武兆文，鄭 翔，張佳佳，王 濤，唐忠林，劉 煒，周?chē)?guó)勤，尹紹武

（1.南京師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，海洋科學(xué)與工程學(xué)院，南京 210023；2.南京市水產(chǎn)科學(xué)研究所，南京 210036）

在魚(yú)類人工繁殖過(guò)程中，對(duì)魚(yú)體性別的準(zhǔn)確判斷是魚(yú)體性別定向控制、選育和繁殖的基礎(chǔ)。解剖觀察、性腺切片等是魚(yú)類雌雄判別的常用方法，但需剖殺活體，造成樣本浪費(fèi)，對(duì)于幼齡魚(yú)和珍稀魚(yú)種均不適用。具有明顯兩性特征的魚(yú)類，可通過(guò)鰭條和生殖孔特征等差異鑒定性別［1-2］，但對(duì)于外觀特征不明顯的魚(yú)類則難以鑒別。運(yùn)用超聲波技術(shù)可對(duì)條紋鱸（Morone saxatilis）［3］和中華鱘（Acipenser sinensis）成魚(yú)［4］進(jìn)行性別鑒定，具有較高的準(zhǔn)確度，但在魚(yú)類早期性別鑒定時(shí)，常因不能提供足夠的有效信息［5］而影響其運(yùn)用。近年對(duì)半滑舌鰨（Cynoglossus semilaevis）［6］和黃顙魚(yú)（Pelteobagrus fulvidraco）［7］等魚(yú)類的研究表明，運(yùn)用分子生物學(xué)技術(shù)從雌（雄）魚(yú)基因組DNA中篩選出性別特異標(biāo)記基因，建立遺傳性別鑒定的PCR技術(shù)，可從遺傳角度判定魚(yú)類性別。但在日常生產(chǎn)和野外工作中，由于條件限制，迫切需要更為簡(jiǎn)便的方法區(qū)分雌雄差異。而利用大量樣本的形態(tài)和框架指標(biāo)，篩選特殊指標(biāo)進(jìn)行性別判定是一種簡(jiǎn)單實(shí)用的方法。

黃顙魚(yú)，別稱黃角丁、黃骨魚(yú)、昂刺、刺黃股等，屬于鯰形目（Siluriformes），鲿科（Siluridae），黃顙魚(yú)屬，在我國(guó)主要分布于長(zhǎng)江、珠江等東部各太平洋水系。黃顙魚(yú)屬的種類較多，有瓦氏黃顙魚(yú)（P.vachelli）、岔尾黃顙魚(yú)（P.eupogon）及中間黃顙魚(yú)（P.intermedius）等。近年來(lái)，隨著黃顙魚(yú)養(yǎng)殖和繁育技術(shù)的進(jìn)步，黃顙魚(yú)人工育種得到快速發(fā)展［8-9］。然而，在人工養(yǎng)殖過(guò)程中，黃顙魚(yú)存在著個(gè)體小、生長(zhǎng)速度慢等缺點(diǎn)，在高密度的池塘養(yǎng)殖中，魚(yú)規(guī)格偏小，影響了整體養(yǎng)殖產(chǎn)量［10］。為此，科技工作者通過(guò)雜交育種來(lái)改善魚(yú)體質(zhì)量，提高產(chǎn)量，并取得了良好的成效，其技術(shù)也在生產(chǎn)上得到了推廣［11］。雜交育種是遺傳育種中最經(jīng)典的方法之一，不同種間生物的雜交，有可能獲得雜種優(yōu)勢(shì)并迅速、顯著地提高雜交后代的生活力、經(jīng)濟(jì)性狀等，繼而培育成新品種。迄今為止，我國(guó)已通過(guò)不同種類雜交培育出一些在生長(zhǎng)性能上具有明顯優(yōu)勢(shì)的雜交品種，例如牙鲆（Paralichthys olivaceu）“鲆優(yōu) 1號(hào)”［12］、雜色鮑（Haliotis diversicolor）“東 優(yōu) 1號(hào)”［13］、湘 云 鯽（Cyprinus auratus triploid）和雜交鱧（Channa argus♂×C.maeulata♀）“杭鱧 1號(hào)”［14］等。在鲿科魚(yú)類中，常利用黃顙魚(yú)、瓦氏黃顙魚(yú)、長(zhǎng)吻鮠（Leiocassis longirostris）以及烏蘇里擬鲿（Pseudobagrus ussuriensis）等魚(yú)類進(jìn)行種間雜交和屬間雜交［15-18］，而本文研究的雜交黃顙魚(yú)“黃優(yōu)1號(hào)”（以下簡(jiǎn)稱雜交黃顙魚(yú)）是由經(jīng)二代選育的瓦氏黃顙魚(yú)（♂）與三代選育的黃顙魚(yú)（♀）組合的雜交后代，其生長(zhǎng)速度高于母本黃顙魚(yú)，且比黃顙魚(yú)個(gè)體大，抗逆性強(qiáng)；與父本瓦氏黃顙魚(yú)相比，品質(zhì)和市場(chǎng)接受度更高，因而顯示出良好的開(kāi)發(fā)前景。本研究測(cè)量了2齡雜交黃顙魚(yú)326尾和3齡雜交黃顙魚(yú)183尾的11個(gè)計(jì)量性狀。在此基礎(chǔ)上，計(jì)算出11個(gè)標(biāo)準(zhǔn)化性狀，通過(guò)對(duì)所得實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析和比較，旨在明確雜交黃顙魚(yú)“黃優(yōu)1號(hào)”的主要形態(tài)指標(biāo)體系，找出雌雄個(gè)體形態(tài)上存在的差異，以期為今后雜交黃顙魚(yú)新品種培育過(guò)程中雌雄的形態(tài)特征判別提供參考方法和理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

