湯龍梅 ，尹月，章文強(qiáng)，陳超，盧忠華，王梅，包俊梅*

（1.四川省簡(jiǎn)陽(yáng)市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，四川 簡(jiǎn)陽(yáng) 641400；2.四川大學(xué)華西公共衛(wèi)生學(xué)院流行病與衛(wèi)生統(tǒng)計(jì)學(xué)系，四川 成都 610041；3.四川省簡(jiǎn)陽(yáng)市疾病預(yù)防控制中心，四川 簡(jiǎn)陽(yáng) 641400）

1 調(diào)查目的

布魯氏菌?。ú疾。┦怯刹剪斒暇秩霗C(jī)體，引起人畜共患的傳染性變態(tài)反應(yīng)性疾病。人和家畜主要通過(guò)消化道、呼吸道和皮膚黏膜等途徑接觸感染[1-2]。家畜患病后常出現(xiàn)發(fā)熱、睪丸炎、乳腺炎、流產(chǎn)、不孕不育等癥狀，其中自發(fā)性流產(chǎn)是妊娠母畜感染布病的顯著特征[3]。布病不僅會(huì)給畜牧業(yè)帶來(lái)重大的經(jīng)濟(jì)損失，還會(huì)給人類健康造成危害，是威脅公共安全的潛在危險(xiǎn)因素[4]。

2014年簡(jiǎn)陽(yáng)市報(bào)告了首例人間布病，以后每年均有一定數(shù)量的本地病例報(bào)告。本研究于2018年4月至6月在簡(jiǎn)陽(yáng)市內(nèi)開(kāi)展了羊布魯氏菌病的橫斷面調(diào)查，通過(guò)收集既往牛羊布病的監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)，掌握家畜布病的流行現(xiàn)狀，分析布病的防控效果及其存在的問(wèn)題，并提出有針對(duì)性的建議。

2 資料來(lái)源

規(guī)模羊場(chǎng)的養(yǎng)殖情況來(lái)源于簡(jiǎn)陽(yáng)市2018年1月規(guī)模場(chǎng)重大動(dòng)物疫病普查；羊布魯氏菌病血清學(xué)資料來(lái)源于2016～2017年省級(jí)牛羊疫病定點(diǎn)監(jiān)測(cè)和2018年羊布魯氏菌病橫斷面調(diào)查；牛布魯氏菌病血清學(xué)資料來(lái)源于2016～2018年省級(jí)牛羊疫病定點(diǎn)監(jiān)測(cè)。

3 羊布魯氏菌病橫斷面調(diào)查

3.1 調(diào)查對(duì)象簡(jiǎn)陽(yáng)市轄區(qū)內(nèi)2月齡以上且未免疫布病疫苗的羊。

3.2 方法

3.2.1 抽樣方法根據(jù)《國(guó)家布魯氏菌病防治計(jì)劃（2016-2020年）》要求，抽樣應(yīng)遵循先確定隨機(jī)采樣檢測(cè)的場(chǎng)群數(shù)，再確定個(gè)體樣本數(shù)的原則[5]。

（1）場(chǎng)群樣本量計(jì)算：根據(jù)簡(jiǎn)單隨機(jī)抽樣方法的樣本量計(jì)算公式（檢驗(yàn)水準(zhǔn)α＝0.05，相應(yīng)的Zα/2＝1.96，場(chǎng)群預(yù)期感染率p取30%，容許誤差d取10%），計(jì)算得出場(chǎng)群樣本量為81。

