李 香，汪 巍，鄧 瑩，魏學(xué)軍，孫曉惠，許義紅

黔南民族醫(yī)學(xué)高等專(zhuān)科學(xué)校，都勻 558003

三顆針BerberidisRadix為小檗科植物小黃連刺BerberiswihonaeHemsl.，擬豪豬刺BarberissoulieanaSchneid.，細(xì)葉小檗BerberispoiretiiSchneid.或匙葉小檗BerberisvernaeSchneid.等同屬數(shù)種植物的干燥根，主含鹽酸小檗堿、小檗胺、掌葉防己堿和藥根堿等多種生物堿[1]。具有較好的清熱燥濕，瀉火解毒之功效。由于資源豐富，療效顯著，采集方便，民間常用來(lái)代替黃柏、黃連藥用,在貴州苗族聚集區(qū)被廣泛用于解毒、殺菌、鎮(zhèn)痛、降血糖等[1]，民間亦有老中醫(yī)將其酒制、醋制[2]后使用。三顆針中生物堿提取方法有煎煮、回流、超聲、回流超聲等方法，三顆針主含鹽酸小檗堿成分，主要用于降血壓、降血糖、降血脂等[1]。不同炮制、提取方法對(duì)其降血糖作用的影響就筆者查閱文獻(xiàn)未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道，本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)三顆針不同炮制、提取方法降血壓、降血脂作用進(jìn)行比較研究，為三顆針的進(jìn)一步研究與開(kāi)發(fā)應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與儀器

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

健康KM小鼠，SPF級(jí)，雄性小鼠，體重18～22 g，由長(zhǎng)沙市天勤生物技術(shù)有限公司提供，許可證號(hào)：SCXK(湘)2014-0011。小鼠飼養(yǎng)于空調(diào)房?jī)?nèi)，喂養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)顆粒飼料，實(shí)驗(yàn)前3天為適應(yīng)期，期間自由攝食與飲水。

1.2 藥品與試劑

三顆針購(gòu)自北京同仁堂藥房，產(chǎn)地河南(批號(hào)：170512，生產(chǎn)日期：20170518)，經(jīng)測(cè)定為合格藥材。鹽酸二甲雙胍片，石家莊市華新藥業(yè)有限責(zé)任公司，批號(hào)：20140023。鹽酸腎上腺素注射液，吉林省華牧動(dòng)物保健品有限公司，批號(hào)：2014070011221。鏈脲佐菌素(streptozotocin，STZ)，美國(guó)Sigma公司，批號(hào)：WXBC2544V。四氧嘧啶(Alloxan)，美國(guó)Sigma公司，批號(hào)：BCBT8817。葡萄糖，天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)：20121203。檸檬酸、檸檬酸鈉，重慶江川化工集團(tuán)有限公司，批號(hào)：20151230?？偰懝檀?TC)試劑盒、甘油三酯(TG)試劑盒，批號(hào)：20181120。低密度脂蛋白(LDLC)、高密度脂蛋白(HDLC)試劑盒，批號(hào)：20181114。所有試劑盒均購(gòu)自南京建成生物工程研究所。甲醇，乙醇，鹽酸均為分析純，娃哈哈飲用水。

1.3 主要儀器

MR-96A酶標(biāo)儀，深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司；SG-4050C型數(shù)顯恒溫水浴鍋，上海碩光公司；循環(huán)水真空泵，上海予英儀器有限公司；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，上海亞榮生化儀器廠；血糖儀，三諾生物傳感股份有限公司；血糖試紙，三諾生物傳感股份有限公司；DHG-9240A真空干燥箱，上海金山公司；電子天平，瑞士METTLER；OR型低速離心機(jī)，德國(guó)HERAEUS。

2 方法

2.1 各炮制品的制備

生品：取凈制三顆針?biāo)幉?，切片，干燥，備用?/p>

酒制品：取凈制藥材800 g，按《中國(guó)藥典》2015版附錄炮制通則“酒制”項(xiàng)要求。加黃酒20%(160 g)拌勻，悶潤(rùn)6 h，待酒浸透后取出，置烘箱中，160 ℃烘干，取出，放涼備用。同法制備3份。

醋制品：取凈制藥材800 g，按《中國(guó)藥典》2015版附錄炮制通則“醋制”項(xiàng)要求。加米醋20%(160 g)拌勻，悶潤(rùn)6 h，待米醋浸透后取出，余同酒制品制備。

