張化雨 徐廣平 龐哲 張立榮 馬麗霞

摘?要：砂硒因沙子具有透氣保水的特性，同時(shí)硒釋放相對(duì)緩慢，能提供穩(wěn)定的硒來源，是比較理想的富硒蔬果培養(yǎng)基質(zhì)。為了探討緩釋砂硒對(duì)綠甘藍(lán)富硒作用和生長(zhǎng)的影響，該研究設(shè)置對(duì)照組（CK），實(shí)驗(yàn)組緩釋砂硒（CT）、雞糞和砂硒1∶1混合（CT1）、雞糞和砂硒1∶2混合（CT2） 和雞糞（CT3）5個(gè)處理。結(jié)果表明：CT、CT1和CT2處理的綠甘藍(lán)硒含量比CK分別增加45%、61%和64%，逐步回歸分析表明綠甘藍(lán)硒含量和土壤硒含量呈顯著正相關(guān)（P<0.05）;CT2處理的效果最好，綠甘藍(lán)的產(chǎn)量增加45%，葉片厚度增加22.78%，水分利用效率提高56.66%。土壤錳含量和硒含量共同解釋了綠甘藍(lán)生物量變化的72%，而土壤鋅含量解釋綠甘藍(lán)水分利用效率變化的66%。這表明砂硒添加后，通過增加土壤硒含量提高綠甘藍(lán)硒含量，砂硒和雞糞配比更有效地提高了綠甘藍(lán)硒含量并促進(jìn)其生長(zhǎng)。

關(guān)鍵詞：緩釋砂硒，綠甘藍(lán)，錳和鋅，土壤微生物，生物量

Abstract：Natural sand selenium（Se）is a readily available product which is air permeable and watertight. It is a kind of good matrix for producing Se enrichment plant. In order to test the efficiency of sand Se in cultivating green cabbage and provide Se as a nutrition source，we set five groups of experiments：CK （control group without fertilization），CT （natural sand Se），CT1 （chicken manure∶Sand Se=1∶1），CT2 （chicken manure∶sand Se=1∶2），CT3 （chicken manure）. The results showed that sand Se addition significantly increased ?Se content of green cabbage by 45%，61% and 64%. Compared with the CK and CT3 groups，the yield，leaf thickness and water use efficiency of the green cabbage in CT2 increased significantly by 45%，22.78% and 56.66%，respectively. Soil manganese and zinc content accounted for 72% variation of the green cabbage biomass and soil zinc accounted for 66% variation of the water use efficiency. These indicate that sand Se，particularly when mixed with chicken manure，not only can provide Se as a nutrition but also is beneficial to green cabbage yield.

Key words：slow-released sand selenium，green cabbage，Mn and Zn，soil microbe，biomass

硒是人體必需的微量元素之一，在維持人體正常生理過程和提高人體免疫力方面發(fā)揮著重要的作用 （曾靜和羅海吉，2003;姜超強(qiáng)等，2015;梁若玉等，2017;王磊和陽繼輝，2017）。人體缺硒會(huì)導(dǎo)致多種疾病，如克山病和大骨節(jié)病，甚至癌癥等（譚見安和朱文郁，1991;郭亞南等，2017）。人體可吸收的硒包括無機(jī)硒（硒酸鈉和亞硒酸鈉）和有機(jī)硒。目前發(fā)現(xiàn)無機(jī)硒強(qiáng)化劑的吸收和利用很不理想，其生物有效性低，毒性較大，更嚴(yán)重的是無機(jī)硒中毒量與需要量之間范圍小，因而被嚴(yán)格限制其使用量（劉華山，2009;曾慶良等，2018）。利用植物生長(zhǎng)過程中吸收無機(jī)硒轉(zhuǎn)化為有機(jī)硒相對(duì)安全（果秀敏等，2003;周鑫斌等，2017）。這一方法目前多用根施硒肥或者葉面噴施無機(jī)硒來實(shí)現(xiàn)（王寧寧等，1994; 張弛等，2002;劉華山，2009），但這些措施不僅提高了生產(chǎn)成本，而且還存在潛在的環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)，很難獲得硒含量穩(wěn)定的產(chǎn)品（張聯(lián)合等，2006;周鑫斌等，2017）。

