嚴(yán)學(xué)芬 劉燕 劉志剛 趙志燊 余磊 婁杰

摘 要：檢測(cè)不同產(chǎn)地福鼎大白茶制綠茶的茶氨酸含量，為不同地區(qū)福鼎大白茶制綠茶的品質(zhì)鑒定提供依據(jù)。采用高效液相色譜法進(jìn)行測(cè)定，色譜柱為RP-18（粒徑5 μm，250 mm×4.0 mm）;流速為1.0 mL·min-1;柱溫為（35±0.5）℃，檢測(cè)波長(zhǎng)為λ=210 nm;進(jìn)樣量為10 uL;流動(dòng)相為A相用100%超純水，采用0.45 μm水相濾膜過濾，B相用100%乙腈，采用0.45 μm有機(jī)相濾膜過濾備用。結(jié)果表明：7個(gè)產(chǎn)地福鼎大白茶制綠茶中茶氨酸濃度在0.10～0.20 mg·mL-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，回收率為88.80%～97.35%，RSD為0.57%，說明該方法精密度良好、準(zhǔn)確度高，可用于檢測(cè)綠茶茶氨酸含量;7個(gè)產(chǎn)地福鼎大白茶制綠茶中茶氨酸含量為7.00～26.60 mg·g-1，除廣州海豐和江蘇常州2個(gè)產(chǎn)地綠茶茶氨酸含量差異不顯著外，其他產(chǎn)地綠茶茶氨酸含量均存在極顯著差異，說明茶氨酸含量與茶葉種植地區(qū)有一定關(guān)系。

關(guān)鍵詞：不同產(chǎn)地;福鼎大白;綠茶;茶氨酸;高效液相色譜法

中圖分類號(hào)：TS272 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：0253-2301（2019）09-012

Abstract： The contents of theanine in the green tea made from Fuding Dabaicha in different origins were detected， which provided the basis for the quality identification of green tea made from Fuding Dabaicha in different origins. HPLC was used for the determination： the chromatographic column was RP-18 （particle size of 5 μm， 250 mm×4.0 mm）， the flow velocity was 1.0 mL·min-1， the column temperature was （35±0.5） ℃， the determine wavelength was λ=210 nm， the sample size was 10 uL， and the mobile phase was 100% ultrapure water in phase A， being filtered by 0.45 μm aqueous phase membrane， and 100% acetonitrile in phase B， being filtered by 0.45 μm organic phase membrane. The results showed that the content of theanine in the green tea made from Fuding Dabaicha in 7 regions had a good linear relationship within the range of 0.10-0.20 mg· mL-1， with the recovery rate of 88.80%-97.35% and RSD of 0.57%， indicating that the method had good precision and high accuracy， and could be used to detect the content of theanine in green tea. The content of theanine in green tea made from Fuding Dabaicha in 7 regions ranged from 7.00 to 26.60 mg·g-1. And there were significant differences in the content of theanine in green tea in other origins except for Haifeng， Guangzhou and Changzhou， Jiangsu， indicating that the content of theanine was related to the tea growing regions.

Key words： Different origins; Fuding Dabaicha; Green tea; Theanine content; HPLC of theanine

茶氨酸是茶葉中特有的一種氨基酸，它是茶葉中主要的化學(xué)成分之一。茶葉中的茶氨酸是組成蛋白質(zhì)的基本單位，也是活性炭、酶和其他一些生物活性分子的組成成分。同時(shí)茶葉中茶氨酸的組成、含量以及他們的降解產(chǎn)物直接影響著茶葉的品質(zhì)，是組成綠茶品質(zhì)極為重要的成分之一[1]。茶葉中茶氨酸組成特性直接影響到茶葉的鮮爽醇度，且茶氨酸具有降壓、抗疲勞、抗腫瘤、鎮(zhèn)靜等多種生理功能，在醫(yī)療衛(wèi)生等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。茶葉中茶氨酸占茶葉中氨基酸總含量的50%～60%，占干茶總量的1%～2%[2-3]。本研究采用高效液相色法檢測(cè)不同產(chǎn)地福鼎大白茶制綠茶的茶氨酸含量，并對(duì)其含量進(jìn)行對(duì)比與分析，旨在為不同地區(qū)福鼎大白茶制綠茶的品質(zhì)鑒定提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試劑與藥品

乙腈為色譜純（美國(guó)TEDIA公司），超純水（密理博明澈超純水機(jī)制備），茶氨酸標(biāo)準(zhǔn)品（美國(guó)CATO公司）。

1.2 試驗(yàn)樣品

本試驗(yàn)所用茶樣選自貴州開陽、貴州德江、貴州清鎮(zhèn)、江蘇常州、四川雅安、山東青島、廣東海豐7個(gè)產(chǎn)地的福鼎大白茶所制綠茶，茶樣均為2017年生產(chǎn)，每個(gè)產(chǎn)地茶樣制作5個(gè)平行樣品。

1.3 試驗(yàn)儀器

日本島津AP135W電子天平，島津LC-16高效液相色譜儀，上海梅香XMTD-204恒溫水浴鍋，密理博明澈-D24VDC超純水儀，上海梅香80-2B電動(dòng)離心機(jī)，上海其林貝兒渦旋振蕩器，移液槍。