實(shí)驗(yàn)用魚(yú)均采自池塘養(yǎng)殖，于2018年6月取自南京市水產(chǎn)科學(xué)研究所祿口基地。共取實(shí)驗(yàn)用魚(yú)509尾：其中2齡雜交黃顙魚(yú)326尾，體長(zhǎng)為14.32～27.52 cm，體質(zhì)量為45.00～181.00 g；3齡雜交黃顙魚(yú)183尾，體長(zhǎng)為14.62～28.42 cm，體質(zhì)量為44.74～291.05 g。

1.2 數(shù)據(jù)測(cè)量

采用游標(biāo)卡尺（573-642，±0.01cm，昆山銘尚精密機(jī)電有限公司）測(cè)量全長(zhǎng)（full length，F(xiàn)L）、體長(zhǎng)（body length，BL）、頭長(zhǎng)（head length，HL）、體 高 （body height，BH）、體 厚 （body thickness，BT）、尾柄長(zhǎng)（caudal peduncle length，CPL）、尾柄高（caudal peduncle height，CPH）、吻長(zhǎng)（lip length，LL）、眼徑（eye diameter，ED）、眼間距（interorbital distance，ID）等形態(tài)性狀指標(biāo)；使用電子天平（JSC-T29-6，±0.01g，惠而邦電子衡器有限公司）稱量體質(zhì)量（body weight，BW）。肥滿度（fatness）＝體質(zhì)量（g）／體長(zhǎng)3（cm）×100%，測(cè)定形態(tài)指標(biāo)后，再逐一解剖觀察其性腺特征判斷性別。

