王茜 王亞芬 張一昕 石鋮 郭秋紅 韓雪 郝蕾

摘要：目的? 觀察解毒護(hù)肝方對藥物性肝損傷大鼠TLR3/TNF-α/JNK2信號通路的影響。方法? 采用對乙酰氨基酚灌胃制作大鼠肝損傷模型。將實(shí)驗(yàn)大鼠按體質(zhì)量隨機(jī)分為正常組、模型組、陽性對照組和解毒護(hù)肝方高、中、低劑量組，各給藥組給予相應(yīng)藥液灌胃，正常組和模型組給予生理鹽水灌胃。生化分析儀檢測血清AST、ALT活性和總膽紅素（TBIL）、直接膽紅素（DBIL）含量;RT-PCR和Western blot分別檢測肝組織JNK2基因和蛋白的表達(dá);酶標(biāo)儀檢測肝組織勻漿腫瘤壞死因子-α（TNF-α）和白細(xì)胞介素-6（IL-6）含量;免疫組化染色觀察Toll樣受體3（TLR3）蛋白表達(dá)。結(jié)果? 與正常組比較，模型組大鼠ALT、AST、DBIL、TNF-α水平顯著升高（P<0.01），JNK2 mRNA和p-JNK2、TLR3蛋白表達(dá)顯著升高（P<0.01）;與模型組比較，解毒護(hù)肝方中、低劑量組大鼠AST、ALT活性顯著降低（P<0.05，P<0.01），解毒護(hù)肝方低劑量組大鼠DBIL含量顯著降低（P<0.05），解毒護(hù)肝方高劑量組大鼠TNF-α含量顯著降低（P<0.01），解毒護(hù)肝方高、中劑量組大鼠JNK mRNA和TLR3蛋白表達(dá)均顯著下調(diào)（P<0.05，P<0.01），p-JNK2蛋白表達(dá)有降低趨勢，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論? 解毒護(hù)肝方對藥物性肝損傷大鼠有明顯的保護(hù)作用，以中、低劑量組效果最為明顯，其機(jī)制可能與調(diào)控TLR3/TNF-α/JNK2信號通路有關(guān)。

關(guān)鍵詞：解毒護(hù)肝方;對乙酰氨基酚;藥物性肝損傷;JNK2;大鼠

中圖分類號：R285.5??? 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A??? 文章編號：1005-5304（2019）08-0060-06

DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2019.08.013????? 開放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識碼（OSID）：

Abstract： Objective To observe the effects of Jiedu Hugan Prescription on TLR3/TNF-α/JNK2 signaling pathway of acetaminophen-induced hepatotoxicity rats. Methods Hepatotoxicity rat model was prepared by intragastric administration of acetaminophen. The rats were randomly divided into normal group， model group， positive control group， Jiedu Hugan Prescription high-， medium- and low-dosage groups. Each administration group was given relevant medicine infusions for gavage， normal group and model group were given normal saline for gavage. At the end of the experiment， the levels of AST， ALT， TBIL and DBIL were detected by biomedical analyzer. JNK2 gene and protein expression in liver tissue were detected by RT-PCR and Western blot. The contents of TNF-α and IL-6 in liver tissue homogenate were detected by enzyme microplate reader. The expression of Toll-like receptor 3 （TLR3） protein was observed by immunohistochemistry. Results Compared with the normal group， the levels of ALT， AST， DBIL and TNF-α in the model group significantly increased （P<0.01）， and the expressions of JNK2 mRNA， p-JNK2， and TLR3 protein significantly increased （P<0.01）. Compared with the model group， the activities of AST and ALT in Jiedu Hugan Prescription medium- and low-dosage groups significantly decreased （P<0.05， P<0.01）; the content of DBIL level in Jiedu Hugan Prescription low-dosage group significantly decreased （P<0.05）; the content of TNF-α in Jiedu Hugan Prescription high-dosage group significantly decreased （P<0.01）. The expressions of JNK mRNA and TLR3 protein in Jiedu Hugan Prescription high- and medium-dosage groups were significantly down-regulated （P<0.05， P<0.01）， and the expression of p-JNK2 protein decreased， without statistical significance （P>0.05）. Conclusion Jiedu Hugan Prescription has obvious protective effects on rats with drug-induced hepatotoxicity， and the effects are most obvious in the medium- and low-dosage groups. The mechanism may be related to the regulation of TLR3/TNF-α/JNK2 signaling pathway.