2.2 各炮制品不同提取物的制備[3-6]

2.2.1 煎煮法

取生品、酒制品、醋制品粉碎過(guò)150目篩，各制品各3份，約120 g，分別置燒杯中，加入10倍量的蒸餾水煎煮2 h，抽濾，濾渣加入8倍量的蒸餾水煎煮1 h，抽濾，合并兩次濾液濃縮減壓干燥成浸膏，分別得生品、酒制品、醋制品水煎液組。生品水煎液組平均得膏率(4.92%)，酒制品水煎液組平均得膏率(5.31%)，醋制品水煎液組平均得膏率(6.05%)。

2.2.2 回流法

取生品、酒制品、醋制品粉碎過(guò)150目篩，各制品各3份，約120 g，分別置圓底燒瓶中，加入10倍量鹽酸甲醇(1∶100)水浴回流2 h，抽濾，濾渣加入8倍量的鹽酸甲醇(1∶100)水浴回流1 h，余同“2.2.1”項(xiàng)，生品回流組平均得膏率(1.11%)，酒制品回流組平均得膏率(1.87%)，醋制品回流組平均得膏率(2.46%)。

2.2.3 超聲法

取生品、酒制品、醋制品粉碎過(guò)150目篩，各制品各3份，約120 g，分別置具塞錐形瓶中，加入10倍量鹽酸甲醇(1∶100)，稱(chēng)重后浸泡12 h，超聲提取1 h，稱(chēng)重，用鹽酸甲醇(1∶100)補(bǔ)足重量，余同“2.2.1”項(xiàng)，生品超聲組平均得膏率(1.92%)，酒制品超聲組平均得膏率(2.19%)，醋制品超聲組平均得膏率(2.65%)。

2.2.4 回流超聲法

取生品、酒制品、醋制品粉碎過(guò)150目篩，各制品各3份，約120 g，分別置三角瓶中，加入10倍量鹽酸甲醇(1∶100)60 ℃水浴回流1 h，超聲1.5 h，余同“2.2.1”項(xiàng)，生品回流超聲組平均得膏率(6.08%)，酒制品回流超聲組平均得膏率(6.26%)，醋制品回流超聲組平均得膏率(6.35%)。

2.3 對(duì)正常小鼠血糖的影響

將KM小鼠，隨機(jī)分成26組，每組6只，分別為正常對(duì)照組給予等容量的生理鹽水(20 mL/kg)；二甲雙胍組；各制品水煎液組；各制品回流組；各制品超聲組；各制品回流超聲組的高中劑量組。根據(jù)該藥生藥量及預(yù)實(shí)驗(yàn)按照表1中劑量灌胃給藥，每天灌胃1次，連續(xù)灌胃28天，于末次給藥1 h后(禁食不禁水8 h)，小鼠尾靜脈采血，采用血糖儀測(cè)定小鼠空腹血糖值。

2.4 對(duì)四氧嘧啶致糖尿病小鼠血糖的影響[7,8]

小鼠禁食不禁水24 h后，尾靜脈注射新配制的四氧嘧啶(70 mL/kg)，同時(shí)給予高糖高脂飼料，72 h后(禁食不禁水8 h)，小鼠尾靜脈采血，血糖儀測(cè)定小鼠血糖值，選取血糖值大于9.0 mmol/L，小于30 mmol/L的小鼠作為糖尿病模型。將造模成功的糖尿病小鼠隨機(jī)分成26組，每組6只，另隨機(jī)取6只正常小鼠作正常對(duì)照組，鹽酸二甲雙胍組及各炮制品不同提取物組的高中劑量組按照設(shè)計(jì)劑量灌胃給藥。模型組和正常對(duì)照組給予等容量的生理鹽水(20 mL/kg)，每天灌胃1次，連續(xù)灌胃28天，于末次給藥1 h后(禁食不禁水8 h)，小鼠尾靜脈采血，采用血糖儀測(cè)定小鼠空腹血糖值。

2.5 對(duì)鏈脲佐菌素致糖尿病小鼠血糖的影響[9,10]