1.3 數(shù)據(jù)處理

將鑒定過(guò)性別的509尾雜交黃顙魚(yú)進(jìn)行有效計(jì)量性狀測(cè)量，其中雌魚(yú)261尾，雄魚(yú)248尾，為消除個(gè)體差異對(duì)形態(tài)數(shù)據(jù)的影響，便于差異比較，將測(cè)得的數(shù)據(jù)進(jìn)行整理及標(biāo)準(zhǔn)化，共得到11項(xiàng)計(jì)量性狀和11項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)化性狀，其中計(jì)量性狀包括全長(zhǎng)、體長(zhǎng)、頭長(zhǎng)、體高、體厚、尾柄長(zhǎng)、尾柄高、吻長(zhǎng)、眼徑、眼間距、體質(zhì)量，標(biāo)準(zhǔn)化性狀包括肥滿度、體長(zhǎng)／頭長(zhǎng)、眼徑／吻長(zhǎng)、體長(zhǎng)／體高、體長(zhǎng)／體厚、體長(zhǎng)／尾柄長(zhǎng)、頭長(zhǎng)／吻長(zhǎng)、頭長(zhǎng)／眼徑、體高／體厚、尾柄長(zhǎng)／尾柄高、體長(zhǎng)／全長(zhǎng)。將11項(xiàng)計(jì)量性狀和11項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)化性狀進(jìn)行主成分分析，同時(shí)運(yùn)用逐步判別分析（所采集的509尾雜交黃顙魚(yú)個(gè)體按照年齡的不同，篩選出2齡雜交黃顙魚(yú)326尾、3齡雜交黃顙魚(yú)183尾），根據(jù)各變量對(duì)模型貢獻(xiàn)的大小，最終在2、3齡魚(yú)群體中分別得出若干個(gè)變量，分別建立雜交黃顙魚(yú)2、3齡雌雄個(gè)體判別方程式，并根據(jù)所建立的方程，對(duì)所采集的樣品進(jìn)行重新檢測(cè)，對(duì)照實(shí)際解剖的性別信息，檢驗(yàn)方程的有效性。利用 Excel 2010及SPSS19.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理和分析，數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（X±SD）表示，變異系數(shù)以標(biāo)準(zhǔn)差與平均值之比（C.V.＝σ／μ）表示，采用 t-檢驗(yàn)比較雌雄個(gè)體指標(biāo)差異，以P＜0.05表示差異顯著，P＜0.01表示差異極顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 雌雄雜交黃顙魚(yú)體質(zhì)量、體長(zhǎng)差異

將實(shí)驗(yàn)中采集的2、3齡魚(yú)分別以體長(zhǎng)、體質(zhì)量為變量做柱狀圖比較分析。結(jié)果表明，2齡雜交黃顙魚(yú)雄魚(yú)體長(zhǎng)、體質(zhì)量高于雌魚(yú)，但無(wú)顯著性差異（P＞0.05），3齡雜交黃顙魚(yú)雄魚(yú)體長(zhǎng)、體質(zhì)量均顯著高于雌魚(yú)（P＜0.05）（圖1）。結(jié)果初步顯示出雜交黃顙魚(yú)雌魚(yú)與雄魚(yú)在外觀上存在著明顯的差異。

2.2 雌雄雜交黃顙魚(yú)形態(tài)性狀分析

由表1可知，雌性雜交黃顙魚(yú)各項(xiàng)計(jì)量性狀指標(biāo)中，變異系數(shù)最大的是尾柄高，為0.91；雄性雜交黃顙魚(yú)各項(xiàng)計(jì)量性狀指標(biāo)中變異系數(shù)最大的是體質(zhì)量，為0.42。從11項(xiàng)計(jì)量性狀的數(shù)據(jù)對(duì)比可以看出雌魚(yú)個(gè)體間的變異較雄魚(yú)大，雄魚(yú)個(gè)體計(jì)量性狀相對(duì)較穩(wěn)定。為了分析雌雄間形態(tài)特征的差異，將雌雄個(gè)體的均值差與總體均值相除（MD／Mean）進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化處理，可得出：在所有個(gè)體計(jì)量性狀中，體質(zhì)量的差異最大，為0.29；其次為全長(zhǎng)和體長(zhǎng)，均值差／均值分別為0.13和0.12；眼徑和尾柄高的差異最小，均為0.01。