砂硒具有透氣保水特性，同時(shí)硒釋放相對(duì)緩慢，能提供穩(wěn)定且含量保證的硒，是較理想的富硒蔬果培養(yǎng)基質(zhì)。但砂硒栽培蔬菜富硒效果如何目前還不十分清楚。綠甘藍(lán)是日常非常普遍的蔬菜，富含維生素C，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高，適合作為日常食補(bǔ)蔬菜。如何用天然富硒基質(zhì)培育出日常食用且硒含量穩(wěn)定的富硒蔬菜成為近年來硒產(chǎn)品開發(fā)的熱點(diǎn)。因此，本研究提出以下問題：（1）砂硒添加是否能提高綠甘藍(lán)硒含量和產(chǎn)量;（2）砂硒添加影響綠甘藍(lán)硒含量和產(chǎn)量的因素是什么。這兩個(gè)問題的解決能揭示緩釋砂硒對(duì)綠甘藍(lán)富硒作用和生長(zhǎng)的影響，為富硒綠甘藍(lán)的生產(chǎn)提供科學(xué)依據(jù)。

1?材料與方法

1.1 樣地和實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

2017年4月10日在北京市第一○一中學(xué)溫室內(nèi)的生態(tài)試驗(yàn)田開展實(shí)驗(yàn)。在試驗(yàn)田內(nèi)空曠平坦的種植場(chǎng)地，隨機(jī)選取5塊樣地，設(shè)置寬50 cm、行距30 cm、長(zhǎng)10 m的區(qū)域，每塊區(qū)域隨機(jī)移栽育好苗的綠甘藍(lán)，間距30 cm。 共5個(gè)處理，各3個(gè)重復(fù)，分別為對(duì)照組CK、實(shí)驗(yàn)組（CT、CT1、CT2和CT3）。使用砂硒及有機(jī)肥雞糞量見表1。

1.2 材料

土壤：選用北京市第一○一中學(xué)生態(tài)園內(nèi)土壤，pH值7.5，硒含量0.14 mg·kg-1。雞糞肥：生產(chǎn)商為河北高碑店市華舟有機(jī)肥制造有限公司，硒含量0.17 mg·kg-1;緩釋砂硒：硒含量0.5 mg·kg-1，北京仁創(chuàng)科技有限公司提供，來自于內(nèi)蒙古奈曼旗的富硒砂，掃描電鏡顯示其外部（圖1：左）及內(nèi)部（圖1：右）具有透氣保水的結(jié)構(gòu)（圖1）。

1.3 實(shí)驗(yàn)過程

1.3.1 催芽?2017年4月20日選取170粒飽滿的綠甘藍(lán)種子，并在催芽前進(jìn)行溫水浸種消毒。待水溫降至室溫，并等到種子吸水飽滿后取出種子，將準(zhǔn)備好的培養(yǎng)皿上放上一張厚度適當(dāng)?shù)募埥?，紙巾打濕并控掉多余的水分，在上面放上消過毒的種子，將其放在培養(yǎng)箱中25～26 ℃進(jìn)行催芽。在催芽過程中，保持紙巾和芽的濕潤(rùn)，2 d左右觀察到芽有白根露出即可。

1.3.2 播種和育苗?2017年4月25日將催過芽的種子播種在小花盆中，當(dāng)4～5片真葉長(zhǎng)出時(shí)挑選大小基本相等的幼苗進(jìn)行移栽。