Keywords： Jiedu Hugan Prescription; acetaminophen; drug-induced hepatotoxicity; JNK2; rats

臨床上，對乙酰氨基酚（APAP）是應(yīng)用廣泛的解熱鎮(zhèn)痛藥，但其大劑量服用或聯(lián)合使用則會誘發(fā)藥物性肝損傷，嚴(yán)重者可導(dǎo)致肝衰竭甚至死亡。據(jù)美國食品藥品監(jiān)督管理局統(tǒng)計(jì)，過量服用含APAP的藥品是導(dǎo)致患者肝衰竭最主要的因素[1]。JNK2為c-Jun氨基末端激酶（JNK）的亞型之一，幾乎在所有的細(xì)胞中均有表達(dá)。研究表明，JNK2基因敲除對腫瘤壞死因子（TNF）介導(dǎo)的肝細(xì)胞損傷具有保護(hù)作用，從而推測JNK2在APAP誘導(dǎo)的肝損傷中發(fā)揮重要作用[2-4]。中醫(yī)學(xué)根據(jù)藥物性肝損傷的臨床特點(diǎn)，將其歸屬于“黃疸”“積聚”等范疇，而肝失疏泄、氣滯血瘀、脾失健運(yùn)、濕濁內(nèi)生為其主要的發(fā)病機(jī)制，疏肝健脾、活血祛瘀、解毒除濕為其有效治法?；谏鲜稣J(rèn)識，本課題組自擬解毒護(hù)肝方，該方由逍遙丸、茵陳蒿湯、小柴胡湯三方加減化裁而成，具有疏肝健脾、除濕解毒、活血祛瘀功效，臨床用于防治藥物性肝損傷具有一定的療效。為進(jìn)一步探討其作用機(jī)制，本實(shí)驗(yàn)采用APAP灌胃制作大鼠肝損傷模型，觀察解毒護(hù)肝方對模型大鼠TLR3/TNF-α/JNK2信號通路的影響。

1? 材料與方法

1.1? 動物

清潔級Wistar大鼠70只，雌雄各半，體質(zhì)量180～220 g，北京維通利華生物技術(shù)有限公司提供，動物質(zhì)量合格證號11400700181914，動物生產(chǎn)許可證號SCXK（京）2012-0001。飼養(yǎng)于河北省中藥配方顆粒工程技術(shù)研究中心動物室（萬級潔凈屏障系統(tǒng)），溫度（23±2）℃，相對濕度60%～70%，12 h明暗交替，自由攝食飲水。

1.2? 藥物

解毒護(hù)肝方（柴胡10 g，醋香附15 g，白術(shù)10 g，炒白芍15 g，五味子10 g，黃芪15 g，茵陳15 g，黃芩10 g，丹參15 g，楮實(shí)子10 g，田基黃15 g，甘草10 g），飲片均為免煎顆粒，四川新綠色藥業(yè)科技發(fā)展有限公司。水飛薊賓膠囊（每粒含水飛薊賓35 mg，批號750709172），天津天士力圣特制藥有限公司;對乙酰氨基酚片（每片含APAP 0.5 g，批號016171002），石藥集團(tuán)歐意藥業(yè)有限公司。

