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        復(fù)合真菌多糖調(diào)節(jié)免疫活性研究

        2019-10-21 21:58:02周建湘
        食品安全導(dǎo)刊·下旬刊 2019年4期

        摘 要:真菌多糖具有多方面的生物活性。本文選取多種食用真菌,提取復(fù)合真菌多糖溶液,測定其多糖含量及免疫調(diào)節(jié)活性。結(jié)果表明:溶液中多糖含量為4.82%,中劑量組、高劑量組能顯著提高免疫低下小鼠的機(jī)體免疫功能,具有免疫調(diào)節(jié)功效。

        關(guān)鍵詞:復(fù)合真菌多糖;使用真菌;免疫調(diào)節(jié)

        食用真菌是我國的一大產(chǎn)業(yè)。多糖是由多個(gè)單糖分子縮合、失水而成,是一類分子結(jié)構(gòu)復(fù)雜的糖類物質(zhì)。研究表明,食用真菌所含的真菌多糖具有多方面的生物活性,如免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗病毒等方面,因此對真菌多糖進(jìn)行研究具有十分重要的意義[1-2]。

        1 復(fù)合真菌多糖溶液制備

        選取香菇、茯苓、靈芝和猴頭菌等干燥食用真菌,混合粉碎過篩,加入3倍體積(重量)的水,煎煮30 min,

        離心;沉淀繼續(xù)加水,重復(fù)煎煮1次,離心,合并離心上清液,減壓濃縮至原重量。

        2 多糖含量測定

        除去樣品中的蛋白質(zhì)后,利用還原糖的還原特性,以次甲基藍(lán)為指示劑,先加入定量鐵氰化鉀溶液,然后用葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)滴定液進(jìn)行氧化還原滴定,根據(jù)葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)滴定液的消耗量,計(jì)算還原糖含量,最終得出多糖含量。

        3 免疫調(diào)節(jié)實(shí)驗(yàn)

        3.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

        SPF級小鼠,體重:20~30 g,合格證號:44002100010104,由南方醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。適應(yīng)性飼養(yǎng)3天后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

        3.2 主要試劑及儀器

        主要試劑:環(huán)磷酰胺、西班牙瓊脂糖,購于瑞舒生物科技有限公司;凍干豚鼠血清(補(bǔ)體)、兔抗綿陽紅細(xì)胞抗體(溶血素),購于鄭州生物科技有限公司。

        主要儀器:電子分析天平AE240、高速冷凍離心機(jī)、微量取樣器。

        3.3 實(shí)驗(yàn)方法

        將小鼠隨機(jī)分成正常對照組、模型對照組、復(fù)合多糖低劑量組、中劑量組和高劑量組。每組10只(每組用15只,防止部分小鼠死亡)。參考FDA推薦量,以人體10倍劑量為低劑量組,20倍劑量為中劑量組,30倍劑量為高劑量組對各組小鼠灌胃:低劑量組3.3 mL/(kg·d)(以體質(zhì)量計(jì),下同),中劑量組灌胃6.6 mL/(kg·d),高劑量組9.9 mL/(kg·d),模型組和正常對照組灌胃蒸餾水,灌胃量為0.01 mL/g,每天一次,連續(xù)30天。模型對照組、低劑量組、中劑量組、高劑量組均于首次給藥后第1、3、5、17、19天和21天皮下注射環(huán)磷酰胺40 mg/kg,1次/天,建立免疫功能低下小鼠模型;正常對照組小鼠皮下注射等量生理鹽水。于末次給藥后,各組小鼠禁食不禁水12 h,然后進(jìn)行各免疫指標(biāo)測定。

        將持續(xù)灌胃30 d的小鼠稱質(zhì)量后引頸處死,解剖取小鼠脾、 胸腺, 稱質(zhì)量,計(jì)算脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)。

        4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

        實(shí)驗(yàn)測得多糖含量為4.82%,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明(表1所示),模型組脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)均低于其他各組,和空白組相比,差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),表明環(huán)磷酰胺降低了模型小鼠的脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù);復(fù)合真菌多糖中劑量組、高劑量組的脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)高于模型組,且中劑量組與模型組的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),高劑量組與模型組的差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),表明復(fù)合真菌多糖中劑量組、高劑量組可提高免疫低下小鼠的脾臟、胸腺指數(shù)。

        表中數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示;*、**分別代表與模型組相比在P<0.05和P<0.01水平上的差異。

        5 結(jié)論

        本文采用環(huán)磷酰胺作為免疫抑制劑,建立了免疫低下模型小鼠,研究復(fù)合真菌多糖對模型小鼠的免疫調(diào)節(jié)作用。結(jié)果表明,復(fù)合真菌多糖中劑量組、高劑量組能顯著提高免疫低下小鼠的機(jī)體免疫功能,具有免疫調(diào)節(jié)功效。對復(fù)合真菌多糖相關(guān)產(chǎn)品的開發(fā)具有參考意義。

        參考文獻(xiàn)

        [1]歐陽天贄,李小定,榮建華.真菌多糖抗腫瘤及免疫調(diào)節(jié)作用研究進(jìn)展[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā),2006,18(3):524-528.

        [2]郭春沅.真菌多糖的免疫調(diào)節(jié)作用[J].中國食用菌,2000,19(3):6-7.

        作者簡介:周建湘(1988—),男,漢族,湖南湘潭人,碩士,工程師。研究方向:食品生物技術(shù)、藥品研發(fā)。

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