2.3 雜交黃顙魚(yú)“黃優(yōu)1號(hào)”主成分分析

為明確雜交黃顙魚(yú)的形態(tài)指標(biāo)體系，對(duì)22項(xiàng)性狀進(jìn)行主成分分析，篩選出前6個(gè)最大主成分貢獻(xiàn)率，以及各指標(biāo)在這6個(gè)主成分上的負(fù)荷量，發(fā)現(xiàn)它們的累積貢獻(xiàn)率達(dá)到76.36%，6個(gè)主成分及其包含的性狀和負(fù)荷量見(jiàn)表2。其中，主成分Ⅰ的貢獻(xiàn)率為27.49%，其中負(fù)荷量較大的包括體長(zhǎng)、全長(zhǎng)、頭長(zhǎng)、體高、吻長(zhǎng)、眼間距和體質(zhì)量等7項(xiàng)主要指標(biāo)，可以反映出雜交黃顙魚(yú)的整體輪廓特征；主成分Ⅱ貢獻(xiàn)率為11.24%，負(fù)荷量較大的是體長(zhǎng)／體高、尾柄長(zhǎng)／尾柄高以及肥滿度，反映的是雜交黃顙魚(yú)體型的肥瘦程度；主成分Ⅲ貢獻(xiàn)率為10.91%，主要包括眼徑、眼徑／吻長(zhǎng)以及頭長(zhǎng)／眼徑3個(gè)指標(biāo)，反映了雜交黃顙魚(yú)的眼間距特征；主成分Ⅳ貢獻(xiàn)率為9.67%，主要包括尾柄長(zhǎng)和尾柄長(zhǎng)／尾柄高2個(gè)指標(biāo)，反映了雜交黃顙魚(yú)的尾部特征；主成分Ⅴ的貢獻(xiàn)率為9.17%，主要包括眼徑／吻長(zhǎng)和頭長(zhǎng)／吻長(zhǎng)，反映了雜交黃顙魚(yú)的頭部特征；主成分Ⅵ貢獻(xiàn)率為7.89%，主要包括體厚、頭長(zhǎng)／吻長(zhǎng)和體高／體厚3個(gè)指標(biāo)，反映了雜交黃顙魚(yú)身體前部的T型構(gòu)造。

圖1 雜交黃顙魚(yú)“黃優(yōu)1號(hào)”雌雄體長(zhǎng)（A）和體質(zhì)量（B）的比較Fig．1 Comparison of body length（A）and body weight（B）of hybrid yellow catfish“Huangyou-1”between male and female

表1 雌雄雜交黃顙魚(yú)“黃優(yōu)1號(hào)”計(jì)量性狀比較Tab．1 Comparison of metrological traits of hybrid yellow catfish“Huangyou-1”between male and female

表2 6個(gè)主成分貢獻(xiàn)率及各指標(biāo)負(fù)荷量Tab．2 Contribution rate of six principal components and the load quantity of each index

根據(jù)主成分分析的結(jié)果，對(duì)主成分Ⅰ和主成分Ⅱ的雌雄個(gè)體主成分得分做出散點(diǎn)圖，可以看出，分散不明顯，但仍表現(xiàn)出分離態(tài)勢(shì)（圖2）。

圖2 雜交黃顙魚(yú)“黃優(yōu)1號(hào)”在主成分Ⅰ和主成分Ⅱ上的分布Fig．2 Distribution of hybrid yellow catfish“Huangyou-1”on principal componentⅠand principal componentⅡ

2.4 雜交黃顙魚(yú)“黃優(yōu)1號(hào)”雌雄判別分析

為了深入了解隨著個(gè)體生長(zhǎng)和年齡增長(zhǎng)，雜交黃顙魚(yú)雌雄形態(tài)差異的分化情況，對(duì)所采集的509尾雜交黃顙魚(yú)個(gè)體按照年齡的不同，篩選出2齡雜交黃顙魚(yú)326尾、3齡雜交黃顙魚(yú)183尾，通過(guò)SPSS 19.0軟件對(duì)雜交黃顙魚(yú)的體長(zhǎng)、全長(zhǎng)、頭長(zhǎng)、體高、尾柄高、尾柄長(zhǎng)、體厚、吻長(zhǎng)、眼徑、眼間距和體質(zhì)量11項(xiàng)計(jì)量性狀和11項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)化性狀進(jìn)行逐步判別分析，并根據(jù)各變量對(duì)模型貢獻(xiàn)大小，逐步剔除不相關(guān)變量，最終在2齡魚(yú)群體中篩選出8個(gè)變量，3齡魚(yú)群體中篩選出2個(gè)變量。