1.3? 主要試劑與儀器

AST測定試劑盒（批號AUZ3645）、ALT測定試劑盒（批號AUZ3689），貝克曼庫爾特實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)有限公司;總膽紅素（TBIL）試劑盒（批號A005）、直接膽紅素（DBIL）試劑盒（批號A006），長春匯力生物技術(shù)有限公司;TNF-α（批號T15030357）、白細(xì)胞介素-6（IL-6，批號S01030358），武漢華美生物工程有限公司;Trizol（批號139603），Invitrogen公司;TIANScript cDNA第一鏈合成試劑盒（批號P5011）、SuperReal PreMix Plus（SYBR Green，批號Q5922），天根生化科技（北京）有限公司;JNK2兔多抗、p-JNK2（Tyr185）兔單抗，Cell Signaling Technology公司;β-actin小鼠單抗、辣根酶標(biāo)記山羊抗兔IgG（H+L）、Peroxidase-Conjugated Goat anti-Rabbit IgG（H+L）、辣根酶標(biāo)記山羊抗小鼠IgG（H+L）、Peroxidase-Conjugated Goat anti-Mouse IgG（H+L）、TLR3兔多抗（批號00009333）、二抗（Goat，批號K186817A），DAB（批號K186916P），北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。Humalyzer2000半自動生化儀（德國豪邁），DP73數(shù)碼顯微鏡（日本Olympus），HMIAS-2000顯微圖像分析系統(tǒng)（武漢同濟(jì)醫(yī)科大學(xué)），酶標(biāo)儀（BioTek，ELx800），熒光定量PCR儀ABI7500（Applied Biosystems），電泳儀（北京百晶生物技術(shù)有限公司），生物分光光度計(jì)（Eppendorf），電泳槽（美國BioRad），轉(zhuǎn)移脫色搖床（海門其林貝爾儀器制造公司），Tanon Gis電泳圖像分析系統(tǒng)（Tanon1600），Quantity one分析軟件（Bio Rad Technical Service Department）。

1.4? 造模、分組和給藥

大鼠每日灌胃APAP 1200 mg/kg藥液（40 ℃生理鹽水配制）1次，連續(xù)30 d，制作大鼠肝損傷模型[5-6]。將成模大鼠按體質(zhì)量隨機(jī)分為模型組、陽性對照組和解毒護(hù)肝方高、中、低劑量組，每組12只，另取10只大鼠為正常組，雌雄各半。解毒護(hù)肝方高、中、低劑量組分別給予63、31.5、15.75 g原藥材/kg藥液灌胃，陽性對照組給予水飛薊賓（44 mg/kg）藥液灌胃，正常組和模型組給予等體積生理鹽水灌胃。給藥體積均為1 mL/100 g，每日1次，連續(xù)30 d。實(shí)驗(yàn)期間每7 d稱重1次，自由攝食飲水。

1.5? 標(biāo)本制備

實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，大鼠3.5%水合氯醛（1 mL/100 g）腹腔注射麻醉，腹主動脈取血，全血分別置于清潔試管中，4000 r/min離心10 min，分離血清，分裝置于-80 ℃冰箱保存，待檢相關(guān)肝功能指標(biāo)。取血后迅速取固定部位肝組織3份，1份置于4%多聚甲醛液中固定，用于肝組織病理形態(tài)觀察，另2份置于凍存管，液氮凍存，-80 ℃冰箱保存，用于JNK2基因和蛋白的表達(dá)、肝勻漿上清液TNF-α和IL-6含量的測定。

1.6? 指標(biāo)檢測

1.6.1? 一般觀察

給藥后觀察大鼠精神狀態(tài)、行為活動、飲食情況、二便情況和皮膚毛色。

1.6.2? 生化指標(biāo)檢測

應(yīng)用半自動生化分析儀檢測血清AST、ALT、TBIL、DBIL含量;應(yīng)用酶標(biāo)儀檢測肝勻漿TNF-α和IL-6的含量。上述操作均按試劑盒說明書進(jìn)行。

1.6.3? 病理形態(tài)觀察

取4%多聚甲醛溶液固定肝組織，常規(guī)脫水、包埋、切片、HE染色，鏡下觀察。

1.6.4? RT-PCR檢測肝組織JNK2基因的表達(dá)