取小鼠禁食不禁水12 h后，腹腔注射新配制的鏈脲佐菌素溶液(150 mg/kg)，同時(shí)給予高血糖飼料，72 h后(禁食不禁水8 h)，小鼠尾靜脈采血，測(cè)定小鼠血糖值，選取血糖值≥9.0 mmol/L的小鼠作為糖尿病模型，納入實(shí)驗(yàn)。分組及給藥測(cè)定方法同“2.4”項(xiàng)。

2.6 對(duì)高濃度葡萄糖致小鼠急性高血糖的影響[9,10]

將KM小鼠，隨機(jī)分成27組，給藥及測(cè)定方法同“2.3”項(xiàng)。除正常對(duì)照組給予等量生理鹽水外，其余各組小鼠均需灌胃2 g/kg葡萄糖溶液，復(fù)制小鼠高血糖模型，分別在灌胃葡萄糖前0 h，灌胃葡萄糖后0.5 、1 、2 h，小鼠尾靜脈采血，采用血糖儀測(cè)定血糖值。

2.7 對(duì)鹽酸腎上腺素致小鼠高血糖的影響[10-12]

小鼠的分組與給藥同“2.6”項(xiàng)操作，于末次給藥后1 h(禁食不禁水8 h)，除正常對(duì)照組給予等量生理鹽水外，其余各組小鼠均需腹腔注射0.5 mg/kg鹽酸腎上腺素注射液，復(fù)制小鼠急性高血糖模型，分別在腹腔注射鹽酸腎上腺素前0 h與注射后0.5 h。小鼠尾靜脈采血，采用血糖儀測(cè)定血糖值。

2.8 對(duì)血脂的影響[13-15]

將“2.4”項(xiàng)下四氧嘧啶致糖尿病小鼠尾靜脈采血測(cè)定血糖值后，眼眶靜脈叢取血至潔凈EP管，血樣轉(zhuǎn)速以3 000 rpm，離心20 min，用移液槍取血清至潔凈EP管，得血清樣本，嚴(yán)格按照試劑盒要求對(duì)血清的甘油三酯、總膽固醇、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白進(jìn)行測(cè)定。

2.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

3 結(jié)果

3.1 對(duì)正常小鼠血糖的影響

結(jié)果見(jiàn)表1，同正常對(duì)照組比較，三顆針不同制品、提取方法的各劑量給藥組對(duì)正常小鼠空腹血糖值均無(wú)明顯影響(P>0.05)。

3.2 對(duì)四氧嘧啶致糖尿病小鼠血糖的影響

結(jié)果見(jiàn)表2，與正常對(duì)照組比較，各小組血糖值極顯著升高(P<0.01)。給藥28天后，與模型對(duì)照組比較，三顆針生品、酒制品、醋制品水煎液組高劑量組，生品回流組高劑量組，酒制品、醋制品回流組，生品、酒制品、醋制品超聲組高劑量組，生品、酒制品、醋制品回流超聲組均能顯著降低四氧嘧啶引起的血糖升高(P<0.05或P<0.01)。

表1 對(duì)正常小鼠血糖的影響

注：與正常對(duì)照組比較，△P<0.05。

Note:Compared with the normal control group,△P< 0.05.

表2 對(duì)四氧嘧啶致糖尿病小鼠血糖的影響

續(xù)表2(Continued Tab.2)

組別Group劑量Dose(g/kg)血糖值Blood glucose level(mmol/L)給藥前Before dose給藥后After dose 1.216.78±3.47△△15.49±3.10△△醋制品水煎液組Decoction group of vinegar products2.416.77±2.68△△14.67±2.33△△*1.217.99±2.51△△15.10±2.35△△生品回流組Reflux group of raw products2.418.22±3.59△△14.70±2.46△△*1.217.83±3.12△△15.70±1.86△△酒制品回流組Reflux group of wine products2.418.19±2.18△△14.52±1.48△△*1.217.85±2.59△△14.45±2.94△△*醋制品回流組Reflux group of vinegar products2.417.74±3.21△△14.69±3.35△△*1.218.08±2.58△△14.72±2.02△△*生品超聲組Ultrasound group of raw products2.417.17±2.53△△14.69±2.58△△*1.217.04±3.51△△14.98±3.30△△酒制品超聲組Ultrasound group of wine products2.417.69±2.62△△14.57±2.85△△*1.217.86±2.57△△15.10±2.70△△醋制品超聲組Ultrasound group of vinegar products2.418.07±3.51△△14.59±3.00△△*1.218.26±3.49△△14.87±2.28△△生品回流超聲組Reflux-ultrasound group of raw products2.417.30±2.67△△14.02±1.68△△**1.217.06±2.53△△14.15±2.66△△*酒制品回流超聲組Reflux-ultrasound group of wine products2.417.31±3.45△△13.78±2.44△△**1.218.13±3.73△△13.75±2.35△△**醋制品回流超聲組Reflux-ultrasound group of vinegar products2.417.30±2.02△△13.33±1.55△△**1.217.37±2.29△△13.64±2.11△△**

