亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        泡菜發(fā)酵中不同蒜濃度、pH和鹽度組合對(duì)大腸桿菌生長(zhǎng)影響的模擬研究

        2019-09-16 03:15:14閆鳴霄吳正云司育雷全江龍張文學(xué)
        中國(guó)調(diào)味品 2019年9期
        關(guān)鍵詞:泡菜鹽度生長(zhǎng)量

        閆鳴霄,吳正云,司育雷,全江龍,張文學(xué)

        (四川大學(xué) 輕紡與食品學(xué)院 食品工程系,成都 610065)

        泡菜是以新鮮蔬菜為原料,添加適量鹽,經(jīng)自然發(fā)酵或添加外源發(fā)酵劑發(fā)酵的蔬菜制品。泡菜制作中,原料和操作環(huán)境可能帶來(lái)包括食源性致病菌在內(nèi)的各種微生物污染[1,2]。大蒜是泡菜制作中的常用輔料,除增加風(fēng)味、改善口感等作用外,還能抑制大腸桿菌等常見食源性致病菌的生長(zhǎng)[3]。泡菜發(fā)酵是一個(gè)動(dòng)態(tài)過(guò)程,pH等指標(biāo)隨發(fā)酵的進(jìn)行而改變,此外,發(fā)酵鹽度和溫度在不同的操作中也有較大差異,這些因素都可能對(duì)控制泡菜中大腸桿菌的生長(zhǎng)產(chǎn)生影響。目前對(duì)泡菜中大腸桿菌的研究多集中在篩選抑制大腸桿菌的菌株等方面[4,5],對(duì)影響其生長(zhǎng)的環(huán)境因素探討不多。本研究參考泡菜發(fā)酵過(guò)程,通過(guò)模擬試驗(yàn)探究大蒜、鹽度、pH、溫度等因素對(duì)大腸桿菌生長(zhǎng)的影響規(guī)律。

        1 材料與方法

        1.1 菌株

        大腸桿菌Escherichiacoli(CICC 10305)。

        參考郭永剛等的方法[6],采用LB培養(yǎng)基進(jìn)行菌株活化與菌懸液制備。

        1.2 大蒜提取液制備

        新鮮大蒜:購(gòu)于成都市郭家橋綜合農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)。將10 g大蒜搗碎后于50 mL 80%乙醇溶液中萃取24 h,超聲30 min后抽濾,在8000 r/min下離心10 min,取上清液于轉(zhuǎn)速10 r/min、溫度50 ℃下旋蒸濃縮,得到蒜提取液10 mL(濃度1 g/mL)[7]。

        1.3 不同大蒜濃度、鹽度、pH和溫度組合條件下的大腸桿菌抑制試驗(yàn)

        選用蒜濃度(0%、1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%)、pH(4,4.5,5,5.5,6,6.5)、鹽度(1%、2%、3%、4%、5%、6%)和溫度(20,28,37 ℃)4個(gè)因素進(jìn)行均勻試驗(yàn)設(shè)計(jì)(見表1),以LB培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,按照均勻設(shè)計(jì)表調(diào)整各組培養(yǎng)基以探究大蒜濃度、鹽度、pH、溫度對(duì)大腸桿菌生長(zhǎng)的影響。鹽度通過(guò)外加氯化鈉、pH用乳酸和氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)。培養(yǎng)基經(jīng)121 ℃、20 min滅菌,冷卻后加入蒜提取液。各試驗(yàn)組于對(duì)應(yīng)溫度培養(yǎng)72 h,每隔6 h測(cè)定OD600值[8],以LB培養(yǎng)基為對(duì)照,每個(gè)試驗(yàn)組做3次平行,取平均值作為測(cè)定結(jié)果。

        表1 均勻試驗(yàn)設(shè)計(jì)U12(12×62×3)Table 1 Uniform experimental design U12(12×62×3)

        1.4 低鹽條件下不同pH和大蒜濃度組合的大腸桿菌抑制試驗(yàn)

        確定各試驗(yàn)組均為鹽度2%、溫度28 ℃,對(duì)pH(4.5,5,5.5,6,6.5)和大蒜濃度(0%、1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%)進(jìn)行組合(共50種組合)。以模擬常見發(fā)酵溫度下低鹽泡菜的發(fā)酵環(huán)境,探究低鹽下大蒜濃度和pH對(duì)大腸桿菌生長(zhǎng)的影響規(guī)律,具體操作同1.3。