（2）個(gè)體樣本量計(jì)算：同理，參照上述公式，個(gè)體預(yù)期感染率p取1%，容許誤差d取0.5%，計(jì)算得出樣本量為1 522。

（3）抽樣過(guò)程：采用多階段整群隨機(jī)抽樣方法，首先根據(jù)地理位置和養(yǎng)殖場(chǎng)分布，隨機(jī)選取本地區(qū)賈家鎮(zhèn)、石橋鎮(zhèn)、石盤(pán)鎮(zhèn)、養(yǎng)馬鎮(zhèn)、踏水鎮(zhèn)、青龍鎮(zhèn)、禾豐鎮(zhèn)、三合鎮(zhèn)、施家鎮(zhèn)、江源鎮(zhèn)、武廟鄉(xiāng)、飛龍鄉(xiāng)、老君井鄉(xiāng)、靈仙鄉(xiāng)、新星鄉(xiāng)、云龍鎮(zhèn)、五星鄉(xiāng)、東溪鎮(zhèn)、金馬鎮(zhèn)19個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)，采用簡(jiǎn)單隨機(jī)抽樣方法在這些鄉(xiāng)鎮(zhèn)的所有養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)抽取一定數(shù)量的羊，然后按照養(yǎng)殖規(guī)模確定采血數(shù)量。一類養(yǎng)殖場(chǎng)：羊養(yǎng)殖數(shù)量≥300頭，采集羊血樣50份；二類養(yǎng)殖場(chǎng)：100頭≤羊養(yǎng)殖數(shù)量＜300頭，采集羊血樣35份；三類養(yǎng)殖場(chǎng)：50頭≤羊養(yǎng)殖數(shù)量＜100頭，采集羊血樣25份；四類養(yǎng)殖場(chǎng)：羊養(yǎng)殖數(shù)量＜50頭，采集羊血樣15份；若養(yǎng)殖數(shù)量不足15頭，則對(duì)所有羊進(jìn)行采血。

3.2.2 調(diào)查方法經(jīng)過(guò)統(tǒng)一培訓(xùn)的畜牧站工作人員面對(duì)面訪談抽中的養(yǎng)殖場(chǎng)負(fù)責(zé)人，填寫(xiě)“羊感染布魯氏菌檢測(cè)登記表”，包括養(yǎng)殖場(chǎng)的基本情況、家畜來(lái)源及種類等信息，并對(duì)抽中的羊采集血樣，利用虎紅平板凝集試驗(yàn)（RBT）初篩，初篩陽(yáng)性血清進(jìn)一步做試管凝集試驗(yàn)（SAT）復(fù)核。檢測(cè)方法和診斷標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)《動(dòng)物布魯氏菌病診斷技術(shù)（GB/T 18646-2002）》[6]。

3.3 指標(biāo)定義場(chǎng)群：指同一牧場(chǎng)的或由人工柵欄、天然屏障隔離的一群動(dòng)物，或?qū)儆谕凰姓吆凸芾碚叩囊蝗夯蚨嗳阂赘袆?dòng)物的集合。初篩陽(yáng)性：虎紅平板凝集試驗(yàn)陽(yáng)性。確診陽(yáng)性：虎紅平板凝集試驗(yàn)初篩陽(yáng)性，試管凝集試驗(yàn)復(fù)核仍為陽(yáng)性。陽(yáng)性場(chǎng)群：至少有1頭羊?yàn)榇_診陽(yáng)性的場(chǎng)群。場(chǎng)群陽(yáng)性率：指陽(yáng)性場(chǎng)群占所調(diào)查場(chǎng)群的比例。個(gè)體陽(yáng)性率：指確診陽(yáng)性個(gè)體占所調(diào)查羊的比例?？刂疲褐高B續(xù)2年以上，牛布病個(gè)體陽(yáng)性率在1%以下，羊布病個(gè)體陽(yáng)性率在0.5%以下，所有染疫牛羊均已撲殺，且本地人間布病新發(fā)病例數(shù)不超過(guò)上一年；以縣為單位，達(dá)到布病控制標(biāo)準(zhǔn)的區(qū)域?yàn)榭刂茀^(qū)，未達(dá)到布病控制標(biāo)準(zhǔn)的區(qū)域?yàn)槲纯刂茀^(qū)[5]。

3.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析應(yīng)用Excel 2016進(jìn)行數(shù)據(jù)匯總和數(shù)據(jù)清理，用SPSS 23.0軟件對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)描述和統(tǒng)計(jì)推斷。定性資料用“率或構(gòu)成比”表示，并計(jì)算“率的95%置信區(qū)間（CI）”；多個(gè)樣本率的比較采用χ2檢驗(yàn)，多個(gè)樣本率間的多重比較采用χ2分割法比較，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α′＝0.012 5；若多個(gè)樣本率的比較不滿足χ2檢驗(yàn)條件，則使用Fisher確切概率法比較。采用雙側(cè)檢驗(yàn)，以P＜0.05表示統(tǒng)計(jì)學(xué)意義上的顯著差異。

