劉艷 周文梟 聶釗 曾世祥
南寧市食品藥品檢驗(yàn)所 廣西南寧 530000
我國(guó)醫(yī)學(xué)在經(jīng)濟(jì)的發(fā)展中有較大的提高,其中中草藥能夠有效預(yù)防一些疾病的發(fā)生,在治療過(guò)程中有較為明顯的應(yīng)用效果。中草藥能夠提升動(dòng)物飼料轉(zhuǎn)化率,在較大程度上可促進(jìn)動(dòng)物發(fā)育,并在此基礎(chǔ)上還能夠使動(dòng)物免疫能力得到有效提升。在對(duì)中草藥進(jìn)行研究的過(guò)程中,微生物發(fā)酵是中草藥一種新的研究方法,微生物在降解的過(guò)程中,中草藥活性物質(zhì)被釋放,并且還會(huì)使代謝途徑發(fā)生改變,以此產(chǎn)生新活性物質(zhì)。
試驗(yàn)材料主要有菌株與中草藥,其中菌株有R3、羅伊氏乳桿菌、乳酸片球菌、6133以及LP等,由山東寶來(lái)利來(lái)生物研究院菌種保藏中心保存;中草藥有板藍(lán)根、甘草以及苦丁等,在永春堂藥店購(gòu)置[1]。
(1)中草藥發(fā)酵。首先磨制中草藥,將其磨制成粉狀,不同材料分別取8 g放置于250 ml三角瓶中,加入適量純凈水,再將其放入到120度環(huán)境中進(jìn)行殺菌處理,將乳酸桿菌菌液以一定濃度融入到三角瓶中,最后將其放置在30度的環(huán)境中進(jìn)行培養(yǎng),一般情況下培養(yǎng)時(shí)間為30 h。
(2)活菌數(shù)檢測(cè)。發(fā)酵后,將不同三角瓶中的發(fā)酵液取出1 ml,并將其放置于含有生理鹽水的試管中均勻震蕩,然后取出1 ml放置于下一試管中,以此對(duì)發(fā)酵液進(jìn)行有效的稀釋,以此達(dá)到一定的稀釋濃度,再將稀釋過(guò)程中不同稀釋濃度各取1 ml滴于滅菌板中個(gè),鍵入MRS培養(yǎng)基,均勻搖晃,在30度環(huán)境中進(jìn)行培養(yǎng),其培養(yǎng)時(shí)間為48 h。
(3)體外抑菌試驗(yàn)。在滅菌培養(yǎng)皿中放置15 ml LB培養(yǎng)基,待其凝固后再把適量指示菌液加入到平皿中,并在此基礎(chǔ)上LB培養(yǎng)基5 ml,以此作為菌層。在不同平板中放置牛津杯,確保與平板培養(yǎng)基無(wú)縫隙。離心發(fā)酵液,在牛津杯中倒入上清液,靜止10 min,在37度培養(yǎng)箱中,24 h后記錄抑菌圈直徑。若直徑大于20 mm為極敏,抑菌圈直徑為 10-15 mm 為中敏,直徑在15-20 mm時(shí)為高敏,直徑小于10 mm時(shí)為低敏,無(wú)抑菌圈為無(wú)敏[2]。
由表1顯示,發(fā)酵后中草藥與為發(fā)酵相比,乳酸片球菌、R3、羅伊氏乳桿菌以及6133發(fā)酵板藍(lán)根抑菌效果較為明顯;RDH與1.1855發(fā)酵產(chǎn)物有不同程度的抑菌效果;R3、羅伊氏乳桿菌以及6133發(fā)酵陳皮抑菌效果較為明顯,乳酸片球菌、RDH以及PP發(fā)酵產(chǎn)物有不同程度抑菌效果[3]。
表1 發(fā)酵中草藥上清液對(duì)大腸桿菌抑制作用
發(fā)酵后中草藥與為發(fā)酵相比,羅伊氏乳桿菌、R3以及6133發(fā)酵板藍(lán)根具有較好的抑菌效果,其中乳酸片球菌、RDH發(fā)酵產(chǎn)物具有較高的抑菌效果。羅伊氏乳桿菌、乳酸片球菌、R3以及6133發(fā)酵陳皮,具有較好的抑菌效果,其中1.1855、RDH發(fā)酵產(chǎn)物具有較好的抑菌效果。羅伊氏乳桿菌、乳酸片球菌、6133/1.1855以及RDH發(fā)酵苦藠,具有較好的抑菌效果。由此可以看出,羅伊氏乳桿菌、6133發(fā)酵板藍(lán)根、陳皮以及苦藠的上清液對(duì)沙門(mén)氏菌具有較好的抑菌效果。
該實(shí)驗(yàn)在進(jìn)行軟酸菌發(fā)酵中草藥的過(guò)程中,主要使用了5味中草藥,根據(jù)有效的檢測(cè)方法對(duì)乳酸菌的生長(zhǎng)情況進(jìn)行深入的分析,并且在此基礎(chǔ)上還檢測(cè)了發(fā)酵產(chǎn)物對(duì)一些菌類(lèi)的抑制作用。由此可以看出,5味中草藥能夠使乳酸菌較好生長(zhǎng),由此可以看出,中草藥能夠?yàn)槿樗峋纳L(zhǎng)提供所需物質(zhì),這在一定程度上表明5味中草藥發(fā)酵后使抑菌活性得到有效增強(qiáng),主要是因在乳酸菌的影響下中草藥能夠釋放更多抑菌活性成分,乳酸菌通過(guò)酶系統(tǒng)產(chǎn)生了新的抗菌活性物質(zhì)。
綜上所述,乳酸菌在對(duì)中草藥發(fā)酵的過(guò)程中,中草藥成分初心了不同程度的變化,在此過(guò)程中使發(fā)酵產(chǎn)物抑菌效果逐漸增強(qiáng),以此能夠通過(guò)乳酸菌發(fā)酵中草藥,對(duì)更好的抗菌藥物實(shí)施有效選擇,這對(duì)我國(guó)畜牧業(yè)的良好生產(chǎn)具有較大的促進(jìn)作用,為我國(guó)經(jīng)濟(jì)發(fā)展奠定良好的基礎(chǔ)。