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        朱日亨滴丸中廣棗鞣花酸含量測(cè)定

        2019-10-19 03:53:18格格日勒那生桑
        亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥 2019年9期

        格格日勒,那生桑

        (1.阿拉善盟蒙醫(yī)醫(yī)院 藥品質(zhì)量檢查室,內(nèi)蒙古 阿拉善盟750300;2.內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué) 蒙醫(yī)藥研究院,內(nèi)蒙古 呼和浩特010010)

        朱日亨滴丸是在著名蒙醫(yī)專(zhuān)家蘇榮扎布教授治療心臟病的蒙藥驗(yàn)方——朱日亨水丸的基礎(chǔ)上進(jìn)行劑型改良而研制的新制劑,由廣棗、紅花、梔子等10味中藥組成,具有清心熱、化瘀血、補(bǔ)心之功效,可用于治療心熱、心赫依、心刺痛、心慌氣短等病證,對(duì)冠心病有良好的療效。

        相關(guān)研究表明[1-4],朱日亨滴丸的君藥廣棗具有抵抗心律失常和心跳減慢、保護(hù)心肌缺血、影響血液動(dòng)力學(xué)、抗氧化、提高免疫力、保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞和抗白血病等作用,其主要活性成分為黃酮類(lèi)和酚酸類(lèi)成分。本研究選擇其酚酸類(lèi)成分鞣花酸作為檢測(cè)指標(biāo),并通過(guò)測(cè)定其含量來(lái)進(jìn)行質(zhì)量控制研究。

        1 儀器與試藥

        1.1 儀器

        超高效液相色譜儀WATERS HI3CHA;超聲波清洗器KQ-250DE;微量電子天平AB135-S;電子天平JA5003N。

        1.2 試藥

        鞣花酸對(duì)照品(批號(hào)201310),山東省分析檢測(cè)中心提供;朱日亨滴丸,由內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)提供;乙腈為色譜純;水為超純水,其他試劑均為分析純。

        2 方法與結(jié)果

        2.1 色譜條件

        色譜柱:色譜柱填充劑為十八烷基硅烷鍵合硅膠,本實(shí)驗(yàn)研究采用ZORBAX Eclipse XDB-C18柱(4.6 mm×150mm.5μm);流動(dòng)相:乙腈-0.1%磷酸水溶液(15∶85);流速:1.0mL/min;柱溫:25℃;檢測(cè)波長(zhǎng):254nm;進(jìn)樣量:5μL。

        2.2 溶液制備

        2.2.1 對(duì)照品溶液的制備 取鞣花酸對(duì)照品1 mg,精密稱(chēng)定,置25 mL的容量瓶中,加甲醇配制成1 mL含0.04 mg鞣花酸的溶液,搖勻,作為對(duì)照品溶液。

        2.2.2 供試品溶液的制備 取本品細(xì)粉0.5 g,精密稱(chēng)定,加甲醇10 mL,超聲處理40 min,取出,冷卻,用甲醇定容至10 mL量瓶中,濾過(guò),取續(xù)濾液,作為供試品溶液。

        2.2.3 陰性對(duì)照品溶液的制備 取處方藥(缺廣棗)按相同工藝制備成陰性對(duì)照品,按供試品溶液的制備法制備,作為陰性對(duì)照品溶液。

        2.3 方法學(xué)考察

        2.3.1 專(zhuān)屬性試驗(yàn) 按“2.1”項(xiàng)下色譜條件,精密吸取供試品溶液、對(duì)照品溶液及陰性對(duì)照品溶液各5μL,分別進(jìn)樣。鞣花酸的出峰時(shí)間約為18.0min,鞣花酸與樣品中其他組分色譜峰可達(dá)基線(xiàn)分離,且與相鄰色譜峰分離度7.18,檢測(cè)峰理論塔板數(shù)10 507,拖尾因子均在0.95~1.05,陰性對(duì)照樣品無(wú)干擾。見(jiàn)圖1。

        圖1 專(zhuān)屬性色譜

        2.3.2 線(xiàn)性關(guān)系考察 精密稱(chēng)取鞣花酸對(duì)照品,加甲醇制成每1 mL含0.005 mg鞣花酸的對(duì)照品溶液,精密吸取1、2、4、6、8、10μL,按“2.1”項(xiàng)下色譜條件,分別進(jìn)樣。以鞣花酸進(jìn)樣量(μg)為橫坐標(biāo),鞣花酸峰面積為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),得鞣花酸的回歸方程為:Y=5 009 988.493 2X-1 345.202 7(r=0.999 7)。鞣花酸在0.005~0.05μg范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線(xiàn)性關(guān)系,見(jiàn)表1和圖2。

        表1 線(xiàn)性關(guān)系考察結(jié)果

        圖2 鞣花酸標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)

        2.3.3 精密度試驗(yàn) 按“2.1”項(xiàng)下色譜條件,精密吸取供試品溶液5μL,連續(xù)進(jìn)樣6次,測(cè)定峰面積,結(jié)果鞣花酸峰面積的RSD為0.8%,表明儀器的精密度良好。

        2.3.4 穩(wěn)定性試驗(yàn) 精密吸取同一供試品溶液適量,室溫下放置,于0、2、6、8、12、24h分別進(jìn)樣5μL,按“2.1”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定,考察其穩(wěn)定性。鞣花酸峰面積RSD為0.6%,結(jié)果表明供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定。

        2.3.5 重復(fù)性試驗(yàn) 取同一批樣品,共6份,精密稱(chēng)定,按“2.2.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液,分別進(jìn)樣5μL,按“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測(cè)定,考察其重復(fù)性。鞣花酸峰面積RSD為1.7%,結(jié)果表明,上述方法重復(fù)性良好。

        2.3.6 加樣回收率試驗(yàn) 精密稱(chēng)取0.25g已知含量的樣品共六份,分別精密加入0.142 5 mg鞣花酸對(duì)照品,按“2.2.2”項(xiàng)下方法制備,分別進(jìn)樣5μL,按“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測(cè)定,計(jì)算回收率,結(jié)果鞣花酸平均回收率為101.36%。結(jié)果見(jiàn)表2。

        表2 加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果

        2.4 樣品含量測(cè)定

        取3批不同批次的朱日亨滴丸,按“2.2.2”項(xiàng)下方法制備,分別進(jìn)樣5μL,按“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測(cè)定,計(jì)算鞣花酸的含量,結(jié)果見(jiàn)表3。

        表3 含量測(cè)定結(jié)果

        3 討論

        本方中其他組分對(duì)鞣花酸的測(cè)定無(wú)干擾,且據(jù)報(bào)道,鞣花酸具有抗氧化、凝血、降血壓、鎮(zhèn)靜、抗缺氧缺血所致心腦疾病、抗癌等藥理作用[5-9],較符合此成方制劑中廣棗的功效。因此本實(shí)驗(yàn)以鞣花酸為檢測(cè)指標(biāo),采用HPLC法測(cè)定朱日亨滴丸中廣棗的含量,結(jié)果表明,本研究所用方法簡(jiǎn)便、靈敏、準(zhǔn)確、重復(fù)性好,為建立朱日亨滴丸的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及合理開(kāi)發(fā)利用提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

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