孫昌飛 祭仲石 韋 艷 厲成新 王中清

黃顙魚(yú)(Pseudobagrus fulvidraco)，屬硬骨魚(yú)綱（Osteichthyes）、鲇形目（Siluriformes）、鲿科（Bagridae）、黃顙魚(yú)屬（Pelteobagrus），廣泛分布于我國(guó)分布長(zhǎng)江、黃河、珠江和黑龍江等流域。黃顙魚(yú)肉質(zhì)細(xì)嫩，無(wú)肌間刺，味道鮮美，是消費(fèi)者較青睞的淡水魚(yú)之一。隨著市場(chǎng)需求的不斷擴(kuò)大，黃顙魚(yú)在江浙地區(qū)的養(yǎng)殖區(qū)域不多擴(kuò)大，黃顙魚(yú)病害也逐漸再增加，大大制約了黃顙魚(yú)養(yǎng)殖的健康發(fā)展。由擬態(tài)弧菌引起的黃顙魚(yú)爛身病，病魚(yú)溜邊，表皮有規(guī)則性潰爛，嚴(yán)重時(shí)全身皮膚潰瘍，肌肉也發(fā)生嚴(yán)重潰爛，病魚(yú)攝食量減少，是一種高致死性病害，該病不易發(fā)覺(jué)，發(fā)病時(shí)間長(zhǎng)，難以治療，是黃顙魚(yú)養(yǎng)殖中常見(jiàn)的病害之一，給江浙地區(qū)黃顙魚(yú)養(yǎng)殖造成重大損失。

2019年6月初，江蘇大豐某黃顙魚(yú)養(yǎng)殖塘暴發(fā)爛身病，通過(guò)取樣分離病原菌，并對(duì)分離的病原菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，根據(jù)藥敏結(jié)果指導(dǎo)養(yǎng)殖戶(hù)進(jìn)行合理用藥，取得良好的治療效果。通過(guò)本文，以期為當(dāng)?shù)攸S顙魚(yú)養(yǎng)殖過(guò)程中爛身病的防治提供一定的參考。

1 材料與方法

1.1 材料

發(fā)病黃顙魚(yú)于2018年8月取自大豐某黃顙魚(yú)養(yǎng)殖場(chǎng)，發(fā)病魚(yú)80g左右。實(shí)驗(yàn)用藥敏紙片采購(gòu)自杭州微生物試劑有限公司；微生物培養(yǎng)基為腦心浸液培養(yǎng)基（BHI），pH7.4±0.2，采購(gòu)自O(shè)XOID。

1.2 致病菌的分離

在超凈工作臺(tái)中，從患病魚(yú)肝、腎等組織處取樣，用滅菌后的接種環(huán)分別在培養(yǎng)基平皿的邊緣的四個(gè)點(diǎn)涂菌，以每個(gè)點(diǎn)開(kāi)始劃線(xiàn)至培養(yǎng)基平皿中的1/2。然后，再以到第二點(diǎn)劃線(xiàn)至培養(yǎng)基平皿中的1/2，依次劃線(xiàn)，直至將致病菌均勻密布于培養(yǎng)基平皿中。30℃培養(yǎng)24小時(shí)。挑選優(yōu)勢(shì)菌落接種于斜面培養(yǎng)基，30℃培養(yǎng)24 小時(shí)，4℃冰箱保存?zhèn)溆谩男泵媾囵B(yǎng)基上挑取菌落，接種到BHI液體培養(yǎng)基中，30℃培養(yǎng)24小時(shí)。

1.3 藥敏試驗(yàn)

采用紙片瓊脂擴(kuò)散法（K-B法），在超凈工作臺(tái)中，將分離到的致病菌用生理鹽水制備成濃度約107～108cfu/mL細(xì)菌懸濁液，然后取100uL涂布于BHI平板，等待15分鐘，將不同的藥敏紙片均勻的貼在BHI平板上，30℃培養(yǎng)24 小時(shí)后，觀(guān)察結(jié)果，量取抑菌圈直徑，確定致病菌對(duì)各藥物的敏感性。

2 結(jié)果

2.1 黃顙魚(yú)爛身病發(fā)病情況

發(fā)病塘口位于江蘇大豐某黃顙魚(yú)養(yǎng)殖場(chǎng)，塘口面積15畝，南北朝向，四周土坡，水深1.5～2m，有完善的進(jìn)排水配套設(shè)施。2019年6月8日開(kāi)始，發(fā)現(xiàn)每天有幾尾死魚(yú)，死魚(yú)體表有明顯方形潰爛病灶，解剖后發(fā)現(xiàn)腹腔內(nèi)有點(diǎn)狀出血點(diǎn)，內(nèi)臟出血，肝臟腫大，腹腔中有少量腹水。幾天后，死亡量暴發(fā)性增加，突增至每天幾百尾。