1.3.3 土壤理化性質(zhì)測(cè)定?每個(gè)處理取50 g土樣，風(fēng)干后送到北京市農(nóng)科院測(cè)定土壤理化性質(zhì)。利用水∶土=1∶5測(cè)定土壤pH，利用凱氏定氮法測(cè)定土壤全氮含量。用比色法測(cè)定土壤速效磷含量。用火焰光度計(jì)法測(cè)定土壤全鉀。根據(jù)DTPA（一種螯合劑）浸提法，用原子吸收分光光度計(jì)，以乙炔-空氣火焰測(cè)定浸提液中速效鋅、錳、鐵的含量。另一部分樣品送至中國(guó)農(nóng)科院檢測(cè)中心測(cè)定硒含量，選取環(huán)保部發(fā)布的硒測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)，釆用氫化物發(fā)生-原子熒光光譜法測(cè)定樣品中的總硒含量。利用環(huán)刀法測(cè)定土壤容重和含水量。土壤微生物數(shù)量的測(cè)定按照《土壤微生物分析方法手冊(cè)》（許光輝和鄭洪元，1986）進(jìn)行，利用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基和高氏1號(hào)培養(yǎng)基培養(yǎng)土壤細(xì)菌和放線菌。具體在7月25日取植株根系附近的土壤，每組分別稱取1 g土樣，加入9 mL無菌蒸餾水，攪拌均勻后靜置15 min，使用移液器取上層清液1 mL進(jìn)行梯度稀釋，分別稀釋為10-1～10-7，用血球計(jì)數(shù)板在顯微鏡下觀察，挑選適合濃度。接種10-2、10-3、10-4進(jìn)行放線菌的培養(yǎng)觀察，接種10-5、10-6、10-7進(jìn)行細(xì)菌的培養(yǎng)觀察。稀釋后將稀釋液分別接種到配好的培養(yǎng)基中，其中細(xì)菌培養(yǎng)基包括牛肉膏 3.0 g、蛋白胨 10.0 g、NaCl 5.0 g 、瓊脂 15 g、水 1 000 mL，pH 7.4～7.6;放線菌培養(yǎng)基包括KNO3 0.1 g、K2HPO4 0.05 g、MgSO4· 7H2O 0.05 g、NaCl 0.05 g、FeSO4· 7H2O 0.001 g。接種完畢后放入恒溫培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)，細(xì)菌采取30 ℃避光恒溫培養(yǎng)，放線菌采取28 ℃避光恒溫培養(yǎng)，定期觀察培養(yǎng)基上的菌落個(gè)數(shù)和大小并進(jìn)行記錄。

1.3.4 綠甘藍(lán)指標(biāo)測(cè)定?葉片的測(cè)定：在苗期，利用直尺測(cè)量綠甘藍(lán)的葉長(zhǎng)和葉寬，定期數(shù)葉片數(shù)并觀察葉片顏色;在綠甘藍(lán)移栽成活后，通過直尺測(cè)定每片葉子的葉長(zhǎng)和葉寬用來計(jì)算出葉面積;選取綠甘藍(lán)最大的葉子，利用游標(biāo)卡尺測(cè)量葉片厚度;選擇晴朗的天氣，在9：00—11：00，光飽和光強(qiáng)下（1 000 μmol·m-2·s-1），用美國(guó)Ciras-Ⅲ型便攜式光合儀，測(cè)定綠甘藍(lán)光合速率（Pn），蒸騰速率（E），氣孔導(dǎo)度（Gs），水分利用效率=光合速率（Pn）/蒸騰速率（E）;綠甘藍(lán)葉綠素含量的測(cè)定：取綠甘藍(lán)成熟葉，擦凈表面的污物，并在葉子上打孔，稱量選取的葉子的重量為0.2 g，再用配置好80%的丙酮溶液（分析純，北京化工廠生產(chǎn)，含量≥99.5°）浸提1～2 d直至葉子變白后開始進(jìn)行下一步的實(shí)驗(yàn)。用80%的丙酮溶液和蒸餾水各洗3遍比色皿后將浸提液倒入其中用UV-1 700c（MC150703001，上海美析儀器有限公司）型紫外可見分光光度計(jì)進(jìn)行測(cè)量，在646、663、470 nm分別測(cè)量其吸光度，之后根據(jù)公式計(jì)算葉綠素a、葉綠素b和類胡蘿卜素的含量，其計(jì)算公式分別為Ca=12.21A663-2.81A646;Cb=20.13A646-5.03A663;CT=Ca+Cb=17.32A646-7.18A663;Cx.c=（1 000A470-3.27 Ca-104Cb）/229。

緊實(shí)度的測(cè)定：綠甘藍(lán)包葉后利用直尺定期測(cè)定綠甘藍(lán)包葉直徑。生物量測(cè)定：在綠甘藍(lán)成熟后，將整株挖起，沖洗干凈，將沖洗干凈的地上和地下部分用吸水紙吸干，先稱鮮重，后在105 ℃下殺青30 min，然后調(diào)至65 ℃，烘干至恒重，分別稱取地上和地下部分的干重，最后根據(jù)稱量的數(shù)據(jù)計(jì)算生物量和根冠比。葉片橫切面液泡大小和細(xì)胞數(shù)量的測(cè)定：取測(cè)過葉片厚度的成熟綠甘藍(lán)葉片，在貼近葉脈右側(cè)距離葉基2 cm處剪寬0.5 cm、長(zhǎng)1 cm的葉片放入固定液中（正丁醇：國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司10005218;無水乙醇：國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司100092683;番紅固綠（植物）染液：武漢谷歌生物科技有限公司G103;中性樹膠國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司10004160），在中國(guó)科學(xué)院青藏高原研究所做成石蠟切片。把做好的切片放進(jìn)組織切片掃描儀（型號(hào)：Pannoramic MIDI，廠家：3D HISTECH，匈牙利），儀器自動(dòng)對(duì)焦開始掃描。在10X圖片中截取相同面積，數(shù)細(xì)胞數(shù)量，并測(cè)量液泡最大和最小直徑。每個(gè)處理做4個(gè)重復(fù)，共20個(gè)圖片。

