黎家輝 王偉 張依

摘 要：如何高效快速鑒別蜂膠的真?zhèn)问且恢崩_蜂膠從業(yè)者的一個難題。近年來，蜂膠的質(zhì)量鑒別技術(shù)有了較快的發(fā)展，特別是液相色譜法具有快速、準(zhǔn)確的特點(diǎn)，本文介紹了液相色譜法檢測蜂膠中的楊樹膠的方法。

關(guān)鍵詞：蜂膠；楊樹膠；液相色譜

蜂膠是蜜蜂采集植物的芽苞或樹皮裂縫分泌的樹脂并混入其上顎腺分泌物和蜂蠟等而形成的一種具有芳香氣味的膠狀固體物。自古以來就被廣泛應(yīng)用，是載于《神農(nóng)本草經(jīng)》中的“露蜂房”的主要成分之一1。現(xiàn)代科學(xué)研究表明，蜂膠具有抗菌、抗炎2，3、抗氧化4、降血糖、抗腫瘤5、增強(qiáng)免疫力等廣泛的生物活性，已被收錄入《中華人民共和國藥典》，廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、保健食品、化妝品等多個領(lǐng)域，是一種重要的醫(yī)藥和功能食品原料。

溫帶地區(qū)蜂膠公認(rèn)的植物來源主要以楊屬（Populus）及其雜交屬的芽苞分泌物為主6。由于這些地區(qū)的蜂膠成分與楊樹膠的成分及其相似7，8，市場上出現(xiàn)了以楊樹膠充當(dāng)蜂膠的現(xiàn)象，嚴(yán)重干擾了市場秩序，對食品藥品安全提出了新的挑戰(zhàn)。因此，找到快速準(zhǔn)確的鑒別蜂膠和楊樹膠的方法就成為當(dāng)務(wù)之急。

近年來，蜂膠和楊樹膠成分的對比研究為蜂膠的質(zhì)量控制奠定了良好的基礎(chǔ)，建立發(fā)展的鑒別方法主要有：HPLC法9、液相色譜質(zhì)譜法、氣相色譜質(zhì)譜法、熱分析法、二維相關(guān)紅外光譜法10、紫外光譜、電子鼻等方法。特別是液相色譜法，逐漸被行業(yè)認(rèn)可應(yīng)用，并上升為標(biāo)準(zhǔn)檢測方法。

在液相色譜法建立的過程中，潘建國11等采用液相色譜法在蜂膠中檢測到10-羥基-2-癸烯酸（10-HAD），含量約為0.22%。10-HDA是由蜜蜂上顎腺和咽下腺分泌的一種蜂王漿中所特有的高效生物活性物質(zhì)，蜜蜂可能在采膠的過程中加入了該物質(zhì)。然而他們僅測定了3個樣本，是否所有蜂膠中都含有10-HDA，以及含量的多少等都有待進(jìn)一步研究。盛文勝12等用液相色譜法對蜂膠與楊樹膠中肉桂酸含量進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)真假蜂膠中肉桂酸的含量存在差異。但是不同產(chǎn)地的蜂膠中同一成分的含量也會存在較大差異，因此該方法的可行性還需要進(jìn)一步論證。

液相色譜指紋圖譜近年在蜂膠與楊樹膠鑒別方面有了較大的進(jìn)展。周萍9等測定了蜂膠、楊樹膠和摻假蜂膠的HPLC指紋圖譜，發(fā)現(xiàn)蜂膠含有2個楊樹膠不含有的特征峰，楊樹膠中含有1個蜂膠中不含有的特征峰。他們對不同產(chǎn)地來源的62個蜂膠樣品建立了HPLC指紋圖譜，將蜂膠圖譜分為六個區(qū)域，提出了以第四區(qū)的1號峰、2號峰、5號峰為蜂膠鑒別的主要依據(jù)，結(jié)合6個區(qū)域的指紋圖譜進(jìn)行真?zhèn)舞b別13。在此基礎(chǔ)上，還建立了區(qū)分蜂膠與楊樹膠的HPLC指紋圖譜，以對照模板為參照，通過《中藥指紋圖譜相似度計算軟件》計算，對蜂膠、楊樹膠、蜂膠中摻楊樹膠、蜂膠中摻外源性黃酮類化合物、既非蜂膠又非楊樹膠等樣品的相似度范圍進(jìn)行了限定14。該方法可以鑒別出楊樹膠摻假量40%以上的樣品。

張翠平等15采用HPLC建立了區(qū)分蜂膠與楊樹膠的指紋圖譜，發(fā)現(xiàn)8個不同產(chǎn)地蜂膠的HPLC指紋圖譜十分相似，與楊樹膠表現(xiàn)出完全不同的指紋圖譜。其中，蜂膠中2個共有峰是楊樹膠中沒有的特征峰，而3個不同來源的楊樹膠中有3個共有峰是蜂膠中沒有的特征峰，且這5個特征峰明顯，相互間獨(dú)立，沒有干擾，易鑒別。

王小平等16以蜂膠和樹膠中各種成分的相對含量的不同為基礎(chǔ)，建立了蜂膠指紋圖譜分析方法，確定有13個共有峰，其中4個成分為已知成分。實(shí)驗批次中，真蜂膠中8號峰和10號峰的峰面積都很小，但在假蜂膠中這2個峰積分面積均較大，因此認(rèn)為可以通過這2個峰的積分面積大小來進(jìn)行蜂膠與楊樹膠的鑒別。但該方法同樣存在樣本量少的缺陷，仍需進(jìn)一步研究確認(rèn)。

由于液相色譜指紋圖譜具有“整體性”和“模糊性”的特點(diǎn)，沒有明確的標(biāo)準(zhǔn)樣品對照的情況下，不同檢測條件下的圖譜難以完全重復(fù)，難以滿足蜂膠的鑒別鑒定所要求的準(zhǔn)確性與可重復(fù)性，因此在準(zhǔn)確性與可重復(fù)性的研究上還有很長的路需要走。

當(dāng)然，除了液相色譜法，蜂膠的真?zhèn)舞b別近年來也發(fā)展建立了很多其他方法，如氣相色譜法、氣相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用法、熱分析法、二維相關(guān)紅外光譜法、紫外光譜、拉曼光譜法、電子鼻等，但是這些技術(shù)都還處于探索階段，距離應(yīng)用還有很長的路要走。

感謝河南省高等學(xué)校大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計劃項目（項目編號：S201811517003）的資助。

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