1.4 茶葉樣品制備

分別稱取不同地區(qū)綠茶樣品經(jīng)磨碎混勻后，稱取（100±0.5 mg）的茶粉倒入到離心管中，用移液槍加入10 mL自制超純水，密封。恒溫水浴鍋中浸提45 min，離心（3500 r·min-1、40 min），然后取上清液用0.45 μm水相濾膜過濾，放置待測(cè)。

1.5 色譜條件

色譜柱為RP-18（粒徑5 μm，250 mm×4.0 mm），流速1.0 mL·min-1，柱溫為（35±0.5）℃，檢測(cè)波長(zhǎng)為λ=210 nm，進(jìn)樣量為10 uL;流動(dòng)相為A相用100%超純水，采用0.45 μm水相濾膜過濾;B相用100%乙腈，采用0.45 μm有機(jī)相濾膜過濾備用。色譜梯度洗脫條件列于表1。

1.6 茶氨酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液

精密稱取0.05 g茶氨酸（精確到0.0001 g）標(biāo)準(zhǔn)品，用水溶解后移入50 mL容量瓶中，稀釋至刻度，混勻，此溶液每毫升含1 mg茶氨酸，有效期為1年[4]。

1.7 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

準(zhǔn)確吸取茶氨酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液0、0.10、0.20、0.50、1.00、1.50、2.00 mL，用水定容至10 mL，得到濃度分別為0、0.01、0.02、0.05、0.10、0.15、0.20 mg·mL-1的茶氨酸標(biāo)準(zhǔn)使用溶液。

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

將不同濃度的茶氨酸系列標(biāo)準(zhǔn)溶液采用《GB/T 23193-2017茶葉中茶氨酸的測(cè)定高效液相色譜法》[4]進(jìn)行測(cè)定。以茶氨酸標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)量濃度（mg·mL-1）為橫坐標(biāo)x，峰面積y為縱坐標(biāo)繪制茶氨酸標(biāo)準(zhǔn)曲線（圖1），其線性回歸方程為y=755507x+35827，相關(guān)系數(shù)R2=0.9997。檢測(cè)波長(zhǎng)在210 nm處，經(jīng)高效液相色譜儀測(cè)得茶氨酸標(biāo)準(zhǔn)品高效液相色譜圖（圖2），系數(shù)方程R2=0.9997，滿足試驗(yàn)檢測(cè)要求。

2.2 精密度試驗(yàn)

準(zhǔn)確吸取茶氨酸對(duì)照樣品1 mL，每次進(jìn)樣量10 μL，重復(fù)進(jìn)樣6次，繪制色譜圖，分別記錄各個(gè)峰的峰面積，計(jì)算求得其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD=0.57%。表明該方法的精密度良好，可用于檢測(cè)茶氨酸含量。

2.3 回收率測(cè)定

取1.4所得茶葉樣品進(jìn)行回收率測(cè)定試驗(yàn)，在已知茶氨酸含量的茶樣中加入一定量的標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行回收率試驗(yàn)，按樣品處理方法（1.4）處理后上機(jī)測(cè)定，結(jié)果見表2。從表2可以看出，茶葉樣品回

2.4 不同產(chǎn)地福鼎大白茶制綠茶茶氨酸含量比較分析

從試驗(yàn)結(jié)果（表3）可知，不同產(chǎn)地福鼎大白茶制綠茶茶氨酸含量為7.00～26.30 mg·g-1。貴州德江茶樣的茶氨酸含量最高，為26.30 mg·g-1，與其他不同產(chǎn)地茶樣差異均達(dá)極顯著水平;廣州海豐和江蘇常州茶樣茶氨酸含量較接近，二者差異未達(dá)顯著水平，與其他產(chǎn)地茶樣差異均達(dá)極顯著水平;貴州開陽茶樣茶氨酸含量最低，僅為7.00 mg·g-1。

3 結(jié)論

本研究采用高效液相色譜方法測(cè)定廣東海豐、山東青島、貴州開陽、貴州德江，貴州清鎮(zhèn)、江蘇常州、四川雅安7個(gè)產(chǎn)地福鼎大白茶制綠茶茶氨酸含量，RSD=0.57%，方法回收率為88.80%～97.35%，該方法精密度高，回收率良好，結(jié)果準(zhǔn)確。有研究表明，茶氨酸含量可能與茶葉的種植地區(qū)生長(zhǎng)環(huán)境（大氣、降水、土壤中元素含量、土壤酸度）等有關(guān)[5-7]，也可能與茶葉加工方式和發(fā)酵方式有關(guān)[8]。本研究結(jié)果表明，7個(gè)產(chǎn)地福鼎大白茶制綠茶茶氨酸含量為7.00～26.30 mg·g-1，茶氨酸含量差異較大。其中，貴州德江茶樣茶氨酸含量最高（26.30 mg·g-1），比其他地區(qū)茶樣茶氨氨酸含量高28.2%～73.7%，說明貴州德江地區(qū)種植的福鼎大白制綠茶茶氨酸含量豐富，值得大力推廣。由于茶氨酸含量只是茶葉品質(zhì)重要的評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)之一，其茶葉品質(zhì)是否高于其他6個(gè)種植產(chǎn)地還有待進(jìn)一步研究。

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（責(zé)任編輯：林玲娜）