1.4 數(shù)據(jù)分析

數(shù)據(jù)處理及圖表繪制運(yùn)用Excel 2007軟件，描述性統(tǒng)計(jì)分析運(yùn)用SPSS18.0軟件，采用單因子（One-way ANOVA）進(jìn)行方差分析，選擇Tukey多重比較檢驗(yàn)處理對(duì)被測(cè)定指標(biāo)的差異，以P<0.05作為差異顯著的標(biāo)準(zhǔn)。利用逐步回歸的方法，分析測(cè)定的土壤理化性質(zhì)對(duì)綠甘藍(lán)硒含量、生物量、蒸騰速率和葉片厚度等的影響。

2?結(jié)果與分析

2.1 砂硒對(duì)綠甘藍(lán)的影響

從表2可以看出，緩釋砂硒各處理導(dǎo)致了部分土壤和植物指標(biāo)發(fā)生顯著變化，顯著改變了土壤硒含量、微生物菌落數(shù)、容重、速效磷、速效鐵、速效錳和鋅、綠甘藍(lán)硒含量、生物量、葉片厚度、蒸騰速率、水分利用效率和光合色素濃度。

與CK相比，CT、 CT1和CT2分別顯著地提高了綠甘藍(lán)葉片硒含量的45%、61%和64%（圖2：A）。逐步回歸分析顯示綠甘藍(lán)硒含量主要是由土壤硒含量決定的（表3）。結(jié)果表明添加砂硒，同時(shí)添加雞糞肥更有利于綠甘藍(lán)硒的硒累積，與CK相比，CT2顯著增加了綠甘藍(lán)生物量（圖2：B）。

與CK相比，CT2顯著降低植物葉綠素a、葉綠素b和類胡蘿卜素含量（圖3：A，B，C）。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明砂硒或砂硒混合雞糞肥都不同程度地改變了植物的葉片厚度，其中CT2顯著增加葉片厚度的22.78%（圖3：D）。從植物的形態(tài)指標(biāo)上看，施雞糞肥并沒有顯著改變綠甘藍(lán)的葉面積和葉厚度（P>0.05），但砂硒顯著改變了綠甘藍(lán)的葉片厚度。利用逐步回歸的方法，未發(fā)現(xiàn)所測(cè)定的土壤理化性質(zhì)對(duì)甘藍(lán)葉片厚度有直接的影響（P>0.05）。葉片橫切掃描結(jié)果顯示，與CK相比，CT、CT1、CT2和CT3均顯著提高綠甘藍(lán)葉片單位面積內(nèi)液泡大小，但是只有砂硒與雞糞混合和單獨(dú)添加雞糞時(shí)綠甘藍(lán)細(xì)胞數(shù)量才顯著增加（表4）。

測(cè)定綠甘藍(lán)的蒸騰速率和水分利用效率結(jié)果顯示，CT2顯著降低了綠甘藍(lán)葉片蒸騰速率的34.74%，提高了水分利用效率的56.66%（圖3：E，F(xiàn)）。逐步回歸分析結(jié)果表明土壤鋅含量解釋了綠甘藍(lán)蒸騰速率變化的66%（表3）。

2.2 砂硒對(duì)土壤的影響

與CK相比，施砂硒、施雞糞混合砂硒1∶1和1∶2分別提高綠甘藍(lán)硒含量的45%、61%和64%（圖4：A）。說明砂硒添加起到增加土壤硒含量的作用。與CK相比，砂硒添加不同程度上降低了土壤容重。這是因?yàn)樯拔哂斜Ｋ笟馓匦?，所以砂硒添加降低了土壤緊實(shí)度和土壤容重，增加了土壤的孔隙度。實(shí)驗(yàn)各處理均對(duì)土壤含水量沒有顯著影響（P>0.05）。