對(duì)2齡雜交黃顙魚(yú)進(jìn)行判別分析，篩選出的8個(gè)變量為 X1（體長(zhǎng)，cm）、X2（全長(zhǎng)，cm）、X3（體高，cm）、X4（體質(zhì)量，g）；X5（體長(zhǎng)／體高）、X6（頭長(zhǎng)／眼徑）、X7（體高／體寬）、X8（體長(zhǎng)／全長(zhǎng)）。這8個(gè)指標(biāo)反映了2齡魚(yú)雌雄個(gè)體在外部整體輪廓形態(tài)上的差異，根據(jù)篩選出的8個(gè)變量，建立典型判別模型方程為：

雌：F1＝5.854X1-8.737X2+2.02X3+0.839X4+2.181X5-0.272X6+0.701X7-3.895 X8-1.175

雄：F2＝-6.301X1+9.405X2-2.175X3-0.903X4-2.348X5+0.293X6-0.755X7+4.193 X8-1.331

判別函數(shù)的顯著性檢驗(yàn)顯示P＜0.01，表明判別函數(shù)達(dá)到極顯著水平。分別計(jì)算出雌雄個(gè)體的判別分?jǐn)?shù)值，得到2齡魚(yú)群體雌雄個(gè)體的頻布圖，表明該模型可以用于區(qū)分2齡雜交黃顙魚(yú)的性別（圖 3、圖 4）。

圖3 2齡雜交黃顙魚(yú)“黃優(yōu)1號(hào)”雌性個(gè)體判別分?jǐn)?shù)的頻布Fig．3 Frequency distribution of discriminant fraction of 2 years old female hybrid yellow catfish“Huangyou-1”

圖4 2齡雜交黃顙魚(yú)“黃優(yōu)1號(hào)”雄性個(gè)體判別分?jǐn)?shù)的頻布Fig．4 Frequency distribution of discriminant fraction of 2 years old male hybrid yellow catfish“Huangyou-1”

利用所建立的判別方程，對(duì)所采集的326尾2齡雜交黃顙魚(yú)進(jìn)行性別回判，將每尾個(gè)體的8個(gè)特征參數(shù)值代入方程，分別計(jì)算F1和F2，如果F1＞F2，則該個(gè)體為雌性，反之，為雄性。經(jīng)過(guò)驗(yàn)證，綜合判別的準(zhǔn)確率達(dá)到87.0%，其中雌性判別準(zhǔn)確率為89.3%，雄性判別準(zhǔn)確率為84.7%（表3）。同時(shí)，對(duì)篩選出的用于建立判別函數(shù)的8個(gè)性狀進(jìn)行t-檢驗(yàn)，結(jié)果顯示這8個(gè)性狀在雌雄個(gè)體之間全部呈現(xiàn)出極顯著差異（P＜0.01）（表4）。從以上8個(gè)性狀的數(shù)據(jù)分析中可以得出，2齡雜交黃顙魚(yú)雌雄個(gè)體在整體形態(tài)上具有較大差異，雄性個(gè)體較雌性更為豐滿，體型上呈現(xiàn)厚胖型。

表3 2齡雜交黃顙魚(yú)“黃優(yōu)1號(hào)”性別判別結(jié)果Tab．3 Discriminant results of sexual distinction of 2 years old hybrid yellow catfish“Huangyou-1”

