馬林杰

摘要：對(duì)飼料中總磷測(cè)定的關(guān)鍵點(diǎn)，炭化-灰化處理、定容、分光光度操作等過程進(jìn)行了論述，提高檢測(cè)準(zhǔn)確度。

關(guān)鍵詞：炭化-灰化 分光光度 準(zhǔn)確度

Points for Attention in the Determination of Phosphorus in Feed

Ma Linjie

（Hulunbuir Quality Measurement and Inspection Institute）

Abstract： In this paper， the key points of determination of total phosphorus in feed， carbo nization-ashing treatment， constant volume， spectrophotometric operation and other processes are discussed to improve the detection accuracy.

Key words： carbonization-ashing， spectrophotometry， accuracy

磷是動(dòng)物體內(nèi)含量最多的礦物元素之一，和鈣一起構(gòu)成骨組織和牙齒，其余大部分構(gòu)成軟組織成分，小部分存在于體液中，參與許多物質(zhì)代謝過程，是細(xì)胞膜和血液中緩沖物質(zhì)及RNA、DNA、輔酶的成分。

磷缺乏和過多均有危害。磷不足時(shí)會(huì)引起幼齡動(dòng)物患佝僂癥，成年動(dòng)物患軟骨癥，表現(xiàn)為食欲不良，增重減緩，全身虛弱。磷過多時(shí)，易引起甲狀旁腺機(jī)能亢進(jìn)，造成骨組織營(yíng)養(yǎng)不良，產(chǎn)生跛行和長(zhǎng)骨骨折。

30%～70%的磷是以植酸鹽的形式存在。動(dòng)物性飼料中以魚粉的含磷量最高，礦物性飼料中磷的利用效率也很高。補(bǔ)充磷的礦物質(zhì)飼料有骨粉、磷酸氫鈣、磷酸二氫鈣等。

磷測(cè)定過程容易出現(xiàn)檢測(cè)超出重復(fù)性和再現(xiàn)性要求，筆者通過嚴(yán)格控制每一操作細(xì)節(jié)，可以達(dá)到非常高的檢測(cè)精確度、準(zhǔn)確度。

1 實(shí)驗(yàn)儀器、材料

1.1 實(shí)驗(yàn)儀器

AL204電子天平[梅特勒-托力多（上海）有限公司];SX-12-10高溫電阻爐（天津泰斯特儀器有限公司）;DB-3D電熱板（天津泰斯特儀器有限公司）; 101-ZN數(shù)顯敼風(fēng)干燥箱（華北儀器有限公司）;T6新世紀(jì)紫外分光光度計(jì)（北京普析儀器有限公司）。

1.2 試驗(yàn)材料

飼料樣品;硝酸;鹽酸（1+1）;釩鉬酸銨顯色劑;磷標(biāo)準(zhǔn)溶液（50 μg/mL）

本試驗(yàn)中所有試劑均為分析純AR及其以上試劑? 實(shí)驗(yàn)用水的pH值范圍和電導(dǎo)率應(yīng)符合GB/T 6682—2008《分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和實(shí)驗(yàn)方法》中三級(jí)水標(biāo)準(zhǔn)要求，試驗(yàn)所用溶液在未注明何種溶液時(shí)，均指水溶液。

2 試驗(yàn)方法

2.1 檢測(cè)方法

GB/T 6437—2018《飼料中總磷的測(cè)定 分光光度法》中7.1.1干灰化法。

2.2 試驗(yàn)原理

試樣中總磷經(jīng)消解，在酸性條件下與釩鉬酸銨生成黃色的釩鉬黃[（NH4）3PO4NH4VO3·16MoO3]絡(luò)合物，釩鉬黃的吸光度值與總磷的濃度成正比，在波長(zhǎng)400nm下測(cè)定試樣溶液中釩鉬黃的吸光度值與標(biāo)準(zhǔn)系列比較定量。

2.3 注意事項(xiàng)

（1）干灰化法：試樣的稱樣量2.5 g左右，精確至0.0002 g，于電爐上（坩堝蓋與坩堝間留有小縫隙，不要拿下蓋）炭化，直至呈灰黑色，不冒煙。將坩堝及蓋移入電阻爐中，最好是冷爐升溫至550 ℃計(jì)時(shí)，一般灰化3 h，對(duì)于部分含礦物質(zhì)較多，難灰化的樣品要適當(dāng)延長(zhǎng)灰化時(shí)間，燒至呈灰黑色，無炭黑粒既可，一定要燒透燒完全，否則磷元素不能全部分解出來，造成檢測(cè)結(jié)果偏低。

（2）灰化后的樣品，加入濃硝酸和鹽酸于電熱板或電爐上，使用電爐時(shí)，用可調(diào)溫電爐，或在其上放一塊耐火板加熱使其溫度均勻平和，待液體加熱微沸時(shí)，停止加熱，利用余熱慢慢加熱，且不可大火，造成試液揮發(fā)損失過多而影響檢測(cè)結(jié)果，更不可以燒干。

（3）在消煮過程中坩堝蓋要凸面朝向坩堝（向下），這樣揮發(fā)的液體又回落至坩堝，減少揮發(fā)損失。

（4）在試樣測(cè)定過程中，移取液體量一定控制在磷含量50μg～750μg范圍內(nèi)（一般樣液體積為1.0 mL～10.0 mL），可以根據(jù)明示的磷百分含量進(jìn)行折算），過多或過少造成顯色示值偏離分光光度計(jì)量程示值中心位置，引入的誤差過大，影響檢測(cè)結(jié)果，總之，測(cè)定時(shí)樣液的吸光度示值盡量接近儀器量程中心位置。

（5）由于是顯色反應(yīng)，顯色劑、樣液的移取一定要準(zhǔn)確無誤，用精度較高的單標(biāo)線吸管移取。

（6）要嚴(yán)格控制顯色溫度，溫度高，顯色時(shí)間可以短些，假如顯色時(shí)溫度為25 ℃，10 min就可以，若溫度為15 ℃，顯色時(shí)間要長(zhǎng)些，因?yàn)闇囟葲Q定達(dá)到反應(yīng)最大值的速度，反應(yīng)達(dá)到最大值后，時(shí)間長(zhǎng)短對(duì)吸光度影響不大，但也不宜過長(zhǎng)，一般不超過半小時(shí)，否則會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果。

（7）空白試驗(yàn)參與總磷含量計(jì)算，對(duì)誤差的貢獻(xiàn)同樣大，因此空白要作平行試驗(yàn)，取平均值。

（8）樣液的顯色范圍較大，為50μg～750μg，最好顯色示值位于光度量程的中位值附近更準(zhǔn)確，對(duì)一些特定檢測(cè)，可先取一個(gè)中間體積，如5mL（一般樣液體積為1.0 mL～10.0 mL）樣液進(jìn)行顯色，確定濃度大小，再取樣液進(jìn)行測(cè)定。

3 結(jié)語

通過規(guī)范、控制炭化-灰化處理過程、定容、樣液量、分光光度操作過程，以期達(dá)到提高檢測(cè)準(zhǔn)確度，滿足檢測(cè)重復(fù)性和再現(xiàn)性的要求。

參考文獻(xiàn)

[1]? 飼料中總磷的測(cè)定 分光光度法GB/T6437—2002[S].北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社， 2002：3.

[2] 化學(xué)試劑標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的制備GB/T 601—2002[S]. 北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社， 2001：12.

[3] 飼料 采樣GB/T 14699.1—2005[S]. 北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社， 2005：03.

[4] 動(dòng)物飼料 試樣的制備GB/T 20195—2006[S]. 北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社， 2006：2.