與CK、CT和CT1相比，CT2和CT3均顯著提高土壤速效鐵、速效磷和鋅的含量，CT2與CK相比有效鐵含量提高了58.97%、速效磷提高了20.91%，有效鋅含量提高了16%。這表明雞糞添加和砂硒添加都有可能增加土壤有效鐵、速效磷和速效鋅的含量（圖5：A，B，C）。與CK相比，CT2土壤速效錳含量顯著增加（圖5：D），表明砂硒和雞糞混合添加是促進(jìn)土壤速效錳增加的主要原因。相對(duì)于CK，CT、CT1、CT2和CT3都提高了土壤微生物的菌落數(shù)（圖6），其中CT和CT2提高的最多。表明單位面積內(nèi)砂硒越多土壤微生物菌落數(shù)越多，這可能與砂硒比較好的透氣保水性有關(guān)。

3?討論與結(jié)論

3.1 砂硒對(duì)綠甘藍(lán)硒含量和地上生物量的影響

我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明添加砂硒能夠提高綠甘藍(lán)硒含量，但同時(shí)添加雞糞肥則更有利于綠甘藍(lán)硒的累積。很多硒酸鈉或亞硒酸鈉直接添加的實(shí)驗(yàn)結(jié)果也都表現(xiàn)出無機(jī)硒添加提高了植物的硒含量（吳永堯等，1998;劉海燕，2015）。但這些研究也同時(shí)發(fā)現(xiàn)稍高含量的無機(jī)硒添加就會(huì)對(duì)植物有毒害作用，降低植物生物量，甚至導(dǎo)致植物死亡（吳永堯等，1998;劉海燕，2015）。例如吳永堯等（1998）發(fā)現(xiàn)僅僅培養(yǎng)1 d即可見0.5 mg·kg-1硒處理的水稻幼苗葉緣卷曲，1.0 mg·kg-1硒以上的處理則幼苗接近死亡。本研究中，CT（0.52 mg·kg-1硒）、CT1（0.25 mg·kg-1硒）和單純雞糞添加均沒有影響綠甘藍(lán)的地上生物量，而砂硒和雞糞混合2∶1卻顯著升高綠甘藍(lán)生物量。這表明砂硒與雞糞2∶1能有效提高綠甘藍(lán)的產(chǎn)量。張弛等（2002）發(fā)現(xiàn)適量的硒添加油菜根系氧化還原能力和蛋白質(zhì)含量提高而過氧化物丙二醛的含量降低，顯著促進(jìn)油菜生長(zhǎng)發(fā)育、維持旺盛的生長(zhǎng)活力、增強(qiáng)抗逆性、提高植物硒含量和促進(jìn)油菜增產(chǎn)。我們的逐步回歸分析結(jié)果顯示土壤硒含量和錳含量解釋綠甘藍(lán)生物量變化的72%，這可能是因?yàn)殄i是植物光合作用必須的元素，硒是植物新陳代謝必須元素，因此硒添加可能通過促進(jìn)綠甘藍(lán)新陳代謝或者通過提高土壤錳含量從而促進(jìn)光合作用，間接提高綠甘藍(lán)生物量（Chen et al.，2018）。

人體可攝入的硒包括無機(jī)硒（硒酸鈉和亞硒酸鈉）和有機(jī)硒。從2000年開始國(guó)際上已禁用無機(jī)硒。酵母硒、麥芽硒、納米硒人體吸收和代謝率低，人體吸收率為40%～60%，且剩余為無機(jī)硒殘留（王俊等，2003）。目前備受青睞的為天然有機(jī)植物活性硒，即從富硒土壤中吸收硒元素的食品，經(jīng)過生長(zhǎng)過程中的光合作用和體內(nèi)生物轉(zhuǎn)化作用，在體內(nèi)以硒代氨基酸形態(tài)存在，人體吸收率在99%以上，既滿足了人體硒元素需要（劉新偉等，2015），又解決了硒的吸收和代謝率偏低難題。因此，真正的富硒食品應(yīng)是富硒土壤中栽培生產(chǎn)出的有機(jī)硒，且通過土壤-植物-（動(dòng)物）-人的食物鏈方式補(bǔ)硒是安全有效的途徑（王俊等，2003）。