        1.5 數(shù)據(jù)處理

        采用Logistic模型擬合大腸桿菌生長(zhǎng)[9],并考慮生長(zhǎng)延遲期:

        當(dāng)t

        (1)

        式中:X為大腸桿菌的OD600值;X0為t=0時(shí)對(duì)應(yīng)的OD600值;Xmax為最大生物量對(duì)應(yīng)的OD600值;t為生長(zhǎng)時(shí)間,h;td為延遲期,h;μmax為最大比生長(zhǎng)速率,h-1。

        采用逐步回歸分析蒜濃度、鹽度、pH、溫度對(duì)大腸桿菌生長(zhǎng)的影響規(guī)律。

        采用Matlab V7.1軟件進(jìn)行試驗(yàn)數(shù)據(jù)擬合;采用SAS V6.12軟件進(jìn)行逐步回歸分析。

        2 結(jié)果與討論

        2.1 不同大蒜濃度、鹽度、pH和溫度組合對(duì)大腸桿菌的影響

        在不同蒜濃度、鹽度、pH和溫度組合條件下,大腸桿菌的生長(zhǎng)趨勢(shì)明顯不同,見圖1。

        圖1 不同蒜濃度、鹽度、pH和溫度組合對(duì)大腸桿菌生長(zhǎng)的影響Fig.1 The effect of different combinations of garlic concentration, salinity, pH and temperature on the growth of E. coli

        由圖1可知,在72 h后,7號(hào)延遲期長(zhǎng)于對(duì)照組,但在第2天時(shí)表現(xiàn)出明顯的對(duì)數(shù)增長(zhǎng)趨勢(shì)。此外,9號(hào)在54 h出現(xiàn)增長(zhǎng)趨勢(shì),提示大腸桿菌生長(zhǎng)未被完全抑制。其余各組對(duì)大腸桿菌生長(zhǎng)有明顯的抑制作用,生長(zhǎng)量比對(duì)照組減少了94%以上。為探討大蒜濃度、pH、鹽度和溫度等因素對(duì)大腸桿菌的影響規(guī)律,以4個(gè)因素為自變量,大腸桿菌生長(zhǎng)量、生長(zhǎng)延遲期和最大比生長(zhǎng)速率分別為因變量,進(jìn)行逐步回歸分析,得到如下方程:

        Xmax=-0.36-0.13S鹽度+0.19pH,R2=0.516。

        (2)

        td=88.16+0.46G蒜濃度pH-1.47pH2,R2=0.614。

        (3)

        式中:Xmax為最大生物量對(duì)應(yīng)的OD600值;td為延遲期,h;S鹽度為鹽度,%;G蒜濃度為大蒜濃度,%。

        根據(jù)以上方程,大腸桿菌生長(zhǎng)量受鹽度和pH影響較大。在所研究的范圍內(nèi),鹽度越高,pH越低,則大腸桿菌生長(zhǎng)量越低,符合楊振泉等[10]、廖春麗等[11]關(guān)于鹽度、pH影響大腸桿菌生長(zhǎng)結(jié)果的報(bào)道。大腸桿菌生長(zhǎng)延遲期受蒜濃度和pH影響較大。較高的pH下,大蒜濃度對(duì)大腸桿菌的抑制作用更明顯,提示pH可能是影響大蒜抑制大腸桿菌生長(zhǎng)的主要因素,這可能與蒜的有效抑菌成分大蒜素在pH為 6.5時(shí)具有最強(qiáng)抑菌活性有關(guān)[12]。pH的二次方項(xiàng)表明pH與延遲期存在非線性關(guān)系,當(dāng)pH處于某適中區(qū)間時(shí),大腸桿菌延遲期達(dá)到極值,而該pH區(qū)間范圍則與蒜濃度有密切的關(guān)系,在考察范圍內(nèi),pH越低,蒜濃度越高,大腸桿菌延遲期越長(zhǎng)。對(duì)大腸桿菌最大比生長(zhǎng)速率的逐步回歸分析未得到有意義方程(詳細(xì)結(jié)果略)。分析R2值較低的原因在于自變量數(shù)較多,取值范圍較大,逐步分析所得變量之間關(guān)系較為復(fù)雜。