表4 2齡雜交黃顙魚(yú)“黃優(yōu)1號(hào)”性狀的t-檢驗(yàn)及雌雄差異分析Tab．4 t-test and analysis of male and female traits of 2 years old hybrid yellow catfish“Huangyou-1”

對(duì)3齡雜交黃顙魚(yú)進(jìn)行判別分析，篩選出的2個(gè)變量為X1（全長(zhǎng)，cm）和X2（體質(zhì)量，g）。這兩個(gè)指標(biāo)反映了3齡魚(yú)雌雄個(gè)體在整體生長(zhǎng)上的差異。根據(jù)篩選出的2個(gè)變量，建立典型判別模型方程為：

雌：F1＝-2.114X1+0.766X2-1.173

雄：F2＝2.185X1-0.791X2-1.24

判別函數(shù)的顯著性檢驗(yàn)顯示P＜0.01，表明判別函數(shù)達(dá)到極顯著水平。分別計(jì)算出雌雄個(gè)體的判別分?jǐn)?shù)值，得到3齡魚(yú)群體雌雄個(gè)體的頻布圖。該模型可以用于區(qū)分3齡雜交黃顙魚(yú)的性別（圖5、圖6）。

圖5 3齡雜交黃顙魚(yú)“黃優(yōu)1號(hào)”雌性個(gè)體判別分?jǐn)?shù)的頻布Fig．5 Frequency distribution of discriminant fraction of 3 years old female hybrid yellow catfish“Huangyou-1”

圖6 3齡雜交黃顙魚(yú)“黃優(yōu)1號(hào)”雄性個(gè)體判別分?jǐn)?shù)的頻布Fig．6 Frequency distribution of discriminant fractions of 3 years old male hybrid yellow catfish“Huangyou-1”

利用所建立的判別方程，對(duì)采集的183尾3齡雜交黃顙魚(yú)進(jìn)行性別回判，將每尾個(gè)體的2個(gè)特征參數(shù)值代入方程，分別計(jì)算F1和F2，如果F1＞F2，則該個(gè)體為雌性，反之，為雄性。經(jīng)過(guò)驗(yàn)證，綜合判別的準(zhǔn)確率達(dá)到84.2%，其中雌性判別準(zhǔn)確率為83.9%，雄性判別準(zhǔn)確率為84.4%（表5）。同時(shí)，對(duì)篩選出的用于建立判別函數(shù)的2個(gè)性狀進(jìn)行t-檢驗(yàn)，結(jié)果顯示這2個(gè)性狀全部表現(xiàn)為雌雄個(gè)體之間的極顯著差異（P＜0.01）（表6）。從這2個(gè)性狀的數(shù)據(jù)分析中可以得出，3齡雜交黃顙魚(yú)雌雄個(gè)體的差異主要體現(xiàn)在外部形態(tài)上，在整體形態(tài)和體長(zhǎng)上已具有明顯差異，雄性較雌性個(gè)體表現(xiàn)為體長(zhǎng)更長(zhǎng)、體質(zhì)量更大，體型上呈現(xiàn)長(zhǎng)重型。