3.2 砂硒對(duì)綠甘藍(lán)形態(tài)指標(biāo)的影響

本研究結(jié)果顯示單純砂硒添加降低綠甘藍(lán)光合色素含量。這與硒添加對(duì)油菜和小麥葉綠素的影響相反。王寧寧等（1994）和張弛等（2002）發(fā)現(xiàn)種植小麥添加亞硒酸鈉或栽培油菜添加亞硒酸鈉均導(dǎo)致植物葉片光合色素含量升高。但劉華山（2009）研究認(rèn)為不同水平的亞硒酸鈉添加對(duì)葉綠素降低的影響是暫時(shí)的，一般可能最初葉綠素含量略有下降，但是隨著生長(zhǎng)的繼續(xù)進(jìn)行，各處理水平葉綠素含量會(huì)趨于同一值。我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果部分解釋了為什么單純砂硒添加并沒有提高綠甘藍(lán)生物量。在我們的實(shí)驗(yàn)砂硒混合雞糞2∶1有助于綠甘藍(lán)葉片厚度增加。普遍認(rèn)為植物葉片的厚度是由于葉片細(xì)胞本身的生長(zhǎng)以及植物體內(nèi)的水分含量引起的。植物水分充足時(shí)，植物葉片變厚，缺水時(shí)則葉片變?。懺薜龋?015）。我們實(shí)驗(yàn)結(jié)果并沒有發(fā)現(xiàn)施雞糞或砂硒影響土壤含水量，也未發(fā)現(xiàn)所測(cè)定的土壤理化性質(zhì)對(duì)綠甘藍(lán)葉片厚度有直接的影響。葉片橫切掃描結(jié)果顯示砂硒添加顯著提高綠甘藍(lán)葉片單位面積內(nèi)液泡大小，但是只有砂硒配比雞糞和單獨(dú)添加雞糞時(shí)綠甘藍(lán)細(xì)胞數(shù)量才顯著增加。因此，本研究綠甘藍(lán)葉片厚度的增加是因?yàn)榧?xì)胞大小和細(xì)胞數(shù)量增加導(dǎo)致的（Hunder et al.，1981;Lindorf，1994）。

本研究結(jié)果表明砂硒混合雞糞2∶1降低了綠甘藍(lán)蒸騰速率并能有效提高葉片水分利用效率。魏孝榮等 （2005）發(fā)現(xiàn)鋅添加能顯著提高玉米葉片蒸騰速率達(dá)36%，而洋甘藍(lán)和花椰菜缺鋅都降低了其蒸騰速率（張福鎖，1991）。鋅在植物氣孔開閉中作用機(jī)理可能在于碳酸酐酶中含有鋅，而碳酸酐酶能夠調(diào)節(jié)CO2的供應(yīng)（張福鎖，1991）。增加鋅能夠提高植物體內(nèi)該酶的活性，有利于增加保衛(wèi)細(xì)胞內(nèi)的HCO-3含量，促進(jìn)氣孔開放。但我們的結(jié)果顯示CT2土壤鋅含量最高卻蒸騰速率最低，這表明在水分條件不缺，土壤鋅充足時(shí)還有其他機(jī)制調(diào)控著植物的蒸騰速率以此來確保植物有較高的水分利用效率（張福鎖，1991）。

總之，緩釋砂硒添加（砂硒、雞糞肥∶砂硒=1∶1，雞糞肥∶砂硒=1∶2）使綠甘藍(lán)的硒含量分別增加了45%、61%和64%，綠甘藍(lán)硒含量和土壤硒含量顯著正相關(guān)（P<0.05）;添加緩釋砂硒后，降低了土壤容重，增加了土壤微生物菌落數(shù)量，提高土壤硒含量，改善土壤理化性質(zhì)，進(jìn)而提高綠甘藍(lán)硒含量，尤其砂硒和雞糞肥配比更有效地提高了綠甘藍(lán)硒含量并促進(jìn)其生長(zhǎng)。這表明砂硒添加不僅提高綠甘藍(lán)硒含量，而且可以改善土壤條件，進(jìn)一步促進(jìn)綠甘藍(lán)產(chǎn)量提高，值得在農(nóng)業(yè)上大面積推廣。

參考文獻(xiàn)：

CHEN F，SHEN J，MIN D，et al.，2018. Male populus cathayana than female shows higher photosynthesis and less cellular injury through ABA-induced manganese transporting inhibition under high manganese condition [J]. Trees，32（1）： 255-263.

