo)，連接先天免疫與適應(yīng)性免疫，吸引其他T細(xì)胞向感染部位聚集。有研究顯示，HCV感染者體內(nèi)IL-17A有明顯下降，可能與白細(xì)胞介素和干擾素等作用有關(guān)[13]。本研究發(fā)現(xiàn)，慢性丙型肝炎患者、HCV感染清除者IL-17A水平較健康人明顯降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明HCV感染可引起IL-17A的變化，且以下調(diào)IL-17A水平變化為主，這可能影響了患者的抗病毒免疫功能。

本研究對(duì)堿性FGF（bFGF）進(jìn)行了研究，bFGF是成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子蛋白中的一員。bFGF是人體內(nèi)十分微量的一種活性物質(zhì)，而且由于其擁有較廣泛的生理功能和具有十分重要的臨床應(yīng)用價(jià)值，使得國(guó)內(nèi)外學(xué)者高度重視對(duì)其的研究[14]。bFGF對(duì)新生血管的產(chǎn)生具有刺激作用，參與胚胎組織的發(fā)育、分化，對(duì)創(chuàng)傷愈合、組織再生具有促進(jìn)作用[15]。有報(bào)道發(fā)現(xiàn)，bFGF能夠通過影響免疫細(xì)胞的活性，調(diào)節(jié)免疫功能，還擁有促進(jìn)造血功能和調(diào)節(jié)內(nèi)分泌功能的生物活性作用[16]。也有研究顯示，bFGF介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路與腫瘤生長(zhǎng)和浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移相關(guān)[17]。本研究結(jié)果顯示，健康人血清bFGF水平明顯高于慢性丙型肝炎患者或HCV感染清除者，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而且其他細(xì)胞因子水平也同步降低，說明bFGF水平能夠?qū)CV的自發(fā)清除產(chǎn)生影響，并且能夠抑制肝臟炎癥的反應(yīng)，但具體作用機(jī)制尚不明確，需要大量的實(shí)驗(yàn)研究來繼續(xù)探討其復(fù)雜的作用網(wǎng)絡(luò)規(guī)律。

IL-7是一種多效性細(xì)胞因子，而且具有較為廣泛的免疫效應(yīng)，還參與T細(xì)胞的生長(zhǎng)、分化以及存活，同時(shí)還參與單核細(xì)胞參與的炎癥反應(yīng)，對(duì)調(diào)節(jié)機(jī)體免疫防御功能具有重要的作用，并在慢性病毒性疾病的發(fā)病、病毒耐藥、慢性化過程等發(fā)揮著重要的作用[18，19]。有研究發(fā)現(xiàn)，在慢性病毒性感染性疾病中有一種高表達(dá)的細(xì)胞因子SOCS3，經(jīng)由IL-7治療后，該細(xì)胞因子水平明顯下降，更進(jìn)一步的研究表明，IL-7能夠提高IL-17A等細(xì)胞因子水平來清除病毒，對(duì)于免疫系統(tǒng)功能的恢復(fù)具有非常重要的作用[20-22]。本研究結(jié)果表明，健康人血清IL-7水平明顯高于慢性丙型肝炎患者和HCV自發(fā)清除者，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明慢性丙型肝炎患者IL-7水平下降，可能使得HCV感染患者的細(xì)胞免疫功能急劇下降而不能清除病毒，造成感染持續(xù)。

綜上所述，在HCV感染自發(fā)清除者，血清細(xì)胞因子，如IL-17A、bFGF何IL-7水平明顯高于慢性丙型肝炎患者，可見細(xì)胞因子IL-17A、bFGF和IL-7水平將影響HCV感染的自發(fā)清除過程。正常的細(xì)胞因子分泌能清除病毒，抑制肝臟炎癥反應(yīng)，肝功能恢復(fù)正常。但由于本研究樣本病例較少，需要進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量，以繼續(xù)后續(xù)對(duì)具體機(jī)制的深入研究。由于本研究只以血生化指標(biāo)正常和血清HCV RNA陰性為HCV感染自發(fā)清除的依據(jù)，未進(jìn)行肝組織學(xué)檢查，不能肯定這些人群肝病真正痊愈或根本就沒有發(fā)生肝炎。同時(shí)，對(duì)這些所謂的HCV感染自發(fā)清除病毒人群的長(zhǎng)期隨訪也非常必要，了解他們?cè)谝院舐L(zhǎng)的生活中肝臟情況的變化規(guī)律，如是否再發(fā)肝炎，會(huì)不會(huì)發(fā)生肝纖維化或肝硬化，甚至肝癌，都是非常重要的。