        2.2 低鹽條件下不同pH和大蒜濃度組合對(duì)大腸桿菌的影響

        由回歸方程(2)、(3)可知,在所考察范圍內(nèi),溫度對(duì)大腸桿菌的生長(zhǎng)影響不大;當(dāng)鹽度較低時(shí),大腸桿菌將出現(xiàn)更大幅度的生長(zhǎng)。鑒于泡菜低鹽度發(fā)酵的發(fā)展趨勢(shì)[13],對(duì)2%鹽濃度下不同pH(4.5,5,5.5,6,6.5)和大蒜濃度(0%、1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%)組合對(duì)大腸桿菌生長(zhǎng)的影響進(jìn)行了測(cè)試,并采用方程(1)對(duì)大腸桿菌的生長(zhǎng)曲線進(jìn)行擬合獲得參數(shù)(詳細(xì)結(jié)果略)。以pH、蒜濃度為自變量,大腸桿菌生長(zhǎng)量、生長(zhǎng)延遲期和最大比生長(zhǎng)速率分別為因變量,進(jìn)行逐步回歸分析,得到如下方程:

        Xmax=2.68+0.64pH-0.01G蒜濃度pH,R2=0.679。

        (4)

        td=193.54-30.45pH+1.19G蒜濃度pH-0.40G蒜濃度2,

        R2=0.715。

        (5)

        μmax=0.30+0.07pH,R2=0.689。

        (6)

        式中:μmax為最大比生長(zhǎng)速率,h-1。

        根據(jù)以上方程,2%鹽度下,pH越低,大腸桿菌生長(zhǎng)量越低;生長(zhǎng)量還受蒜濃度和pH的交互作用影響,較高的pH下,大蒜濃度對(duì)大腸桿菌的抑制作用更明顯。由圖2可知,大腸桿菌生長(zhǎng)延遲期受pH和蒜濃度的影響較大,pH降低能延長(zhǎng)大腸桿菌延遲期;蒜濃度的二次方項(xiàng)表示蒜濃度與延遲期存在非線性關(guān)系,在考察范圍內(nèi),蒜濃度越高,pH越低,大腸桿菌延遲期越長(zhǎng);蒜濃度與pH的交互作用說(shuō)明:相較低pH,高pH下蒜濃度對(duì)大腸桿菌生長(zhǎng)量影響更大;相較高濃度蒜,低蒜濃度下pH對(duì)大腸桿菌生長(zhǎng)量影響更大。此外,pH越低,大腸桿菌最大比生長(zhǎng)速率越低。

        圖2 低鹽下蒜濃度和pH對(duì)大腸桿菌的生長(zhǎng)延遲期的影響Fig.2 The effect of garlic concentration and pH on the delay period of E. coli under low-salt condition

        結(jié)合擬合結(jié)果可知,在pH為5~6.5和低濃度蒜組合條件下,大腸桿菌的延遲期明顯短于對(duì)照組,提示低濃度的蒜可能對(duì)大腸桿菌生長(zhǎng)有一定的促進(jìn)作用,并且該作用與pH范圍有關(guān)。以大蒜濃度(0%~3%)和pH為自變量,大腸桿菌生長(zhǎng)延遲期為因變量,進(jìn)行逐步回歸分析,得到如下方程:

        td=745.56-237.64pH-15.84G蒜濃度+19.29pH2+7.20G蒜濃度2,R2=0.8067。

        (7)

        圖3 低鹽下低蒜濃度對(duì)大腸桿菌生長(zhǎng)延遲期的影響(pH 6)Fig.3 The effect of low-garlic concentration on the delay period of E. coli under low-salt condition (pH 6)

        結(jié)果顯示:在考察范圍內(nèi),大腸桿菌生長(zhǎng)延遲期與pH和蒜濃度有關(guān),且二者與大腸桿菌生長(zhǎng)延遲期均為非線性關(guān)系且不存在交互作用。根據(jù)方程計(jì)算,當(dāng)pH為6~6.5、蒜濃度為1%左右時(shí),大腸桿菌生長(zhǎng)延遲期最短,提示低濃度的蒜對(duì)大腸桿菌生長(zhǎng)具有一定的促進(jìn)作用。當(dāng)pH 為6、蒜濃度為0%~2.1%時(shí),大腸桿菌生長(zhǎng)延遲期明顯短于對(duì)照組(見圖3)。類似的情況在甘草、黃芪等[14,15]天然藥材中也有報(bào)道。

