肝病是目前困擾人們健康的主要問題之一[1]。當(dāng)肝臟疾病進(jìn)展至一定程度時，患者可能有嚴(yán)重的慢加急性肝衰竭(ACLF)。雖然ACLF患者在行肝移植術(shù)后能獲得較好的預(yù)后，但其病死率仍居高不下[2-3]。因此，及時了解ACLF患者的病情并評估其預(yù)后對于ACLF的治療至關(guān)重要。

趨化素(Chemerin)是一種脂肪因子，廣泛參與機(jī)體代謝，與炎性反應(yīng)、肥胖、多囊卵巢綜合征及糖尿病等密切相關(guān)[4]。目前有研究證實(shí)，非酒精性脂肪性肝炎患者的Chemerin表達(dá)水平升高[5]。此外，Chemerin還與非酒精性脂肪性肝病、病毒性肝炎患者的肝壞死程度及肝纖維化程度相關(guān)[6]。中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)可參與多種免疫反應(yīng)，尤其是抗菌反應(yīng)，已被證實(shí)是失代償性肝硬化患者急性腎損傷的生物標(biāo)志物[7]。本研究采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清Chemerin和NGAL的表達(dá)水平，分析兩者與ACLF患者預(yù)后的關(guān)系，以期為ACLF患者的預(yù)后評估提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2015年6月至2018年9月在綿陽市第三人民醫(yī)院就診的118例ACLF患者作為研究對象(設(shè)為ACLF組)。根據(jù)《肝衰竭診治指南(2012年版)》[8]對ACLF進(jìn)行診斷。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)患者臨床表現(xiàn)為黃疸[總膽紅素(TBIL)>85 μmol/L]、凝血功能障礙[國際標(biāo)準(zhǔn)化比值(INR)>1.5]及低蛋白血癥等；(2)近4周內(nèi)出現(xiàn)腹水或并發(fā)肝性腦病。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)合并腫瘤；(2)合并自身免疫性疾病；(3)合并嚴(yán)重細(xì)菌或病毒感染；(4)未簽署知情同意書。ACLF組男性76例，女性42例，年齡35～64歲，平均年齡(49.23±10.26)歲；ACLF的病因包括酒精性肝病18例，乙型病毒性肝炎79例，非酒精性脂肪性肝病16例，丙型病毒性肝炎5例。擇同期健康體檢者58例作為對照組。對照組男性32例，女性26例，年齡32～58歲，平均年齡(48.33±9.40)歲。兩組受試者在性別(χ2=1.399，P=0.237)、年齡(t=0.562，P=0.575)方面的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2 信息收集

收集受試者的性別、年齡、血清Chemerin和NGAL的表達(dá)水平，以及是否合并感染的情況。

1.3 血清指標(biāo)的檢測

采集受試者晨起空腹靜脈血，離心并提取上層清液，保存于低溫環(huán)境中待驗(yàn)。采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測受試者血清Chemerin表達(dá)水平(試劑盒購自美國BioLegend公司，貨號XYEA945Hu)和NGAL表達(dá)水平(試劑盒購自德國BioVendor公司，貨號RD191102200R)。

1.4 隨訪

通過復(fù)診、住院觀察及電話隨訪等方式了解ACLF患者出院后90 d的預(yù)后情況，并記錄其生存時間。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 兩組血清Chemerin和NGAL表達(dá)水平比較

ACLF組血清Chemerin表達(dá)水平低于對照組，血清NGAL表達(dá)水平高于對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)。見表1。

表1 兩組血清Chemerin和NGAL表達(dá)水平比較()

2.2 ACLF生存組和死亡組患者血清Chemerin和NGAL表達(dá)水平比較

118例ACLF患者出院后90 d內(nèi)共有58例(49.15%)死亡(設(shè)為死亡組)，60例(50.85%)存活(設(shè)為生存組)。死亡組血清Chemerin表達(dá)水平低于生存組，血清NGAL表達(dá)水平高于生存組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)。見表2。

表2 兩組患者血清Chemerin和NGAL表達(dá)水平比較()

2.3 血清Chemerin和NGAL評估ACLF患者預(yù)后的效能

單指標(biāo)評估ACLF患者預(yù)后時，Chemerin的評估效能高于NGAL，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=0.982，P=0.326)。Chemerin聯(lián)合NGAL評估ACLF患者預(yù)后的Logistic回歸方程為F=-5.882+0.173Chemerin-4.612NGAL。Chemerin聯(lián)合NGAL評估ACLF患者預(yù)后的效能高于 Chemerin和NGAL單獨(dú)評估的效能(Z=2.838，P=0.005；Z=3.489，P=0.001)。Chemerin和NGAL單獨(dú)評估ACLF患者預(yù)后的效能均低于MELD評分，但差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=0.916，P=0.360；Z=1.864，P=0.062)。Chemerin聯(lián)合NGAL評估ACLF患者預(yù)后的效能高于MELD，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=1.231，P=0.218)。詳見圖1和表3。

表3 Chemerin和NGAL評估ACLF患者預(yù)后的效能比較

注：“—”表示無數(shù)據(jù)

