羅達龍

（廣西梧州市食品藥品研究所，廣西梧州 543002）

1 引言

黑茶是我國六大茶類之一[1]，按地域劃分主要有：涇渭茯茶、湖南安化黑茶、四川藏茶、云南黑茶（普洱茶）、廣西六堡茶等。由于黑茶都屬于后發(fā)酵茶，茶湯均具有紅、亮特點。目前，黑茶的研究主要集中在黑茶的香氣成分[2-4]、品質(zhì)化學成分[5]以及黑茶鑒別等方法，采用黑茶水溶性成分進行黑茶的鑒別研究較少，而且，對黑茶鑒別和品種評判多依賴于感官評價，缺少先進科學儀器分析的客觀判斷。

液質(zhì)聯(lián)用技術多用于食品檢測，具有精密度高、穩(wěn)定性好、重復性優(yōu)等特點，但極少用于茶葉的品種鑒別研究上，本實驗采用該方法分析5種黑茶的水溶性成分，為黑茶辨別、溯源進一步研究提供理論依據(jù)。

2 材料與方法

2.1 儀器與試劑

安捷倫1290-6550C液相色譜-四極桿飛行時間質(zhì)譜聯(lián)用儀；超純水器（ELGA PURELAB ClassicUVF）；乙腈（質(zhì)譜級，美國歐姆尼公司），其它試劑均為分析純（國藥集團化學試劑有限公司）。實驗用水為經(jīng)ELGA PURELAB ClassicUVF凈化系統(tǒng)過濾的去離子水。茶葉信息：涇渭茯茶4批次，湖南安化黑茶4批次，四川藏茶4批次，云南普洱茶4批次，廣西六堡茶4批次。

2.2 色譜條件

色譜柱：Agilent poroshell 120 EC-C18（3.0×100mm 2.7 μm）；進樣量：5μl；流速：0.3ml/min；流動相：A：0.1%甲酸-5mmol/L 乙酸銨水溶液，B：乙腈，梯度洗脫見表1。

表1 梯度洗脫程序表

2.3 質(zhì)譜條件

離子源：ESI+，掃描范圍：100～1700amu，采集頻率：3 張/秒；參比離子（amu）：121.0509，322.0481，922.0098，1221.9906，1521.9715。

2.4 供試樣品前處理

取各代表性茶樣3.0g置具塞三角瓶中，加入150ml沸騰去離子水，超聲20分鐘，濾液取1ml，置于100ml容量瓶中，加去離子水稀釋并定容，搖勻，過濾，上LC-QTOF測定。

2.5 空白對照前處理

不添加茶樣，取沸騰去離子水同“2.4”同步處理。

2.6 統(tǒng)計學分析

獲得各代表性茶樣的TIC圖后，利用統(tǒng)計學軟件作主成分分析，以初步獲得各代表茶樣之間的差異性與雷同性。

3 結(jié)果與討論

主成分分析可以有效地將多維變量進行降維處理，篩選出最少的可以代表復雜的待分析數(shù)據(jù)，刪除無用信息，從而將分析簡單化。由于黑茶的水溶性成分較多且復雜，難以用單種或極少幾種的化合物去評價分析，所以本實驗利用液質(zhì)聯(lián)用技術對黑茶的水溶性成分獲取足夠的信息量后，配合統(tǒng)計學軟件對原始數(shù)據(jù)做主成分分析圖，見圖1，由主成分分析散點圖可以看出，原始數(shù)據(jù)經(jīng)過統(tǒng)計學處理后，不同茶種能有效區(qū)分，而相同的茶種又能有效聚集,能為黑茶進一步研究和溯源開發(fā)提供理論依據(jù)。

圖1 5種黑茶主成分分析散點圖