GUO XM，NIU JF，F(xiàn)ANG Z，et al.，2003. On the forms of selenium in plant and mechanisms of physiological role of selenium [J]. J Agric Univ Hebei，26（S1）：142-147. ?[果秀敏，牛君方，方正，等，2003. 植物中硒的形態(tài)及其生理作用 [J]. 河業(yè)農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，26（S1）：142-147.]

GUO YN，LI HR，YANG LS，et al.，2017. The relationship between environment selenium characteristic and distribution of Kaschin-Beck disease in the Yarlung Zangbo River bank ?[J]. Chin J Endemiol，36（7）：494-497. ?[郭亞南，李海蓉，楊林生，等，2017. 雅魯藏布江兩岸環(huán)境硒分布特征及與大骨節(jié)病發(fā)病的關(guān)系 [J]. 中華地方病學(xué)雜志，36（7）：494-497.]

HUNDER NPA，PALTA JP，LI ?PH，et al.，1981. Anatomical changes in leaves of Puma rye in response to growth at cold-hardening temperature [J]. Bot Gaz，142：55-62.

JIANG CQ，SHEN J，ZU CL，2015. Selenium uptake and transport of rice under different Se-enriched natural soils ?[J]. ?Chin J Appl Ecol，26（6）：809-816. ?[姜超強(qiáng)，沈嘉，祖朝龍，2015. 水稻對(duì)天然富硒土壤硒的吸收及轉(zhuǎn)運(yùn) [J]. 應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào)，26（6）：809-816.]

LI HR，YANG LS，TAN JA，et al.，2017. Progress onselenium deficiency in geographical environment and its health impacts in China [J]. Curr Biotechnol，7（5）：381-386. [李海蓉，楊林生，譚見安，等，2017. 我國(guó)地理環(huán)境硒缺乏與健康研究進(jìn)展 [J]. 生物技術(shù)進(jìn)展，7（5）：381-386.]

LIANG RY，HE J，SHI YJ，et al.，2017. Bioavailability and profile distribution of selenium in soils of typical Se-enriched agricultural base [J]. Environ Chem，36（7）：1588-1595. [梁若玉，和嬌，史雅娟，等，2017. 典型富硒農(nóng)業(yè)基地土壤硒的生物有效性與剖面分布分析 [J]. 環(huán)境化學(xué)，36（7）：1588-1595.]

LINDORF H，1994. Ecoanatomical wood features of species from a very dry tropical forest ?[J]. IAWA J，15：45-61.

LIU HS，2009. The effects of selenium on tomato and lettuces and the characteristics of selenium accumulation ?[D]. Yangzhou：Yangzhou University. ?[劉華山，2009. 番茄和生菜的施硒效應(yīng)和積硒特性 [D]. 揚(yáng)州：揚(yáng)州大學(xué).]

LIU HY，2015. Effects of different concentrations of trace elements on growth and quality of pea sprouts [D]. Hefei：Anhui Agricultural University. ?[劉海燕，2015. 不同濃度的微量元素對(duì)豌豆芽苗菜的生長(zhǎng)和營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)的影響 [D]. 合肥：安徽農(nóng)業(yè)大學(xué).]

LIU XW，WANG QL，DUAN BH，et al.，2015. Effects of selenite addition on selenium absorption，root morphology and physiological characteristics of rape seedlings [J]. Chin J Appl Ecol，26（7）：2050-2056. [劉新偉，王巧蘭，段碧輝，等，2015. 亞硒酸鹽對(duì)油菜幼苗硒吸收、根系形態(tài)及生理指標(biāo)的影響 [J]. 應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào)，26（7）：2050-2056.]

LU YZ，JIANG ZH，LI X，et al.，2015. Thereview of plant moisture content detection [J]. Chin Agric Sci Bull，31（9）：168-177. [陸元洲，江朝暉，李想，等，2015. 植物水分含量檢測(cè)綜述 [J]. 中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào)，31（9）：168-177.]

TAN JA，ZHU WY，1991. The relationship between keshan disease and environmental selenium and other life elements [J]. Chin J Endemiol，10（5）：269-274. ?[譚見安，朱文郁，1991. 克山病與環(huán)境硒等生命元素的關(guān)系 [J]. 中國(guó)地方病學(xué)雜志，10（5）：269-274.]

WANG J，HUANG M，XU XL，et al.，2003. Research progress of selenium and selenium rich functional food [J]. Jiangsu Agric Sci，2：53-56. [王俊，黃明，徐幸蓮，等，2003. 硒及富硒功能食品研究進(jìn)展 [J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2：53-56.]

