劉國(guó)正 姜在鵬 喬明亮
【摘要】目的:探究LncRNA HOTAIR、HOTTIP及其下游HOXD10、HOXA13基因在腸癌中的表達(dá)關(guān)系。方法:運(yùn)用TRIz0l提取總RNA,實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)基因相對(duì)表達(dá)量。結(jié)果: HOXA13基因的相對(duì)表達(dá)量是(8.63±1.20),低于癌旁正常組織(9.42±1.53),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),HOTTIP、HOXD10基因的表達(dá)不存在顯著變化。結(jié)論:在對(duì)腸癌組織進(jìn)行研究的過程中,表明HOTTIP、HOXA13的調(diào)控關(guān)系將會(huì)較為正常,HOTAIR在癌組織中的表達(dá)將會(huì)持續(xù)降低,還可能失去對(duì)下游HOXD10基因的正常調(diào)控。
【關(guān)鍵詞】HOTAIR;HOTTIP;HOXD10;HOXA13;腸癌
[Abstract]Objective:To investigate the expression of LncRNA HOTAIR, HOTTIP and downstream HOXD10, HOXA13 genes in intestinal cancer. Methods:Total RNA was extracted by TRIz0l and the relative gene expression was detected by real-time fluorescence quantitative PCR. Results:The relative expression of HOXA13 gene was (8.63 +1.20), lower than that of normal tissue (9.42 +1.53), with statistical significance (P<0.05). There was no significant change in the expression of HOTTIP and HOXD10 genes. Conclusion:In the process of studying intestinal cancer tissues, it is indicated that the regulation relationship between HOTTIP and HOXA13 will be more normal, the expression of HOTAIR in cancer tissues will continue to decrease, and the normal regulation of downstream HOXD10 gene may also be lost.
[Key words] HOTAIR; HOTTIP; HOXD10; HOXA13; Intestinal cancer
【中圖分類號(hào)】R734
【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A
【文章編號(hào)】2095-6851(2019)09-044-02
引言
隨著社會(huì)的飛速發(fā)展與科學(xué)技術(shù)的日益進(jìn)步,腸癌發(fā)病人數(shù)呈現(xiàn)逐年上升的趨勢(shì),其對(duì)生命健康已經(jīng)造成嚴(yán)重的威脅,成為危害人們生命健康的重要?dú)⑹帧,F(xiàn)報(bào)告如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料 選取2018年9月-2019年4月54例腸癌患者并收集癌組織與癌旁正常組織,男34例,女20例,年齡(22-49)歲,平均年齡(30.1±1.8)歲,患者年齡、性別的差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),本次研究所有患者均獲得家屬同意,簽署知情同意書,自愿進(jìn)行本次研究,并在倫理委員會(huì)的監(jiān)督下完成。
1.2 方法 收集癌組織與癌旁正常組織,運(yùn)用TRIz0l提取總RNA,實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)基因相對(duì)表達(dá)量,在將其取下10分鐘以內(nèi),放進(jìn)預(yù)先具有RNAlater的溶液的試管中,首先將試管放進(jìn)-4℃中浸泡8小時(shí),隨后將其放置在-80℃的冰箱中進(jìn)行長(zhǎng)期保存。在手術(shù)完成后,實(shí)驗(yàn)人員了解各種病理切片,并準(zhǔn)確的記錄確認(rèn)組織病理類型。
1.3 判斷標(biāo)準(zhǔn) 比較LncRNA HOTAIR、HOTTIP及其下游HOXD10、HOXA13基因在腸癌中、正常組織間的關(guān)聯(lián)。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 根據(jù)所獲得的數(shù)據(jù),運(yùn)用spss22.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)與分析,并運(yùn)用t進(jìn)行檢驗(yàn),當(dāng)p<0.05,則認(rèn)為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2 結(jié)果
通過實(shí)驗(yàn)可知,HOTAIR在癌組織中的相對(duì)表達(dá)量是(4.11±4.53),顯著低于癌旁正常組織(7.42±4.18),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),HOXA13基因的相對(duì)表達(dá)量是(8.63±1.20),低于癌旁正常組織(9.42±1.53),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),HOTTIP、HOXD10基因的表達(dá)不存在顯著變化。
3 討論
長(zhǎng)鏈非編碼為一類轉(zhuǎn)錄本長(zhǎng)度超過200nt的功能性非編碼RNA分子,它不具有編碼蛋白的功能,長(zhǎng)鏈非編碼被看作轉(zhuǎn)錄過程中的副產(chǎn)物,不存在生物學(xué)能力。隨著社會(huì)的飛速發(fā)展與科學(xué)技術(shù)的不斷進(jìn)步,人們對(duì)微小RNA的認(rèn)識(shí)度逐漸加深,表明非編碼RNA具備細(xì)胞生長(zhǎng)等多項(xiàng)功能[1]?,F(xiàn)今HOTAIR在腸癌的表達(dá)將會(huì)變得十分異常,HOTTIP在腸腫瘤中的表達(dá)未看見詳細(xì)的報(bào)道,因此,借助熒光定量的方法,它能檢測(cè)腸癌旁組織的 HOTAIR、HOTTIP及其下游HOXD10、HOXA13基因信使RNA的表達(dá),知曉它在腸癌中明確的表達(dá)形式、具體的組織類型、TNM分期的關(guān)系[2]。
對(duì)于上下游基因而言,其在正常與癌組織間有相互調(diào)控的關(guān)系,此種現(xiàn)象應(yīng)獲得人們的高度重視,促使人們深入的知曉 LncRNA HOTAIR、HOTTIP及其下游HOXD10、HOXA13基因在腸癌中的表達(dá)。HOTAIR在腸癌組織中的表達(dá)將會(huì)持續(xù)降低,平均的表達(dá)量是正常組織的10%左右,HOXA13在腸癌組織中的表達(dá)也會(huì)逐漸下降,平均表達(dá)量是正常組織的57%左右。HOTTIP及其下游HOXD10的基因表達(dá)并未出現(xiàn)顯著的變化,HOTAIR、HOTTIP及其下游HOXD10、HOXA13基因在兩種不同的組織類型的腸癌組織中的表達(dá)未出現(xiàn)顯著的變化,不具有組織特異性,HOTAIR、HOXD10在正常組織中的表達(dá)呈正相關(guān),在腸癌組織中的表達(dá)不會(huì)呈現(xiàn)相關(guān)性,HOTTIP、HOXA13在腸癌組織與癌旁的正常組織中也呈現(xiàn)正相關(guān)的關(guān)系。
綜上所述,在功能性非編碼RNA分子中,HOTAIR是人們研究較多的一個(gè)分子,運(yùn)用重編程染色體狀態(tài)控制以HOXD10為代表的多個(gè)基因表達(dá)來實(shí)現(xiàn)其功能。
參考文獻(xiàn):
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