用Trizol提取組織樣本中總RNA。取5 μL RNA，1%瓊脂糖凝膠電泳，以檢測RNA的完整性。引物序列由Primer5.0軟件設(shè)計(jì)。β-actin上游引物5'-CCT CCTGAACTTGAGGCAGTTTA-3'，下游引物5'-CTCT GGGGCTGTCAGTCTTG-3';JNK2上游引物5'-GACA GTAAAAGCGATGGC-3'，下游引物5'-TTGGTTCTG AAAAGGACG-3'。擴(kuò)增片段均為638 bp。用TIANScript RT KIT進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄，實(shí)驗(yàn)操作按產(chǎn)品說明書進(jìn)行。用熒光定量PCR儀，采用2-ΔΔCt法進(jìn)行數(shù)據(jù)相對定量分析，ΔΔCt=（待測組目的基因平均Ct值-待測組內(nèi)參基因平均Ct值）÷（對照組目的基因平均Ct值-對照組內(nèi)參基因平均Ct值）。

1.6.5? Western blot檢測肝組織JNK2蛋白的表達(dá)

取約100 mg組織加液氮研磨成粉末，加入1 mL裂解液（裂解液中含有臨時(shí)加入的10 μL蛋白酶抑制劑混合物），研磨，直至成為液體，轉(zhuǎn)至EP管，冰上靜置10 min，4 ℃、12 000 r/min離心10 min。根據(jù)蛋白定量結(jié)果，加入相應(yīng)體積總蛋白樣品與5×蛋白質(zhì)凝膠電泳上樣緩沖液，混合，95 ℃變性10 min，將樣品加至凝膠孔中，進(jìn)行凝膠電泳。凝膠電泳結(jié)束后，將凝膠上分離到的蛋白條帶轉(zhuǎn)印至PVDF膜，然后分別用非標(biāo)記一抗及辣根過氧化物酶標(biāo)記的二抗對其進(jìn)行孵育、檢測。取上清液，加入等體積2×SDS上樣緩沖液，100 ℃中煮沸5 min。進(jìn)行聚丙烯酰胺凝膠電泳，每孔上樣等量總蛋白。利用水浴式電印跡法將蛋白轉(zhuǎn)移至膜上。室溫振蕩封閉膜1 h，將一抗用封閉液稀釋1000倍;將封閉后的膜直接放入一抗工作液中，4 ℃反應(yīng)過夜，將反應(yīng)膜放入平皿中，用1×TBST洗滌3次，每次10 min，洗凈未結(jié)合的一抗。將二抗用1×TBST稀釋3000倍;將洗滌后的一抗反應(yīng)膜放入二抗工作液中（室溫、避光緩慢搖動）作用60 min。用1×TBST洗滌3次，每次10 min，洗去游離二抗。按1∶1（V/V）混合ECL試劑盒中2種液體，再將混合液均勻鋪在PVDF膜表面，室溫作用4 min。抖掉膜上液體，將其放入鋪有保鮮膜的曝光盒，曝光并洗片，最后采用Tanon1600對膠片進(jìn)行掃描，用Tanon Gis軟件分析，系統(tǒng)自動生成灰度值。

1.6.6? 免疫組化檢測肝組織Toll樣受體3蛋白的表達(dá)

采用免疫組化方法觀察，每組取6只大鼠，每例測5個(gè)視野。由計(jì)算機(jī)算出所測陽性反應(yīng)物相對含量的積分光密度（IOD）和平均光密度（MOD）。

1.7? 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS13.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以—x±s表示，采用方差分析，方差齊用LSD法檢驗(yàn)，方差不齊用DunnettT3檢驗(yàn)。P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2? 結(jié)果

2.1? 一般狀況

正常組大鼠毛發(fā)滑順、有光澤，精神狀態(tài)良好，行動靈活，二便正常;模型組大鼠體質(zhì)量減輕，毛發(fā)無光澤，精神狀態(tài)欠佳，喜臥;各給藥組大鼠毛發(fā)光澤度、精神狀態(tài)、體質(zhì)量及行動靈活性均有改善。

2.2? 解毒護(hù)肝方對模型大鼠血清肝功能指標(biāo)的影響

與正常組比較，模型組大鼠ALT、AST、DBIL水平顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）;與模型組比較，陽性對照組和解毒護(hù)肝方中、低劑量組大鼠ALT、AST活性顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05，P<0.01），解毒護(hù)肝方低劑量組大鼠DBIL含量顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;與解毒護(hù)肝方高劑量組比較，解毒護(hù)肝方中劑量組大鼠ALT、AST活性顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05，P<0.01）。結(jié)果見表1。