        結(jié)合泡菜發(fā)酵的環(huán)境因素考慮,在泡菜發(fā)酵,尤其是低鹽泡菜發(fā)酵中,蒜濃度至少應(yīng)大于2%才能發(fā)揮抑菌作用。由于泡菜發(fā)酵微生物種類和環(huán)境因素復(fù)雜,大腸桿菌的生長(zhǎng)情況受到了多方面因素的綜合影響。本研究所選因素有限,分析結(jié)果的精確性受到一定限制,但仍可為進(jìn)一步研究提供參考。

        3 結(jié)論

        通過(guò)模擬試驗(yàn)考察了泡菜發(fā)酵中大蒜濃度、鹽度、pH和溫度等因素對(duì)大腸桿菌生長(zhǎng)的綜合影響。結(jié)果顯示:pH和蒜濃度是影響大腸桿菌生長(zhǎng)最主要的因素,其次是鹽度;高鹽低pH下大腸桿菌生長(zhǎng)幅度較?。惠^低pH和較高蒜濃度下大腸桿菌生長(zhǎng)延遲期較長(zhǎng)。低鹽濃度(2%)條件下,pH和蒜濃度仍是決定大腸桿菌生長(zhǎng)延遲期的主要因素,相較低pH,高pH下蒜濃度對(duì)大腸桿菌生長(zhǎng)量影響更大;相較高濃度蒜,低蒜濃度下pH對(duì)大腸桿菌生長(zhǎng)量影響更大;最大比生長(zhǎng)速率則主要受pH影響。低鹽(2%)低蒜濃度(0%~4%)下,pH和蒜濃度對(duì)大腸桿菌的延遲期呈現(xiàn)更為復(fù)雜的影響,pH 6~6.5和蒜濃度1%時(shí)大腸桿菌生長(zhǎng)延遲期最短。

        猜你喜歡
        泡菜鹽度生長(zhǎng)量
        韓國(guó)泡菜,不僅僅是辣白菜
        日本落葉松人工林生長(zhǎng)規(guī)律分析
        綠色科技(2021年21期)2021-11-26 09:12:06
        北大河林業(yè)局森林生長(zhǎng)量、枯損量調(diào)查與分析
        雪花泡菜
        宜春區(qū)域南方紅豆杉生境及其生長(zhǎng)量分析
        我只是想吃一碗泡菜
        鹽度和pH對(duì)細(xì)角螺耗氧率和排氨率的影響
        鹽度脅迫對(duì)入侵生物福壽螺的急性毒性效應(yīng)
        適用于高鹽度和致密巖層驅(qū)油的表面活性劑
        膠州灣夏季鹽度長(zhǎng)期輸運(yùn)機(jī)制分析
        成 人 网 站 在线 看 免费| 国产高清在线精品一区二区三区| 国产精品区二区东京在线| 一区二区亚洲精品在线| 久久天堂综合亚洲伊人hd妓女| 蜜桃精品免费久久久久影院| 久久精品国产只有精品96 | 亚洲成a人v欧美综合天堂| 国产一线二线三线女| 免费一级黄色大片久久久| 亚洲av推荐网站在线观看| 久久久久久自慰出白浆| 国产精品黄在线观看免费软件 | 欧美激情a∨在线视频播放| 欧美精品v欧洲高清| 亚洲av资源网站手机在线| 亚洲另类无码专区首页| 嫖妓丰满肥熟妇在线精品| 久久亚洲av成人无码软件| 国产一区资源在线播放| 亚洲 欧美 国产 制服 动漫| 毛茸茸性xxxx毛茸茸毛茸茸| 久久国产亚洲中文字幕| 中文字幕av长濑麻美| 亚洲成在人网站av天堂| 久久精品国产99精品国偷| 伊人久久综合狼伊人久久| 国产亚洲欧洲aⅴ综合一区| 性高朝久久久久久久| 久久久久综合一本久道| 亚洲精品国产一区二区免费视频 | 国内精品视频在线播放不卡| 欧美高清国产在线播放| 亚洲一区二区三区新视频| 亚洲成av人片一区二区密柚| 少妇放荡的呻吟干柴烈火动漫 | 在线视频亚洲一区二区三区| 久久综合久久美利坚合众国| av天堂久久天堂av色综合| 国产桃色精品网站| 女人天堂av人禽交在线观看|