WANG NN，DU XG，ZHU LJ，1994. The effect of selenite on chlorophyll biosynthesis and some antioxdation in greening wheat leaves [J]. Acta Sci Nat Univ Nankai，2：21-25. ?[王寧寧，杜曉光，朱亮基，1994. 亞硒酸鈉對(duì)轉(zhuǎn)綠小麥葉片內(nèi)葉綠素生物合成和某些抗氧化作用的影響 [J]. 南開大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2：21-25.]

WANG L，YANG JH，2017. The selenium status and infactors affecting cultivation of selenium enriched tea in main tea garden of Guangxi ?[J]. J Anhui Agric Sci，45（6）：37-38. ?[王磊，陽繼輝，2017. 廣西主產(chǎn)茶園富硒現(xiàn)狀及影響富硒茶栽培的因素 [J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，45（6）：37-38.]

WEI XR，HAO MD，ZHANG CX，et al.，2005. Effects of zinc and manganese fertilizers on maize photosynthetic performance under soil drought condition [J]. Acta Agron Sin，31（8）：1101-1104. ?[魏孝榮，郝明德，張春霞，等，2005. 土壤干旱條件下外源鋅、錳對(duì)夏玉米光合特性的影響 [J]. 作物學(xué)報(bào)，31（8）：1101-1104.]

WU YY，LUO ZM，PENG ZK，1998. Research on the influence of selenium provided at different levels upon the growth of rice and its accumulation of selenium ?[J]. J Hunan Agric Univ，24（3）：176-179. [吳永堯，羅澤民，彭振坤，1998. 不同供硒水平對(duì)水稻生長(zhǎng)的影響及水稻對(duì)硒的富集作用 [J]. 湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，24（3）：176-179.]

XU GH，ZHEN HY，1986. Handbook of analytical methods for soil microbiology [M]. Beijing：Agriculture Press：102-110. ?[許光輝，鄭洪元，1986. 土壤微生物分析方法手冊(cè) [M]. 北京：農(nóng)業(yè)出版社：102-110.]

ZHANG C，WU YY，PENG ZK，et al.，2002. Influence of selenium on the content of chloroplast pigment in rape seedlings [J]. J Hubei Inst Nat （Nat Sci Ed），20（3）：63-65. ?[張馳，吳永堯，彭振坤，等，2002. 硒對(duì)油菜苗期葉片色素的影響研究 [J]. 湖北民族學(xué)院學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），20（3）：63-65.]

ZHANG FS，1991. Effect of zinc deficiency on the transpiration of apple seedlings [J]. Acta Agric Univ Peking，17（4）：74-88. ?[張福鎖，1991. 缺鋅對(duì)蘋果苗蒸騰作用的影響 [J]. 北京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，17（4）：74-88.]

ZENG J，LUO HJ，2003. Research progress of trace element selenium ?[J]. Stud Trace Elements Health，20（2）：52-56. ?[曾靜，羅海吉，2003. 微量元素硒的研究進(jìn)展 [J]. 微量元素與健康研究，20（2）：52-56.]

ZHANG LH，SHI WM，WANG XC，2006. Effect of different factors on plant uptake of selenite of excised rice roots [J]. Soils，38（4）：417-421. [張聯(lián)合，施衛(wèi)明，王校常，2006. 不同因素對(duì)水稻離體根吸收四價(jià)硒影響 [J]. 土壤，38（4）：417-421.]

ZENG QL，YU T，WANG R，2018. The influencing factors of selenium in soils and classifying the selenium-rich soil resources in the typical area of Enshi，Hubei [J]. Geoscience，32（1）：105-112. ?[曾慶良，余濤，王銳，2018. 土壤硒含量影響因素及富硒土地資源區(qū)劃研究—以湖北恩施沙地為例 [J]. 現(xiàn)代地質(zhì)，32（1）：105-112.]

ZHOU XB，LAI F，ZHANG CM，et al.，2017. Pathways of selenium to grain relative to form of selenium and variety of rice（Oryza sativa L.） [J]. Acta Pedol Sin，54（5）：1251-1258. ?[周鑫斌，賴凡，張城銘，等，2017. 不同形態(tài)硒向水稻籽粒轉(zhuǎn)運(yùn)途徑及品種差異 [J]. 土壤學(xué)報(bào)，54（5）：1251-1258.]