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        肉蔻-5味丸對慢性抑郁模型大鼠血清IL-1和IL-6含量的影響

        2019-10-23 14:21:15呼日樂巴根烏蘭其其格蓮花宏梅烏日罕木奇佟海英
        關(guān)鍵詞:血清模型

        呼日樂巴根 烏蘭其其格 蓮花 宏梅 烏日罕 木奇 佟海英

        【摘 要】 目的:觀察肉蔻-5味丸對慢性抑郁模型大鼠血清IL-1和IL-6含量的影響,探討其抗抑郁機制。方法:60只雄性SD大鼠,隨機分為正常組、模型組、西藥組(鹽酸氟西汀0.0036g/kg),蒙藥低、中、高劑量組(分別給予肉蔻-5味丸0.2、0.4、0.8 g/kg),每組10只。建立CUMS模型,同時ig給藥,每天1次,連續(xù)給藥21d。以體重變化、糖水消耗實驗進行評價模型,ELISA檢測大鼠血清IL-1和IL-6的含量。結(jié)果:實驗過程中模型組大鼠體重增長較緩慢,糖水消耗量降低,應(yīng)激結(jié)束時,與正常組比較模型大鼠血清IL-1和IL-6的含量明顯升高,而鹽酸氟西汀和蒙藥肉蔻-5味丸均可不同程度改善模型大鼠抑郁狀態(tài)。與模型組比較,給予鹽酸氟西汀和蒙藥肉蔻-5味丸高、中劑量組大鼠血清IL-1和IL-6含量明顯降低(P<0.05);低劑量組大鼠血清IL-1和IL-6含量有降低趨勢,但無統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論:蒙藥肉蔻-5味丸可通過抑制模型大鼠血清IL-1和IL-6含量升高發(fā)揮抗抑郁作用。

        【關(guān)鍵詞】 肉蔻-5味丸;抑郁模型;大鼠;IL-1;IL-6

        【中圖分類號】R285.5 【文獻標(biāo)志碼】 A【文章編號】1007-8517(2019)15-0009-04

        抑郁癥(Major Depressive Disorder,MDD)是一種患病率、復(fù)發(fā)率、自殺率較高的慢性精神障礙疾病,帶來嚴(yán)重社會經(jīng)濟負(fù)擔(dān),已成為世界范圍內(nèi)最有負(fù)擔(dān)的疾病,其致殘率超過缺血性心腦血管疾病,將成為全世界第二大致殘疾病[1-2]。目前,盡管研發(fā)有很多抗抑郁藥,但仍存在療效不佳或反應(yīng)差異、長期服用出現(xiàn)毒副作用以及停藥后復(fù)發(fā)等不令患者滿意的問題[3-4]。民族醫(yī)藥其獨特的診療方法及藥物,在治療疑難雜病方面發(fā)揮著一定作用,日益受到抑郁癥研究者的關(guān)注。蒙醫(yī)驗方肉蔻-5味丸是蒙醫(yī)臨床上常用于治療“赫依”病、心煩失眠、心神不安、心跳、心悸、胸悶氣喘、心絞痛等心血管疾病及抑郁、焦慮等病癥[5-6],并療效顯著。本藥方出自于蒙醫(yī)經(jīng)典著作《蒙醫(yī)成方集》,在《蒙醫(yī)百科全書·蒙醫(yī)學(xué)》和《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)·蒙藥分冊》均有記載,由肉豆蔻、廣棗、蓽茇、土木香、木香等5種天然藥物組成。前期研究已發(fā)現(xiàn)其能夠改善慢性抑郁模型大鼠抑郁狀態(tài)[7-8]。研究以蒙醫(yī)驗方肉蔻-5味丸為受試藥,利用慢性輕度不可預(yù)知性應(yīng)激(Chronic unpredictable mild stress,CUMS)結(jié)合孤養(yǎng)方法,建立CUMS大鼠模型,并給藥干預(yù)后觀察其對CUMS大鼠血清白細(xì)胞介素1(interleukin,IL-1)和白細(xì)胞介素6(interleukin,IL-6)含量的影響,從而探討其抗抑郁作用途徑。

        1 材料

        1.1 動物 清潔級SD雄性大白鼠,體質(zhì)量為180~220g,北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公提供,許可證號:SCXK(京)20140004。

        1.2 受試藥及試劑 肉蔻-5味丸(批號:Z15020881,內(nèi)蒙古自治區(qū)庫倫蒙藥廠);鹽酸氟西汀膠囊(批號:H20073985,山西仟源制藥股份有限公司);水合氯醛(批號:20130401,天津市福晨化學(xué)試劑廠);IL-1(批號:CSB-E08055r)、IL-6(批號:CSB-E04640r)等ELISA試劑盒均由武漢華美生物工程有限公司提供。

        1.3 儀器 MULTISKAN MK3酶聯(lián)免疫吸附儀(美國Thermo公司);ST16R高速低溫離心機(美國Thermo公司);BSA124SCW電子天秤(德國Sartorius科學(xué)儀器有限公司);DHG9145電熱鼓風(fēng)干燥箱(中國上海一恒科學(xué)儀器有限公司);5mL真空采血管、采血針、手術(shù)刀、鑷子等器材。