2.3? 解毒護(hù)肝方對模型大鼠肝組織病理形態(tài)的影響

正常組大鼠肝細(xì)胞排列整齊，圍繞中央靜脈放射狀排列，細(xì)胞核形態(tài)正常，胞漿均勻，無變性及壞死;模型組大鼠肝細(xì)胞排列紊亂，細(xì)胞呈現(xiàn)廣泛水腫變性，散在少量點(diǎn)狀壞死;解毒護(hù)肝方高、中、低劑量組較模型組大鼠細(xì)胞結(jié)構(gòu)紊亂有不同程度的改善，局部細(xì)胞水腫變性，未觀察到點(diǎn)狀壞死，以中、低劑量組改善尤為明顯。結(jié)果見圖1。

2.4? 解毒護(hù)肝方對模型大鼠肝組織腫瘤壞死因子-α、白細(xì)胞介素-6含量的影響

與正常組比較，模型組大鼠肝組織TNF-α含量顯著升高（P<0.01）;與模型組比較，陽性對照組和解毒護(hù)肝方高劑量組大鼠肝組織TNF-α含量顯著降低（P<0.05，P<0.01）;各給藥組大鼠肝組織IL-6含量差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)果見表2。

2.5? 解毒護(hù)肝方對模型大鼠肝組織JNK2基因和蛋白表達(dá)的影響

與正常組比較，模型組大鼠肝組織JNK2 mRNA和p-JNK2蛋白表達(dá)顯著升高（P<0.01）;與模型組比較，解毒護(hù)肝方各劑量組大鼠肝組織JNK2 mRNA表達(dá)顯著降低（P<0.01），p-JNK2蛋白表達(dá)有降低趨勢，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;與陽性對照組比較，解毒護(hù)肝方中、低劑量組大鼠肝組織JNK2 mRNA和p-JNK2蛋白表達(dá)顯著降低（P<0.05，P<0.01）。結(jié)果見表3、圖2。

2.6? 解毒護(hù)肝方對模型大鼠肝組織Toll樣受體3蛋白表達(dá)的影響

與正常組比較，模型組大鼠肝組織TLR3蛋白IOD、MOD值均顯著升高（P<0.01）;與模型組比較，陽性對照組和解毒護(hù)肝方高、中劑量組大鼠肝組織TLR3蛋白IOD、MOD值均顯著降低（P<0.01）;與解毒護(hù)肝方低劑量組比較，陽性對照組和解毒護(hù)肝方高、中劑量組大鼠肝組織TLR3蛋白IOD、MOD值均顯著降低（P<0.05，P<0.01）。結(jié)果見表4、圖3。

3? 討論

臨床上常用ALT和AST作為反映肝細(xì)胞損傷程度的生化指標(biāo)。正常情況下，二者在血清中含量很低，但當(dāng)肝細(xì)胞受到損傷時(shí)，細(xì)胞發(fā)生變性及壞死，細(xì)胞膜通透性增加或發(fā)生崩解，ALT、AST釋放入血，血中ALT、AST活性升高。

DBIL能溶于水，可通過腎臟隨尿液排出體外。在發(fā)生廣泛的肝損傷或直接抑制膽汁轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白時(shí)會使TBIL含量升高。當(dāng)發(fā)生紅細(xì)胞破壞過多或肝細(xì)胞對膽紅素出現(xiàn)轉(zhuǎn)運(yùn)、結(jié)合、排泄缺陷以及膽管阻塞時(shí)，亦可導(dǎo)致膽紅素代謝障礙。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，模型組大鼠肝組織ALT、AST、DBIL水平顯著升高，提示肝損傷模型建立成功;與模型組比較，陽性對照組和解毒護(hù)肝方中、低劑量組均能顯著降低大鼠肝組織ALT、AST活性，解毒護(hù)肝方低劑量組又能顯著降低大鼠肝組織DBIL含量;各給藥組均能不同程度降低大鼠肝組織TBIL含量，但各組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。提示各給藥組對損傷的肝細(xì)胞均有不同程度的改善作用，尤以解毒護(hù)肝方中、低劑量組效果為佳。