注：與正常對(duì)照組比較，△P<0.05，△△P<0.01；與模型對(duì)照組比較，*P<0.05，**P<0.01。

Note:Compared with the normal control group,△P< 0.05,△△P<0.01;Compared with the model control group,*P<0.05,**P<0.01.

3.3 對(duì)鏈脲佐菌素致糖尿病小鼠血糖的影響

結(jié)果如表3所示，與正常對(duì)照組比較，各組給予鏈脲佐菌素造模后，各組小鼠血糖均極顯著升高(P<0.01)。給藥28天后，與模型對(duì)照組比較，三顆針醋制品水煎液組高劑量組，酒制品回流組高劑量組，醋制品回流組，生品、酒制品、醋制品的超聲組與回流超聲組的小鼠血糖顯著降低(P<0.05或P<0.01)。

表3 對(duì)鏈脲佐菌素致糖尿病小鼠血糖的影響

續(xù)表3(Continued Tab.3)

組別Group劑量Dose(g/kg)血糖值Blood glucose level(mmol/L)給藥前Before dose給藥后After dose 醋制品水煎液組Decoction group of vinegar products2.414.09±2.83△△13.10±1.73△△1.213.78±3.73△△13.08±2.89△△生品回流組Reflux group of raw products2.414.51±2.74△△12.77±1.86△△*1.213.84±2.70△△13.06±2.44△△酒制品回流組Reflux group of wine products2.412.88±3.05△△12.15±2.23△△**1.213.09±2.75△△12.43±1.99△△*生品超聲組Ultrasound group of raw products2.412.93±2.96△△12.56±2.34△△*1.212.63±2.86△△12.26±2.60△△*酒制品超聲組Ultrasound group of wine products2.412.47±2.47△△12.07±2.15△△**1.212.85±2.15△△12.20±1.76△△**醋制品超聲組Ultrasound group of vinegar products2.413.13±2.11△△12.05±1.99△△**1.212.72±2.79△△11.89±2.66△△**生品回流超聲組Reflux-ultrasound group of raw products2.413.31±2.85△△11.87±2.02△△**1.212.48±2.90△△11.57±2.59△△**酒制品回流超聲組Reflux-ultrasound group of wine products2.412.35±2.67△△10.71±2.14△△**1.213.40±2.41△△11.05±1.55△△**醋制品回流超聲組Reflux-ultrasound group of vinegar products2.413.12±3.01△△9.98±1.60△△**1.213.61±3.16△△10.67±2.48△△**

注：與正常對(duì)照組比較，△P<0.05，△△P<0.01；與模型對(duì)照組比較，*P<0.05，**P<0.01。

Note:Compared with the normal control group,△P< 0.05,△△P<0.01;Compared with the model control group,*P<0.05,**P<0.01.

3.4 對(duì)葡萄糖致小鼠高血糖的影響

結(jié)果如表4所示，連續(xù)灌胃28天后，與正常對(duì)照組比較，模型組小鼠灌胃高濃度葡萄糖后血糖值逐漸升高，0.5 h時(shí)模型組血糖達(dá)最高值，其余各組小鼠血糖值極顯著升高(P<0.01)。與模型對(duì)照組比較，灌胃葡萄糖后0.5 h，三顆針醋制品回流組高劑量組，醋制品超聲組中劑量組，生品回流超聲組高劑量組，酒制品、醋制品回流超聲組對(duì)高濃度致小鼠高血糖顯著降低(P<0.05或P<0.01)。1 h后，三顆針生品、酒制品、醋制品水煎液組高劑量組，酒制品、醋制品回流組，酒制品超聲組中劑量，醋制品超聲組，生品、酒制品、醋制品回流超聲組有顯著降血糖作用(P<0.05或P<0.01)。2 h后，酒制品、醋制品回流超聲組高劑量組有顯著降血糖作用(P<0.05)。

