李培源 鄢宏俊 霍麗妮 賈智若

摘要 [目的]探討龍眼葉乙酸乙酯部位對(duì)ABTS自由基的清除活性。[方法]采用乙酸乙酯為提取溶劑，通過(guò)冷浸法得到龍眼葉乙酸乙酯部位，測(cè)定其ABTS自由基清除能力，并研究龍眼葉乙酸乙酯部位對(duì)ABTS自由基的清除能力與濃度之間的關(guān)系。[結(jié)果]在較低藥液濃度下龍眼葉乙酸乙酯部位顯示出一定的ABTS自由基清除率，隨濃度增加，ABTS自由基清除率迅速增加。研究龍眼葉乙酸乙酯部位對(duì)ABTS自由基的清除能力與時(shí)間之間的關(guān)系，結(jié)果表明隨反應(yīng)時(shí)間增加，ABTS自由基清除率迅速增加。[結(jié)論]龍眼葉乙酸乙酯部位具有較好的ABTS自由基清除活性。

關(guān)鍵詞 龍眼葉;乙酸乙酯部位;ABTS;清除活性

中圖分類號(hào) R285.5文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A

文章編號(hào) 0517-6611（2019）17-0159-02

Abstract [Objective] The research aimed to study ABTS free radical scavenging activity of ethyl acetate extract of leaf of Dimocarpus longan. [Method]The ABTS radical scavenging ability of ethyl acetate extract of leaf of Dimocarpus longan was studied. The relationship between ABTS free radical scavenging ability and concentraion was investigated. [Result]At a low concentration， ethyl acetate extract of leaf of Dimocarpus longan exhibits some ABTS free radical scavenging ability. With increasing concentration， ABTS free radical scavenging ability of ethyl acetate extract of leaf of Dimocarpus longan quickly increased. The relationship between the ability of ethyl acetate in longan leaves to scavenge ABTS free radicals and time was studied. The results showed that the ABTS free radical scavenging rate increased rapidly with the increase of reaction time.[Conclusion] Ethyl acetate extract of leaf of Dimocarpus longan has good ABTS free radical scavenging activity.

Key words Leaf of Dimocarpus longan;Ethyl acetate extract;ABTS;Scavenging activity

科學(xué)研究證明，中風(fēng)、關(guān)節(jié)炎等多種慢性疾病與體內(nèi)自由基超量相關(guān)，當(dāng)體內(nèi)的抗氧化物質(zhì)不足以抗衡自由基時(shí)身體產(chǎn)生疾病，需要額外補(bǔ)充抗氧化劑[1-3]。目前應(yīng)用較為廣泛的抗氧化劑如2，6-二叔丁基-4-甲基苯酚等具有較多副作用，因此，從植物中開(kāi)發(fā)新的天然抗氧化劑成為新的研究熱點(diǎn)[4-8]。該試驗(yàn)采用乙酸乙酯為提取溶劑，通過(guò)冷浸法得到龍眼葉乙酸乙酯部位，并采用ABTS體系來(lái)評(píng)估其自由基清除能力，尋找新的天然抗氧化劑。

1 材料與方法

1.1 試材 紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)，UV1901型，北京普析電子科技有限公司[8-10]。蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品，百靈威試劑公司（北京）。

1.2 方法

1.2.1 龍眼葉乙酸乙酯部位制備。

將龍眼葉曬干磨粉后，將20 g龍眼葉粉末放入圓底燒瓶中，加入200 mL乙酸乙酯（95%），采用冷浸法得到龍眼葉乙酸乙酯部位。

1.2.2 ABTS· +自由基清除能力測(cè)定[6-10]。

在錐形瓶中加入50 mL濃度為2 mmol/L的2，2-聯(lián)氨-雙（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二胺鹽（ABTS）水溶液和200 mL濃度為70 mmol/L的K2S2O8水溶液，混合均勻，蓋上塞子避光放置12～16 h，再加入磷酸鹽緩沖液至溶液在波長(zhǎng)734 nm處吸光度為0.70±0.02得到ABTS· +溶液。取一定量不同濃度提取物藥液，加入一定量的ABTS· +溶液混勻，在不同時(shí)間測(cè)其吸光度，并以吸光度變化計(jì)算其對(duì)ABTS· +自由基的清除率。

2 結(jié)果與分析

2.1 龍眼葉乙酸乙酯部位對(duì)ABTS自由基的清除能力與濃度的關(guān)系

從圖1可看出，藥液濃度為0.2 mg/mL時(shí)，龍眼葉乙酸乙酯部位顯示出6.29%的ABTS自由基清除率;當(dāng)藥液濃度從0.2 mg/mL增至0.8 mg/mL，提取物對(duì)ABTS自由基的清除率增大至1.4倍;藥液濃度為1.2和1.5 mg/mL時(shí)，龍眼葉乙酸乙酯部位對(duì)ABTS自由基的清除率分別為0.2 mg/mL藥液濃度時(shí)的2.2和2.4倍;在最大濃度2.0 mg/mL時(shí)，