4 調(diào)查結(jié)果

4.1 羊布病橫斷面調(diào)查結(jié)果本次研究實(shí)際調(diào)查了簡(jiǎn)陽(yáng)市20個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)的65個(gè)羊養(yǎng)殖場(chǎng)，共采集血樣1 522份，有效血樣1 522份，個(gè)體有效完成率達(dá)100%。實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，虎紅平板凝集試驗(yàn)初篩出陽(yáng)性血樣2份，其中經(jīng)試管凝集試驗(yàn)確診陽(yáng)性血樣1份，發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性場(chǎng)群1個(gè)，場(chǎng)群陽(yáng)性率為1.54%（95%CI：0.00%～4.53%），個(gè)體陽(yáng)性率為0.66‰（95%CI：0.00‰～1.94‰）。

4.2 既往牛羊布病監(jiān)測(cè)結(jié)果2016～2018年分別檢測(cè)奶牛血樣650份、367份和153份，分別檢出陽(yáng)性血樣8份、6份和0份，奶牛布病檢出率分別為12.31‰、16.35‰和0‰，不同年份奶牛的布病檢出率差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＝0.324）。詳見(jiàn)表1。

表1 2016～2018年奶牛血樣布病檢測(cè)結(jié)果

2016～2017年分別檢測(cè)羊血樣5 458份、5 490份和1 522份，分別檢出陽(yáng)性血樣150份、0份和1份，個(gè)體陽(yáng)性率分別為27.48‰、0‰和0.66‰（詳見(jiàn)表2）。不同年份羊群的布病檢出率不全相同（χ2＝191.815，P＜0.001），其中2016年與2017年、2018年的布病檢出率均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（χ2＝152.975，P＜0.001；χ2＝40.464，P＜0.001）。

表2 2016～2018年羊血樣布病檢測(cè)結(jié)果

5 調(diào)查結(jié)論與分析

本次調(diào)查結(jié)果顯示，簡(jiǎn)陽(yáng)市牛羊布病個(gè)體流行率較低，但仍屬于布病未控制區(qū)域。與2016年比較，2017年和2018年羊的布病檢出率均明顯下降，這可能與2016年開(kāi)展的布病監(jiān)測(cè)凈化行動(dòng)有關(guān)，畜牧部門(mén)加強(qiáng)了對(duì)羊布病的大規(guī)模檢測(cè)，強(qiáng)制撲殺了陽(yáng)性病畜并進(jìn)行無(wú)害化處理，表明簡(jiǎn)陽(yáng)市采取的“監(jiān)測(cè)+撲殺”防控策略有效，這與國(guó)內(nèi)其他地區(qū)的調(diào)查結(jié)果一致[7-8]。由于產(chǎn)業(yè)轉(zhuǎn)型升級(jí)，2018年簡(jiǎn)陽(yáng)市已經(jīng)沒(méi)有規(guī)模化的奶牛養(yǎng)殖場(chǎng)，全市范圍內(nèi)僅剩零星散養(yǎng)戶，因此，應(yīng)進(jìn)一步摸排奶牛的養(yǎng)殖分布及其規(guī)模，以便開(kāi)展后續(xù)工作。

國(guó)外研究表明，畜間布病的控制和消除是預(yù)防和控制人間布病的先決條件[9]。雖然當(dāng)前簡(jiǎn)陽(yáng)市牛羊布病的個(gè)體流行率較低，但是畜間布病防控仍存在諸多難點(diǎn)。比如，布病防控經(jīng)費(fèi)和人員設(shè)備不足，限制了工作的有效開(kāi)展；小規(guī)模羊場(chǎng)的養(yǎng)殖周期短、流動(dòng)快，從采血到檢測(cè)結(jié)果需要花費(fèi)一段時(shí)間，去撲殺陽(yáng)性病畜時(shí)會(huì)遇到病畜已被售出無(wú)法追蹤的情況；外地輸入羊及其制品的檢驗(yàn)檢疫監(jiān)督制度不完善，部分活羊被羊肉湯館收購(gòu)后即被就地屠宰；屠宰點(diǎn)設(shè)置尚不規(guī)范，路途運(yùn)輸費(fèi)用得不到補(bǔ)償，無(wú)法實(shí)現(xiàn)“集中屠宰”；經(jīng)濟(jì)補(bǔ)償額度和市場(chǎng)價(jià)格之間的差異影響了養(yǎng)殖戶參與檢測(cè)和撲殺的積極性；養(yǎng)殖戶的布病防控知識(shí)缺乏，也未意識(shí)到布病對(duì)人畜健康的危害。