表4 對(duì)葡萄糖致小鼠高血糖的影響

續(xù)表4(Continued Tab.4)

組別Group劑量Dose(g/kg)血糖值Blood glucose level(mmol/L)0 h 0.5 h 1 h 2 h 1.23.71±0.9413.79±2.32△△13.48±2.22△△12.84±2.45△△生品回流組Reflux group of raw products2.44.14±0.9813.81±1.95△△13.29±1.94△△12.36±2.27△△1.23.51±0.8413.99±2.55△△13.57±2.59△△12.80±2.06△△酒制品回流組Reflux group of wine products2.43.34±0.9813.37±1.61△△12.95±1.65△△*12.07±1.56△△1.23.89±1.1713.51±1.30△△12.57±2.28△△*12.43±1.98△△醋制品回流組Reflux group of vinegar products2.43.49±0.7513.14±2.39△△*12.85±1.53△△*11.99±1.63△△1.24.10±0.9813.31±2.23△△13.08±2.37△△*12.32±1.98△△生品超聲組Ultrasound group of raw products2.43.62±1.1213.89±2.39△△13.37±2.03△△13.59±1.77△△1.24.09±1.1113.91±2.38△△13.65±2.04△△13.03±1.67△△酒制品超聲組Ultrasound group of wine products2.44.05±0.7913.44±2.86△△13.10±2.47△△12.49±2.04△△1.23.62±1.1213.53±2.10△△12.92±2.40△△*12.14±1.83△△醋制品超聲組Ultrasound group of vinegar products2.43.97±0.8413.25±2.74△△12.43±2.86△△**11.76±2.57△△1.24.08±0.9413.20±2.29△△*12.68±2.52△△*11.58±2.37△△生品回流超聲組Reflux-ultrasound group of raw products2.44.27±0.6913.06±3.02△△*12.81±3.04△△*11.83±2.25△△1.23.84±0.7513.43±2.26△△12.57±2.44△△*12.17±2.38△△酒制品回流超聲組Reflux-ultrasound group of raw products2.43.51±0.8512.75±3.03△△*12.73±1.82△△*10.97±1.57△△*1.23.71±0.9013.17±2.98△△*12.31±2.14△△**11.49±2.54△△醋制品回流超聲組Reflux-ultrasound group of vinegar products2.44.02±0.9812.20±2.74△△**11.96±2.27△△**10.76±1.65△△*1.23.91±0.8312.44±3.12△△**12.46±1.68△△**11.34±1.84△△

注：與正常對(duì)照組比較，△P<0.05，△△P<0.01；與模型對(duì)照組比較，*P<0.05，**P<0.01。

Note:Compared with the normal control group,△P< 0.05,△△P<0.01;Compared with the model control group,*P<0.05,**P<0.01.

3.5 對(duì)鹽酸腎上腺素致小鼠高血糖的影響

結(jié)果如表5所示，連續(xù)灌胃28天后，與正常對(duì)照組比較，腹腔注射鹽酸腎上腺素0.5 h后各組小鼠血糖值極顯著升高(P<0.01)。與模型對(duì)照組比較，酒制品、醋制品回流組高劑量組，醋制品超聲高劑量組，生品、酒制品、醋制品回流超聲組高劑量組小鼠血糖顯著降低(P<0.05或P<0.01)。

表5 對(duì)鹽酸腎上腺素致小鼠高血糖的影響

續(xù)表5(Continued Tab.5)

組別Group劑量Dose(g/kg)血糖值Blood glucose level(mmol/L)0 h0.5 h 酒制品回流組Reflux group of wine products2.44.52±1.0412.38±1.82△△*1.24.02±1.4112.93±2.47△△醋制品回流組Reflux group of vinegar products2.43.91±1.1311.64±2.07△△**1.23.84±0.9612.69±2.61△△生品超聲組Ultrasound group of raw products2.44.59±0.8413.43±2.39△△1.23.99±0.9414.02±2.07△△酒制品超聲組Ultrasound group of wine products2.45.01±1.1312.86±1.83△△1.23.91±1.1913.65±2.05△△醋制品超聲組Ultrasound group of vinegar products2.43.94±1.1912.16±2.94△△*1.23.89±0.9813.10±3.14△△生品回流超聲組Reflux-ultrasound group of raw products2.44.32±0.9712.01±2.21△△*1.23.90±0.7312.94±2.22△△酒制品回流超聲組Reflux-ultrasound group of wine products2.43.98±0.9711.27±1.85△△**1.24.00±0.9212.83±2.83△△醋制品回流超聲組Reflux-ultrasound group of vine-gar products2.44.02±0.9610.64±1.72△△**1.25.05±1.0612.47±2.05△△