有研究顯示，炎癥因子參與了APAP所致肝損傷的發(fā)生、發(fā)展過程。主要由APAP代謝產(chǎn)物N-乙酰-對-苯醌亞胺與肝臟中蛋白酶結(jié)合形成毒性物質(zhì)，刺激肝Kupffer細(xì)胞產(chǎn)生并釋放TNF-α、IL-6等炎癥因子，其中TNF-α主要參與調(diào)控炎癥發(fā)生和細(xì)胞凋亡，被認(rèn)為是炎癥反應(yīng)過程中出現(xiàn)最早的炎癥介質(zhì)[7-8]。而JNK2在TNF-α誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡中及APAP所致的肝損傷中發(fā)揮重要作用[9]。有研究顯示，JNK2基因缺失的肝細(xì)胞比野生細(xì)胞或JNK1基因缺失肝細(xì)胞更耐TNF-α誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡，且對APAP引起的肝損傷表現(xiàn)出部分的保護(hù)作用[10-12]。也有研究發(fā)現(xiàn)，TLR3基因敲除小鼠也能免疫APAP所致的肝損傷，TLR3能增強(qiáng)TNF-α的表達(dá)及磷酸化JNK在APAP傷肝臟中的表達(dá)[13]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，各組大鼠肝組織IL-6水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），模型組大鼠肝組織TNF-α含量、JNK2基因和蛋白表達(dá)及TLR3的表達(dá)顯著升高，解毒護(hù)肝方各劑量組均能不同程度的降低肝組織TNF-α含量，下調(diào)肝組織JNK2基因和蛋白表達(dá)，減少肝組織TLR3的陽性表達(dá)，其中解毒護(hù)肝方高劑量組能顯著降低肝組織TNF-α含量，解毒護(hù)肝方高、中劑量組均能顯著降低TLR3的陽性表達(dá)，解毒護(hù)肝方各劑量組均能顯著降低JNK2的基因表達(dá)，而對p-JNK2蛋白表達(dá)僅有降低趨勢，差異未見統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可能是由于本實(shí)驗(yàn)中APAP所致肝損傷對JNK2的影響尚處在轉(zhuǎn)錄階段，從而未產(chǎn)生明顯蛋白水平的變化，后續(xù)擬增加造模劑量和延長給藥時(shí)間繼續(xù)探討其對JNK2蛋白水平的影響。

綜上，本研究結(jié)果表明，解毒護(hù)肝方各劑量組均有一定的護(hù)肝作用，其機(jī)制主要通過抑制TLR3的表達(dá)，從而抑制促炎因子TNF-α的產(chǎn)生，下調(diào)JNK2基因的表達(dá)來實(shí)現(xiàn)護(hù)肝作用。但實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，解毒護(hù)肝方中、低劑量組能顯著降低血清肝功能指標(biāo)，而解毒護(hù)肝方高劑量組對肝組織TNF-α含量、JNK2基因表達(dá)有很好的調(diào)節(jié)作用，解毒護(hù)肝方高、中劑量組對TLR3的表達(dá)有較好的調(diào)節(jié)作用，結(jié)合肝組織病理形態(tài)學(xué)變化，解毒護(hù)肝方高劑量組肝臟病理變化較中、低劑量組嚴(yán)重。本實(shí)驗(yàn)中解毒護(hù)肝方低劑量為臨床等效劑量，中劑量為等效劑量的2倍，高劑量為等效劑量的4倍，筆者認(rèn)為，基于臨床合理安全用藥的原則，雖然高劑量組對早期炎癥因子和基因水平均有較好的調(diào)節(jié)作用，但由于劑量較大也加重了肝臟的負(fù)擔(dān)，故在中、低劑量也有一定療效的情況下，選擇相對較低的劑量治療疾病更符合臨床安全用藥的需求。

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（收稿日期：2019-01-18）

（修回日期：2019-03-21;編輯：華強(qiáng)）