        2 方法

        2.1 分組及給藥 將60只大鼠一周適應(yīng)性飼養(yǎng)之后按體質(zhì)量隨機分為正常組、模型組、西藥組、蒙藥肉蔻-5味丸低、中、高劑量組等6組,每組10只。應(yīng)激同時對各組大鼠進行ig給藥,除正常組和模型組給予等量生理鹽水外,西藥組給予鹽酸氟西汀3.6mg/kg,蒙藥低、中、高劑量組給予0.2、0.4、0.8g/kg不同劑量的肉蔻-5味丸。每日固定時間給藥1次,給藥體積為1mL/100g,連續(xù)刺激21天,同時給藥干預(yù)。

        2.2 復(fù)制模型方法[9-10] 采取CUMS和孤養(yǎng)兩種經(jīng)典造模方法的配合使用,建立抑郁癥動物模型。將正常組5只為一籠群養(yǎng),不給予任何外界刺激,并自由飲水?dāng)z食。其余各組大鼠孤養(yǎng),并每天給予不同刺激,且接受刺激盡量反差較大確保不可預(yù)知目的,應(yīng)激源包括24h禁食禁水, 5min游泳4℃冷水, 5min放置45℃熱環(huán)境,1min夾尾,15min高速水平震蕩,24h潮濕墊料,12h晝夜顛倒等7種。各組大鼠每天接受隨機安排的一種刺激,對一組大鼠不能連續(xù)接受同種刺激,且同種刺激最多使用3次。

        2.3 體質(zhì)量變化 每日給藥時觀察大鼠的一般狀態(tài),并稱量大鼠體質(zhì)量,記錄統(tǒng)計造模前和造模后第14天、第21天之間的差異變化。

        2.4 糖水消耗測試(sucrose preference test,SPT)???? 測試前對各組大白鼠適應(yīng)性飲用1%蔗糖水48h,盡量避免產(chǎn)生其對新事物的恐懼感,以及避免飲水位置的偏愛,每日要調(diào)換一次飲水瓶的位置。測試時,先將大白鼠禁水4h后給予等體積或重量A和B兩瓶水(A瓶水為自來水,B瓶水為1%蔗糖水),分別計算大白鼠在飲用1h期間的糖水?dāng)z取量和自來水?dāng)z取量(糖水偏好% =[A/(A+B)]×100%)。

        2.5 檢測指標(biāo) SPT 實驗結(jié)束后10%水合氯醛(體積為0.3mL/100g)麻醉大鼠,縱向切開腹部,用5mL真空采血管從腹主動脈取血,待凝血后轉(zhuǎn)速為每分鐘3500r離心15min。取上清液移置于血清杯后24℃冰箱保存待測。按照IL-1和IL-6試劑盒的操作說明進行檢測含量。

        [4]Aaron T.Beck,Brad Alford著,楊芳等譯.抑郁癥[M].北京:機械工業(yè)出版社,2014:268-269.

        [5]中華人民共和國衛(wèi)生部藥典委員會.中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)·蒙藥分冊[S].1998:89.

        [6]白清云.中國醫(yī)學(xué)百科全書-蒙醫(yī)學(xué)[M].上海:上??萍汲霭嫔?,1992:266.

        [7]呼日樂巴根,佟海英,松林,等.肉蔻-5味丸對慢性抑郁模型大鼠行為及海馬單胺遞質(zhì)的影響[J].中國實驗方劑學(xué)雜志2015,21(11):146-149.

        [8]呼日樂巴根,松林,阿拉木斯,等.肉蔻-5味丸對慢性抑郁模型大鼠血清ACTH和CORT含量的影響[J].中國民族醫(yī)藥雜志,2015,17(3):47-49.

        [9]Willner P.Chronic mild stress(CMS) revisited:consistency and behavioural neurobiological concordance in the effects of CMS[J].Neuropsychobiology,2005,52(2):90.

        [10]Banasr M,Duman R S.Giial loss in the prefrontal cortex is sufficient to induce depressive like behaviors

        [J].Biol Psychiatry,2008,64(10):863.

        [11]DixonJB,Hayden MJ,Lambert GW,et al.Raised CRP Levels in obese patients:symptoms of depression have independent positive association[J].Obesity,2008,16(9):2010-2015.

        [12]Rosel P,Arranz B,Vrretarizcaya M,et al.Alterd and 5-HT P ostsynaptic Receptors and Their Intracellular Signalling Systems IP(3) and cAMP in Brains from Depressed Violent Suicide Victims[J].Neuropsy chobiology,2004,49(4):189-192.

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        [15]羅布桑卻琵勒.蒙醫(yī)藥選編[M].呼和浩特:內(nèi)蒙古人民出版社,1974(12):5.

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        (收稿日期:2019-05-21 編輯:劉斌)

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