羅 倩，田劍峰，向 準*

（1 貴州師范學院，貴州貴陽 550018；2 貴州科學院，貴州貴陽）

菊花滑刃線蟲（Aphelenchoides ritzemabosi）別名菊花葉枯線蟲或腋芽滑刃線蟲[1]，寄主范圍廣，包括園林觀賞植物、小果類植物、蔬菜、雜草等200 多種植物，主要為害植物的葉片、幼芽和花，直接影響產(chǎn)花量，造成觀賞價值的喪失，嚴重時可造成植株死亡，是菊花上的重要病害[2]。菊花滑刃線蟲在全球分布廣[3]，為害重，被多個國家列為檢驗檢疫對象。在我國，菊花滑刃線蟲于2006 年被列為全國農(nóng)業(yè)植物檢疫性有害生物[1]，2012年發(fā)布了該線蟲檢疫鑒定方法的國家標準。根據(jù)病害發(fā)生特點和為害規(guī)律預測菊花滑刃線蟲在我國具有廣泛的適生性，除東北、西北地區(qū)外，均適宜該線蟲生長，具有潛在威脅[4]。目前，對菊花滑刃線蟲防治主要是采用植物檢疫、土壤消毒、抗病品種[5,6]，對其化學防治研究較少。為了篩選出高效、低毒、低殘留的殺線蟲劑，選取市場上常見的7 種農(nóng)藥進行室內(nèi)毒力測定，以期為以后菊花滑刃線蟲化學防治提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

供試藥劑：40%樂果乳油、10%吡蟲啉粉劑、12%毒死蜱乳油、1%苦參堿乳油、20%丁硫克百威乳油、2.5%聯(lián)苯菊酯乳油、5%阿維菌素。

供試菊花滑刃線蟲由貴州大學農(nóng)學院楊再福老師提供。

1.2 方法

1.2.1 線蟲的培養(yǎng)與分離。將得到的菊花滑刃線蟲純化后擴大繁殖，在滅菌后的培養(yǎng)皿中放入胡蘿卜愈傷組織，并在愈傷組織上接種純化后的線蟲，在培養(yǎng)箱23℃條件下培養(yǎng)。分離線蟲采用貝爾曼漏斗法[7]。

1.2.2 線蟲毒性試驗。配制濃度為100mg/L 的藥劑，取3 片干凈的凹玻片加入25μL的無菌水，解剖鏡下用挑取筆在線蟲懸浮液中輕輕挑取10 條線蟲加入凹玻片中，最后滴取25μL 測試農(nóng)藥溶液后蓋上蓋玻片制成臨時玻片。另外取3 片凹玻片加入50μL 無菌水，挑取10 條線蟲后蓋上玻片作對照。解剖鏡下仔細觀察線蟲的活動狀態(tài)、活力情況與死亡條數(shù)，記錄試驗數(shù)據(jù)，每個處理5 個重復。計算菊花滑刃線蟲的死亡率和校正死亡率。死亡率（%）=（死亡線蟲數(shù)/線蟲數(shù)）×100；校正死亡率（%）=[（處理死亡率-對照組死亡率）/（1-對照組死亡率）]×100。

2 結(jié)果與分析

2.1 7 種農(nóng)藥對菊花滑刃線蟲的室內(nèi)毒力測定

如表1，當藥劑濃度為100mg/L 時，48h 內(nèi)樂果、苦參堿、丁硫克百威、聯(lián)苯菊酯對菊花滑刃線蟲無毒性。100mg/L 阿維菌素表現(xiàn)出很高的活性，12h 內(nèi)線蟲死亡率達100%，繼續(xù)設置濃度梯度，進行下一步試驗。

2.2 5%阿維菌素的致死中濃度LC50測定

試驗結(jié)果顯示，5%阿維菌素對菊花滑刃線蟲12h毒殺活性很強，且隨濃度升高，死亡率升高。將濃度取對數(shù)值，線蟲校正死亡率轉(zhuǎn)換成幾率值，利用最小二乘法求出阿維菌素毒力回歸方程為y=3.37+1.37x，其中LC50是15.52mg/L（如表2）。

表1 7 種農(nóng)藥對菊花滑刃線蟲的室內(nèi)毒力測定

表2 5%阿維菌素的致死中濃度測定（12h）

3 討論

我國花卉種植面積大，氣候適宜，菊花滑刃線蟲寄主分布廣泛，可能對我國花卉市場構(gòu)成了巨大的潛在威脅[8]。目前已在云南、貴州、浙江、河北、廣東等個別省份有發(fā)現(xiàn)[9-12]。為了防止該線蟲從國外傳入和國內(nèi)傳播擴散，檢驗檢疫為首要任務，但其他防治方法也需要綜合利用。本研究利用7 種農(nóng)藥對菊花滑刃線蟲進行室內(nèi)毒力測定，結(jié)果表明，當濃度為100mg/L 時，5%阿維菌素乳油對菊花滑刃線蟲的毒殺效果好，線蟲的死亡率為100%，其LC50是15.52mg/L。阿維菌素是一類由灰色鏈霉菌發(fā)酵后產(chǎn)生，具有殺線蟲活性的十六元大環(huán)內(nèi)酯化合物，擾亂線蟲神經(jīng)活動，阻止運動神經(jīng)之間的信息傳遞，是一類高安全性，對自然環(huán)境傷害小農(nóng)藥。阿維菌素對松材線蟲的1h LC50為4.5mg/L[13]，對綿羊消化道線蟲致死率達100%[14]，1.8%阿維菌素對南方根結(jié)線蟲有很強的致死效果，LC50是1.48mg/L[15]。阿維菌素對線蟲具有較好的毒殺活性，可作為防治線蟲的首選藥劑。本試驗中的其余6 種農(nóng)藥對菊花滑刃線蟲的毒殺效果不理想，100mg/L 濃度下，線蟲死亡率低。在藥劑作用的2h 內(nèi)，菊花滑刃線蟲均表現(xiàn)出盤旋靜止、活力降低，隨著時間推移，線蟲恢復活力。這些藥劑是如何影響菊花滑刃線蟲的行動，藥劑進入線蟲體內(nèi)又是如何被代謝的，這些問題有待以后進一步深入研究。