圖1 Chemerin和NGAL評估ACLF患者預(yù)后的ROC曲線

2.4 不同血清Chemerin和NGAL表達(dá)水平的ACLF患者的預(yù)后情況

血清Chemerin≤79.64 ng/mL的ACLF患者的平均生存時間為30.56 d，低于血清Chemerin>79.64 ng/mL者(81.09 d)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=103.102，P<0.001)，詳見圖2A。血清NGAL≤2.23 ng/mL的ACLF患者的平均生存時間為82.72 d，高于血清NGAL>2.23 ng/mL者(35.42 d)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=77.782，P<0.001)，詳見圖2B。

圖2不同血清Chemerin和NGAL表達(dá)水平的ACLF患者的生存曲線A不同血清Chemerin表達(dá)水平的患者B不同血清NGAL表達(dá)水平的患者

2.5 影響ACLF患者預(yù)后的相關(guān)因素

將可能影響ACLF患者預(yù)后的因素如年齡、性別、是否合并感染、血清Chemerin和NGAL表達(dá)水平納入Cox單因素分析，結(jié)果顯示合并感染、血清Chemerin和NGAL的表達(dá)水平可能與ACLF患者的預(yù)后有關(guān)。將合并感染、血清Chemerin和NGAL表達(dá)水平納入Cox多因素分析，結(jié)果顯示合并感染、血清Chemerin≤79.64 ng/mL和血清NGAL>2.23 ng/mL的ACLF患者的預(yù)后較差。詳見表4。

表4 影響ACLF患者預(yù)后的相關(guān)因素分析

注：“—”表示無數(shù)據(jù)

3 討論

肝衰竭是一種常見的臨床急重癥，可導(dǎo)致肝臟合成、排泄、解毒及生物轉(zhuǎn)化等功能障礙，嚴(yán)重危害人們的健康[9-10]。ACLF是肝衰竭的重要類型之一，其病死率較高[11]。影響ACLF患者預(yù)后的相關(guān)因素尚未完全明確，目前國內(nèi)外學(xué)者提出的評估終末期肝病患者預(yù)后的模型如MELD、MELD-Na和iMELD未考慮并發(fā)癥及相關(guān)重要生物標(biāo)志物[12-14]。有研究表明，MELD、MELD-Na和iMELD等6種預(yù)測模型均不能對終末期肝病患者的預(yù)后進(jìn)行準(zhǔn)確預(yù)測[15]。ACLF患者的病情進(jìn)展迅速，常規(guī)臨床治療收效甚微，因此及時評估患者預(yù)后并采取積極有效的治療具有重要意義[16-18]。本研究通過檢測118例ACLF患者血清Chemerin和NGAL的表達(dá)水平，并探究兩者與ACLF患者預(yù)后的關(guān)系，以期為ACLF的預(yù)后評估奠定基礎(chǔ)。

本研究結(jié)果表明，ACLF組血清Chemerin表達(dá)水平低于對照組，而血清NGAL表達(dá)水平高于對照組，提示血清Chemerin和NGAL可能參與ACLF的發(fā)生、發(fā)展。本研究進(jìn)一步比較了ACLF生存組患者和死亡組患者血清Chemerin和NGAL的表達(dá)水平，結(jié)果發(fā)現(xiàn)ACLF生存組患者血清Chemerin表達(dá)水平高于死亡組患者，而血清NGAL表達(dá)水平低于死亡組患者。以上結(jié)果均提示Chemerin和NGAL共同參與了ACLF的發(fā)病和進(jìn)展，且與ACLF患者的預(yù)后密切相關(guān)。本研究結(jié)果表明，單指標(biāo)評估ACLF患者預(yù)后時，Chemerin的評估效能高于NGAL。Chemerin聯(lián)合NGAL評估ACLF患者預(yù)后的效能高于兩者單獨(dú)評估的效能。MELD評分是評價終末期肝病患者預(yù)后的常用指標(biāo)，具有較高的信度和效度。本研究發(fā)現(xiàn)，Chemerin和NGAL診斷ACLF患者預(yù)后的效能均低于MELD評分，但差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Chemerin聯(lián)合NGAL評估ACLF患者預(yù)后的效能高于MELD評分，但差異亦無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。上述結(jié)果表明血清Chemerin和NGAL在ACLF患者預(yù)后評估中具有較高價值。此外，本研究發(fā)現(xiàn)，血清Chemerin≤79.64 ng/mL的ACLF患者平均生存時間短于血清Chemerin>79.64 ng/mL者；血清NGAL≤2.23 ng/mL的ACLF患者平均生存時間長于血清NGAL>2.23 ng/mL者。通過Cox單因素和多因素回歸法分析影響ACLF患者短期預(yù)后的相關(guān)因素，結(jié)果發(fā)現(xiàn)合并感染、血清Chemerin≤79.64 ng/mL和血清NGAL>2.23 ng/mL的ACLF患者預(yù)后不良風(fēng)險(xiǎn)較高。

綜上所述，血清Chemerin和NGAL的表達(dá)水平與ACLF患者的預(yù)后密切相關(guān)。聯(lián)合檢測血清Chemerin和NGAL的表達(dá)水平可輔助評估ACLF患者的預(yù)后。然而，本研究仍存在樣本量偏小、僅為單中心研究等不足。期望今后能夠擴(kuò)大樣本量，并進(jìn)行多中心研究，同時分析血清Chemerin和NGAL的表達(dá)水平與ACLF患者病情嚴(yán)重程度的關(guān)系，以期為ACLF的臨床治療提供更多幫助。