3 討論

形態(tài)學(xué)研究是雜交黃顙魚(yú)研究的重要內(nèi)容，與開(kāi)展雌雄差異分析、進(jìn)行雌雄性別鑒定息息相關(guān)。目前對(duì)雜交黃顙魚(yú)的形態(tài)學(xué)研究主要集中在不同群體、家系及親子代間的比較。如李镕等［19］對(duì)黃顙魚(yú)♀×烏蘇里鲿♂、黃顙魚(yú)♀×瓦氏黃顙魚(yú)♂的雜交后代進(jìn)行了同塘生長(zhǎng)對(duì)比和形態(tài)學(xué)測(cè)量研究；陳建明等［20］對(duì)雜交黃顙魚(yú)（Pelteobagrus fuividraco♀ ×P.vachelli♂）、瓦氏黃顙魚(yú)和黃顙魚(yú)形態(tài)指數(shù)、出肉率和肌肉的營(yíng)養(yǎng)組成等進(jìn)行了比較分析。近年來(lái)，多元統(tǒng)計(jì)分析方法如主成分分析、因子分析以及判別分析等廣泛應(yīng)用于水產(chǎn)科學(xué)領(lǐng)域研究。許多學(xué)者將主成分分析、判別分析等應(yīng)用于水產(chǎn)動(dòng)物雌雄個(gè)體形態(tài)差異分析上。諶微等［21］根據(jù)554尾大黃魚(yú)的12個(gè)計(jì)量性狀及11項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)化性狀，利用主成分分析、判別分析等方法，得出雌魚(yú)個(gè)體變異較雄魚(yú)更大，雌雄之間體長(zhǎng)／體厚差異最大。董浚鍵等［22］采用相關(guān)分析、通徑分析和判別分析，探究了翹嘴鱖（Siniperca chuatsi）主要形態(tài)性狀與體質(zhì)量的相關(guān)性，以及雌雄形態(tài)性狀的差異，結(jié)果表明，在各形態(tài)性狀中，全長(zhǎng)、體高與體質(zhì)量的相關(guān)系數(shù)最大，對(duì)體質(zhì)量的直接影響最大，性別判別方程對(duì)于體質(zhì)量小于200 g的個(gè)體判別準(zhǔn)確率較高。吳波等［23］對(duì) 178尾金線魚(yú) （Nemipterus virgatus）形態(tài)性狀進(jìn)行主成分分析和R-聚類分析，建立了金線魚(yú)雌雄判別方程，結(jié)果表明雌性個(gè)體相比于雄性個(gè)體具有體型較高、頭較大且吻較長(zhǎng)的特征。岳亮等［24］基于主成分分析、逐步判別分析和t-檢驗(yàn)的方法，對(duì)紅鰭東方鲀（Takifugu rubripes）雌雄個(gè)體形態(tài)差異做了比較分析。結(jié)果表明，雄性與雌性相比體型較寬且體周長(zhǎng)較長(zhǎng)。

魚(yú)類存在著兩性生長(zhǎng)差異現(xiàn)象，如大西洋鮭（Salmo salar）［25］、 裸 蓋 魚(yú) （Anoplopoma fimbria）［26］、半滑舌鰨（Cynoglossus semilaevis）［27］等不同性別個(gè)體之間存在著明顯差異。研究發(fā)現(xiàn)，雄魚(yú)的生長(zhǎng)速度優(yōu)于雌魚(yú)，雜交黃顙魚(yú)雌雄個(gè)體在外部形態(tài)上也顯示出差異性。通過(guò)分析雜交黃顙魚(yú)各計(jì)量性狀均值及其變異系數(shù)可以看出，雌魚(yú)個(gè)體間變異較雄魚(yú)大，而雄魚(yú)體型更為齊整、變異范圍小。分析各性狀變異系數(shù)，以雌魚(yú)尾柄高變異系數(shù)最大，為0.91，可能的原因?yàn)殡s交黃顙魚(yú)雌魚(yú)體型較雄魚(yú)更不穩(wěn)定，容易出現(xiàn)畸形。體質(zhì)量則雄魚(yú)變異系數(shù)更大為0.42，雌魚(yú)則為0.26，雌雄間差異較大。從各計(jì)量性狀均值可以看出，雄魚(yú)個(gè)體較雌魚(yú)更為豐滿，體型上為厚胖型，此結(jié)果在后續(xù)的判別分析中也得到了進(jìn)一步驗(yàn)證。