2.2 致病菌的藥敏分析

分離出致病菌后，使用水產(chǎn)上常用的恩諾沙星、氟苯尼考、強(qiáng)力霉素、硫酸新霉素、氨芐青霉素、紅霉素、復(fù)方新諾明和復(fù)方磺胺嘧啶等8種抗生素對(duì)分離的致病菌進(jìn)行藥敏實(shí)驗(yàn)，藥敏實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1，結(jié)果表明，黃顙魚(yú)體內(nèi)分離的擬態(tài)弧菌對(duì)恩諾沙星、氟苯尼考最為敏感，對(duì)復(fù)方新諾明和氨芐青霉素等耐藥。

表1 各抗生素藥敏結(jié)果

3 討論

近年來(lái)，隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖的規(guī)模越來(lái)越大，養(yǎng)殖密度越來(lái)越高，細(xì)菌性疾病暴發(fā)越來(lái)越頻繁，每年給水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)造成重大經(jīng)濟(jì)損失。同時(shí)我國(guó)的水產(chǎn)養(yǎng)殖戶(hù)及相關(guān)技術(shù)人員缺乏科學(xué)的用藥理念，還是按照傳統(tǒng)經(jīng)驗(yàn)進(jìn)行治療魚(yú)類(lèi)的細(xì)菌性疾病，有時(shí)病急亂投醫(yī)，還有不少養(yǎng)殖戶(hù)在使用抗生素進(jìn)行細(xì)菌性疾病的預(yù)防，導(dǎo)致各類(lèi)致病菌產(chǎn)生耐藥性。黃顙魚(yú)爛身是危害黃顙魚(yú)養(yǎng)殖的主要病害之一，該病由擬態(tài)弧菌引起，由于黃顙魚(yú)是底層魚(yú)類(lèi)，感染初期黃顙魚(yú)躲藏于水底，養(yǎng)殖戶(hù)較難發(fā)現(xiàn)，當(dāng)死魚(yú)浮出水面時(shí)，池塘中黃顙魚(yú)的病情已經(jīng)相對(duì)較重，病魚(yú)攝食量減少，病魚(yú)難以攝入藥物進(jìn)行治療。

目前，治療細(xì)菌性疾病，主要還是通過(guò)投喂抗生素，但如何選擇正確的抗生素成為治療成敗的關(guān)鍵因素，而隨著多年的抗生素使用，擬態(tài)弧菌已經(jīng)對(duì)多種抗生素產(chǎn)生耐藥性。藥敏結(jié)果顯示，該地區(qū)分離的擬態(tài)弧菌對(duì)氨芐青霉素和復(fù)方新諾明有很強(qiáng)的耐藥性，對(duì)紅霉素、強(qiáng)力霉素和硫酸新霉素等也有一定的耐藥性。本文結(jié)果表明，擬態(tài)弧菌已對(duì)多種抗生素產(chǎn)生不同程度的耐藥性，這是多年來(lái)水產(chǎn)養(yǎng)殖中抗生素亂用濫用造成的。

水產(chǎn)養(yǎng)殖戶(hù)在治療細(xì)菌性疾病時(shí)，應(yīng)當(dāng)科學(xué)地選擇抗生素，通過(guò)藥敏實(shí)驗(yàn)，選擇致病菌最為敏感藥物進(jìn)行治療，避免盲目用藥導(dǎo)致疾病無(wú)法有效控制。藥敏實(shí)驗(yàn)后，我們建議發(fā)病塘口選擇恩諾沙星作為治療藥物，同時(shí)配合復(fù)合碘進(jìn)行池塘消毒，隔天使用一次。拌服恩諾沙星后，病情得到有效控制，從每天死亡幾百尾逐漸降低到幾尾，8天后該塘口黃顙魚(yú)停止死亡，繼續(xù)拌服恩諾沙星2天進(jìn)行鞏固治療。在發(fā)生細(xì)菌性疾病時(shí)，不能盲目地使用抗生素，要尊重科學(xué)，用科學(xué)的理念指導(dǎo)養(yǎng)殖用藥，真正做到科學(xué)用藥，減緩致病菌耐藥性的產(chǎn)生。