注：與正常對(duì)照組比較，△P<0.05，△△P<0.01；與模型對(duì)照組比較，*P<0.05，**P<0.01。

Note:Compared with the normal control group,△P< 0.05,△△P<0.01;Compared with the model control group,*P<0.05,**P<0.01.

3.6 對(duì)血脂的影響

由表6可見(jiàn)，由四氧嘧啶建立的高血糖，模型對(duì)照組小鼠血清TC、TG、LDLC含量顯著高于正常對(duì)照組(P<0.01)。各制品各提取方法的TC值均顯著低于模型對(duì)照組(P<0.05或P<0.01)。酒制品、醋制品水煎液組、酒制品與醋制品回流組、生品、酒制品超聲組高劑量組，醋制品超聲組，生品、酒制品、醋制品回流超聲組的TG值均顯著低于模型對(duì)照組(P<0.05或P<0.01)。醋制品水煎液組、生品、酒制品回流組高劑量組、醋制品回流組、醋制品超聲組、生品回流超聲組高劑量組，酒制品、醋制品回流超聲組LDLC值均顯著低于模型對(duì)照組(P<0.05或P<0.01)。模型組小鼠血清HDLC值顯著低于正常對(duì)照組(P<0.01)。酒制品、醋制品回流組，生品、酒制品超聲組高劑量組、醋制品超聲組、生品、酒制品、醋制品回流超聲組HDLC顯著高于模型對(duì)照組(P<0.05或P<0.01)。

組別Group劑量Dose(g/kg)TC (mmol/L) TG (mmol/L) HDLC (mmol/L) LDLC (mmol/L) 正常對(duì)照組Normal control group-4.17±0.78**1.46±0.38**2.81±0.83**1.90±0.72**模型對(duì)照組Model group-6.58±1.033.22±0.661.71±0.543.49±1.05二甲雙胍組Metformin group0.44.34±0.57**2.04±0.50**2.70±0.57**2.04±0.77**生品水煎液組Decoction group of raw products2.45.35±0.66**2.91±0.442.08±0.562.85±1.131.26.08±0.902.84±0.741.84±0.712.96±1.08酒制品水煎液組Decoction group of alcoholic products2.45.12±0.52**2.72±0.34*2.18±0.432.76±1.071.25.96±0.692.93±0.452.03±0.462.69±1.21醋制品水煎液組Decoction group of vinegar products2.45.09±0.88**2.75±0.57*2.13±0.422.43±1.17*1.25.96±0.892.81±0.482.09±0.642.60±0.91

續(xù)表6(Continued Tab.6)

組別Group劑量Dose(g/kg)TC (mmol/L) TG (mmol/L) HDLC (mmol/L) LDLC (mmol/L) 生品回流組Reflux group of raw products2.45.13±1.28**2.79±0.542.21±0.622.49±1.11*1.25.40±0.66**2.84±0.412.11±0.542.70±1.33酒制品回流組Reflux group of wine products2.44.97±0.75**2.64±0.41*2.41±0.48*2.49±1.21*1.25.26±0.64**2.76±0.332.27±0.50*2.67±1.02醋制品回流組Reflux group of vinegar products2.45.03±0.80**2.53±0.71**2.44±0.67**2.38±1.12*1.25.12±0.60**2.60±0.37**2.30±0.42*2.54±1.00*生品超聲組Ultrasound group of raw products2.45.21±0.59**2.72±0.64*2.29±0.58*2.55±1.011.25.32±0.46**2.81±0.712.12±0.562.67±1.07酒制品超聲組Ultrasound group of wine products2.45.04±0.72**2.60±0.59**2.33±0.64*2.60±1.201.25.25±0.57**2.78±0.452.21±0.812.67±1.21醋制品超聲組Ultrasound group of vinegar products2.45.09±1.04**2.54±0.48**2.36±0.65*2.46±1.17*1.25.13±0.87**2.70±0.46*2.26±0.77*2.61±1.03生品回流超聲組Reflux-ultrasound group of raw products2.44.97±0.85**2.59±0.52**2.41±0.69*2.37±1.17*1.25.25±0.81**2.71±0.52*2.31±0.46*2.60±0.95酒制品回流超聲組Reflux-ultrasound group of wine products2.44.67±0.98**2.45±0.37**2.51±0.66*2.31±1.04*1.25.03±0.54**2.55±0.51**2.40±0.62*2.45±0.93*醋制品回流超聲組Reflux-ultrasound group of vinegar products2.44.44±0.80**2.26±0.54**2.62±0.74**2.20±0.99**1.24.86±0.68** 2.41±0.53**2.47±0.57**2.34±1.08*