主成分分析結(jié)果顯示，排名前6位的主成分累計(jì)貢獻(xiàn)率為76.36%。這6個(gè)主成分分別代表雜交黃顙魚(yú)整體輪廓特征、肥瘦程度、眼間距特征、頭部特征、尾部特征和身體前部T型結(jié)構(gòu)特征。通過(guò)對(duì)這些指標(biāo)的測(cè)定和分析，基本可以反映雜交黃顙魚(yú)的外形特征。主成分分析的散布圖顯示，雌雄魚(yú)均成彌散型分布，表現(xiàn)出分離的趨勢(shì)，但雄魚(yú)相對(duì)雌魚(yú)更為集中，雌魚(yú)處在邊緣的個(gè)體明顯多于雄魚(yú)，分離態(tài)勢(shì)也更為明顯，進(jìn)一步驗(yàn)證了雌魚(yú)個(gè)體間變異較雄魚(yú)大。根據(jù)得分情況可知，對(duì)雌雄魚(yú)分離作用最大的是體質(zhì)量，分析原因應(yīng)為雌雄魚(yú)在3齡階段生長(zhǎng)產(chǎn)生了較大差異，這可為雜交黃顙魚(yú)雌雄判別提供重要參考。

表5 3齡雜交黃顙魚(yú)“黃優(yōu)1號(hào)”性別判別結(jié)果Tab．5 Discriminant results of sex distinction of 3 years old hybrid yellow catfish“Huangyou-1”

表6 3齡雜交黃顙魚(yú)“黃優(yōu)1號(hào)”性狀的t-檢驗(yàn)及性別差異分析Tab．6 t-test and analysis of sex distinct traits of 3 years old hybrid yellow catfish“Huangyou-1”

隨著魚(yú)類個(gè)體的生長(zhǎng)與形態(tài)發(fā)育，雜交黃顙魚(yú)不同年齡段個(gè)體表現(xiàn)出不同的外部形態(tài)特征，通過(guò)逐步判別分析分別建立的雜交黃顙魚(yú)2、3齡雌雄判別方程，可以有效地區(qū)分魚(yú)類雌雄差異。2齡魚(yú)群體的判別方程共有體長(zhǎng)、全長(zhǎng)、體高、體質(zhì)量、體長(zhǎng)／體高、頭長(zhǎng)／眼徑、體高／體厚、體長(zhǎng)／全長(zhǎng)8個(gè)變量，綜合準(zhǔn)確率達(dá)到了87.0%；3齡魚(yú)群體的判別方程僅有體長(zhǎng)和體質(zhì)量?jī)蓚€(gè)變量，綜合準(zhǔn)確率為84.2%，這表明在雜交黃顙魚(yú)的發(fā)育過(guò)程中，隨著年齡的增長(zhǎng)，雌雄差異逐漸明顯，顯示為更易簡(jiǎn)單區(qū)分。雌雄判別的頻步圖也顯示出篩選的變量可以有效判別雌雄差異。郭弘藝等［28］對(duì)長(zhǎng)江口銀色鰻（Anguilla japonica）的雌雄判別的準(zhǔn)確率達(dá)到了88.59%；吳波等［23］對(duì)金錢(qián)魚(yú)的雌雄綜合判別準(zhǔn)確率達(dá)到了85.96%；岳亮等［20］對(duì)紅鰭東方鲀的性別判別研究中，綜合判別準(zhǔn)確率均達(dá)到了81.90%?？梢?jiàn)建立形態(tài)學(xué)判別方程是鑒定魚(yú)類性別的一種有效的方法。此外t-檢驗(yàn)結(jié)果顯示，雌雄雜交黃顙魚(yú)的主要差異集中在肥滿度及外部輪廓指標(biāo)上，雄魚(yú)較雌魚(yú)體型寬且長(zhǎng)。

通過(guò)本研究發(fā)現(xiàn)，雌雄雜交黃顙魚(yú)在生長(zhǎng)過(guò)程中形態(tài)存在著明顯差異，多個(gè)性狀均達(dá)到極顯著差異（P＜0.01），證明了雜交黃顙魚(yú)雄魚(yú)生長(zhǎng)速度明顯優(yōu)于雌魚(yú)，但要找出雌雄魚(yú)生長(zhǎng)產(chǎn)生差異的具體階段還需要更深入的研究。在今后的性別差異研究中，需要進(jìn)一步考慮魚(yú)體規(guī)格、個(gè)體間差異大小以及形態(tài)指標(biāo)選取等因素。