2.2 龍眼葉乙酸乙酯部位對(duì)ABTS自由基的清除能力與時(shí)間的關(guān)系 從圖2可看出，對(duì)于藥液濃度為1.5 mg/mL的提取物，反應(yīng)時(shí)間為1 min時(shí)對(duì)ABTS自由基的清除率為6.78%;隨著反應(yīng)時(shí)間增加，龍眼葉乙酸乙酯部位展現(xiàn)出增強(qiáng)的ABTS自由基清除能力;反應(yīng)時(shí)間為3 min時(shí)，ABTS自由基清除率為1 min時(shí)的1.6倍;反應(yīng)時(shí)間為5 min時(shí)，ABTS自由基清除率為1 min時(shí)的1.9倍;反應(yīng)時(shí)間延長(zhǎng)至10 min時(shí)，ABTS自由基清除率為1 min時(shí)的2.0倍。對(duì)于藥液濃度為2.0 mg/mL的提取物，反應(yīng)時(shí)間為1 min時(shí)對(duì)ABTS自由基的清除率為 13.35%，是藥液濃度為1.5 mg/mL提取物的2倍;反應(yīng)時(shí)間增加至10 min時(shí)，ABTS自由基的清除率增加至反應(yīng)時(shí)間為1 min時(shí)數(shù)值的1.4倍。

3 結(jié)論

該試驗(yàn)采用乙酸乙酯為提取溶劑，通過(guò)冷浸法得到龍眼葉乙酸乙酯部位，并測(cè)定其對(duì)ABTS自由基的清除能力，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，藥液濃度為0.2 mg/mL時(shí)龍眼葉乙酸乙酯部位顯示出一定的ABTS自由基清除率;隨濃度增加，ABTS自由基清除率迅速增加，在最大濃度2.0 mg/mL時(shí)，提取物對(duì)ABTS自由基表現(xiàn)出增加的清除率，為0.2 mg/mL藥液濃度時(shí)的3.0倍。此外，研究了龍眼葉乙酸乙酯部位對(duì)ABTS自由基的清除能力與時(shí)間之間的關(guān)系，結(jié)果表明隨反應(yīng)時(shí)間增加，ABTS自由基清除率迅速增加。

參考文獻(xiàn)

[1] BRANEN A L.Toxicology and biochemistry of butylated hydroxylanisole and butylated hydroxytoluene[J]. J Am Oil Chem Soc， 1975， 52：59-63.

[2] CAI Y L，RUAN J L.Studies on the chemical constituents from the leaf of L. formosana Hance[J]. J Chin Med Mater， 2005， 28（4）：294-295.

[3] DEWANTO V，WU W Z，ADOM K K，et al. Thermal processing enhances the nutritional value of tomatoes by increasing total antioxidant activity[J]. J Agric Food Chem，2002， 50：3010-3014.

[4] LI P Y，HUO L N，SU R M，et al.Free radicalscavenging capacity， antioxidant activity and phenolic content of Pouzolzia zeylanica[J]. J Serb Chem Soc，2011，76（5）：709-717.

[5] MAZOR D，GREENBERG L，SHAMIR D，et al.Antioxidant properties of bucillamine： Possible mode of action [J]. Biochem Bioph Res Co，2006， 349（3）： 1171-1175.

[6] 朱慶磊， 呂欣然， 何愛(ài)霞. 葛根素對(duì)氧自由基的清除和抗氧化性損傷作用 [J]. 解放軍藥學(xué)學(xué)報(bào)， 2001，17（1）：1-3，13.

[7] 黃詒森， 張均田. 丹參中三種水溶性成分的體外抗氧化作用[J]. 藥學(xué)學(xué)報(bào)， 1992，27（2）：96-100.

[8] 莫開(kāi)菊， 柳圣， 程超. 生姜黃酮的抗氧化活性研究[J].食品科學(xué)， 2006，27（9）：110-115.

[9] 王林業(yè)，殷博迪，王玉寧，等.不同方法提取地榆總?cè)坪康谋容^及其抗氧化活性研究[J].食品研究與開(kāi)發(fā)，2019，40（6）：111-1115.

[10] 楊秀東，張嬪妹，張揚(yáng)，等.托盤(pán)根不同溶劑萃取物的活性成分及其體外抗氧化活性[J].食品工業(yè)科技，2018，39（21）：77-80，85.