注：與模型對(duì)照組比較，*P<0.05，**P<0.01。

Note:Compared with the model control group,*P<0.05,**P<0.01.

4 結(jié)論

糖尿病已成為危害人類(lèi)健康的疾病之一，四氧嘧啶、鏈脲佐菌素可影響胰島素分泌，導(dǎo)致高血糖，本實(shí)驗(yàn)選取兩者建立糖尿病動(dòng)物模型造模用藥。腎上腺素通過(guò)受體激動(dòng)作用，使血糖升高造成急性高血糖。為深入研究三顆針降血糖、血脂活性，本實(shí)驗(yàn)采取三顆針常用炮制方法與生物堿常用提取方法，比較不同炮制、提取方法對(duì)血糖血脂的影響。本實(shí)驗(yàn)研究表明三顆針不同炮制、提取方法具備一定降血糖和調(diào)節(jié)血脂代謝作用，且不同炮制提取方法存在一定差異。

對(duì)四氧嘧啶致糖尿病小鼠血糖的影響，各制品的回流超聲組與生品水煎液組中劑量組比較存在顯著差異(P<0.05)。

對(duì)鏈脲佐菌素致糖尿病小鼠血糖的影響，醋制品超聲組中劑量組，生品、酒制品、醋制品回流超聲組與生品水煎液組存在顯著差異(P<0.05)；酒制品、醋制品回流超聲組與酒制品水煎液組高劑量組存在顯著差異(P<0.05)；酒制品回流超聲組高劑量組，醋制品回流超聲組與醋制品水煎液高劑量組存在明顯差異(P<0.05)；醋制品超聲組中劑量組，生品、酒制品、醋制品回流超聲組與醋制品水煎液組中劑量組存在明顯差異(P<0.05)；醋制品回流超聲組高劑量組與醋制品回流組、生品超聲組、酒制品超聲組、醋制品超聲組高劑量組存在明顯差異(P<0.05)。

給予高濃度葡萄糖2 h后酒制品、醋制品回流超聲組高劑量組與生品、酒制品水煎液組；酒制品、醋制品回流超聲組高劑量組與生品超聲組存在顯著差異(P<0.05)。

腹腔注射鹽酸腎上腺素0.5 h后，醋制回流超聲組高劑量組與生品、酒制品各提取方法高劑量組存在顯著差異(P<0.05)。

醋制品回流超聲組高劑量組與生品水煎液組、超聲組血清中TC值存在顯著差異；醋制品回流超聲組高劑量組與生品、酒制品水煎液組、生品回流、超聲組TG值存在顯著差異(P<0.05)；醋制品回流超聲組高劑量組與生品水煎液組HDLC存在顯著差異(P<0.05)。

本課題開(kāi)展不同提取方法與炮制方法對(duì)三顆針降血糖、降血脂的影響研究，同一種提取方法，炮制后比炮制前降血糖、血脂效果好，表明炮制后達(dá)到增效目的，符合中藥炮制目的。同一種制品采用回流超聲提取法的降血糖效果優(yōu)于其他提取方法，推測(cè)可能回流與超聲結(jié)合提取，更利于活性成分溶出。不同炮制與提取方法對(duì)活性成分如小檗堿含量的影響是下一步研究方向。本文為三顆針資源合理利用，為三顆針炮制加工研究提供一定依據(jù)。