張 衛(wèi)，劉春艷，謝 宇，周 雯，胡欣悅，馬子力，楊 潤，張麗艷*

(1.貴州中醫(yī)藥大學(xué)，貴州 貴陽 550025；2.貴州廣濟堂藥業(yè)有限公司，貴州 貴陽 550014)

天麻為蘭科植物天麻GastrodiaelataBl．的干燥塊莖，是一味常用而較名貴的中藥，味甘，平，無毒，其潤而不燥，主入肝經(jīng)，具有熄風(fēng)止痙、平抑肝陽、祛風(fēng)通絡(luò)等功效，主要用于小兒麻痹、癲癇抽搐、破傷風(fēng)、頭痛眩暈、手足不遂、肢體麻木、風(fēng)濕痹痛等癥[1-2]。主要分布于中國的華中及華南地區(qū)，冬、春季節(jié)采集，冬季莖枯時采挖的名叫“冬麻”，質(zhì)量優(yōu)良；春季發(fā)芽時采挖的為“春麻”，質(zhì)量較差[3]。天麻最早以“赤箭”之名始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，并被列為上品[4]，明代李時珍在《本草綱目》中對歷代書籍中關(guān)于天麻功效的論述作了總結(jié)歸納，并稱天麻是“治風(fēng)之神藥”[5]。

天麻是貴州的特色道地藥材，已被列入中國地理標(biāo)志保護(hù)產(chǎn)品目錄，但是已有的研究均未能解決貴州天麻質(zhì)優(yōu)價不優(yōu)的現(xiàn)狀。現(xiàn)代研究表明天麻不僅僅作為一味中藥，用于神經(jīng)保護(hù)、增強免疫、預(yù)防心血管疾病、抗遺忘以及防止衰老等，也可做成保健藥膳，供人們直接食用，比如天麻豆渣蛋糕[6]、天麻鮮濕面條[7]、天麻酒[8]等，因此，需要對貴州天麻質(zhì)量進(jìn)行全面的研究，明確貴州天麻固有的優(yōu)勢，同時解決天麻原料藥材的選擇和確定問題，以及為從根本上解決“貴天麻”質(zhì)優(yōu)價不優(yōu)的現(xiàn)狀提供研究支撐。本研究采用TLC法、水分測定法、浸出物測定法、二氧化硫測定法對收集的貴州天麻進(jìn)行多方面的綜合質(zhì)量評價，包括水分、浸出物、二氧化硫殘留量等，明確貴州天麻的品質(zhì)優(yōu)劣，為貴州天麻的開發(fā)利用提供有力依據(jù)。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

04-010型超聲波清洗儀(昆明市超聲儀器有限公司)，40-061型電子天平(梅特勒-托利多儀器有限公司)，DK-99-ⅡA型水浴鍋(天津市泰斯特儀器有限公司)，微孔濾膜，色譜柱(Agilent ZORBAX SB-Aq C18柱(5 μm，4.6 mm×250 mm))，硅膠G板(自制)。

1.2 試劑

天麻素對照品(批號：110807-201608，)、對羥基苯甲醇對照品(批號：111970-201501)由中國食品藥品檢定研究院提供，乙腈為色譜純，水為娃哈哈純凈水，其余均為分析純。

1.3 藥材

15批樣品分別為貴州大方(12批)、貴州德江(3批)，天麻藥材均為自采集，以上所有樣品經(jīng)貴州中醫(yī)藥大學(xué)植物栽培教研室魏升華教授鑒定為蘭科植物天麻GastrodiaelataBl．的干燥塊莖。采收人情況見表1。

表1 15批天麻采收情況

2 方法與結(jié)果

按照2015年版《中國藥典》“天麻”項下質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行質(zhì)量對比研究。分別采用TLC法、水分測定法、浸出物物測定法、二氧化硫測定法對收集的天麻進(jìn)行多方面的綜合質(zhì)量評價研究，包括水分、浸出及二氧化硫殘留量等，明確貴州天麻品質(zhì)優(yōu)勢。

2.1 薄層色譜鑒別

按照2015年版《中國藥典》天麻項下【鑒別】進(jìn)行薄層色譜驗證分析。

2.1.1 天麻素的薄層色譜鑒別 (1)供試品溶液的制備。取天麻樣品粉末0.5 g，加70%甲醇5 mL，超聲處理30 min，濾過，取濾液作為供試品溶液。

(2)天麻對照藥材溶液的制備。取天麻對照藥材0.5 g，同法制成對照藥材溶液。

(3)天麻素對照品溶液的制備。取天麻素對照品，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作為對照品溶液。

(4)薄層色譜鑒別。照薄層色譜法(通則0502)試驗，吸取供試品溶液10 μL、對照藥材溶液及對照品溶液各5 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲醇-水(9∶1∶0.2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%磷鉬酸乙醇溶液，在105 ℃加熱至斑點顯色清晰。結(jié)果見圖1、圖2、圖3。

注：1-5為貴州天麻樣品(大方批號01-05)，6為天麻素對照品，7為天麻對照藥材

圖1 天麻素的薄層色譜鑒別1

注：1-5為貴州天麻樣品(大方批號06-10)，6為天麻素對照品，7為天麻對照藥材

圖2 天麻素的薄層色譜鑒別2

注：1-5為貴州天麻樣品(大方批號11-15)，6為天麻素對照品，7為天麻對照藥材

圖3 天麻素的薄層色譜鑒別3

2.1.2 對羥基苯甲醇的薄層色譜鑒別 (1)對羥基苯甲醇對照品溶液的制備。取對羥基苯甲醇對照品，加乙醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作為對照品溶液。

(2)薄層色譜鑒別。照薄層色譜法(通則0502)試驗，吸取“2.1.2項”下供試品溶液10 μL、對照藥材溶液及“2.1.3項”下對照品溶液各5 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(60～90 ℃)-乙酸乙酯(1∶1)為展開劑，以下操作同“2.1.5項”。結(jié)果見圖4、圖5、圖6。

注：1-5為貴州天麻樣品(大方01-05)，6為對羥基苯甲醇對照品，7為天麻對照藥材

圖4 對羥基苯甲醇的薄層色譜鑒別1

注：1-5為貴州天麻樣品(大方06-10)，6為對羥基苯甲醇對照品，7為天麻對照藥材

圖5 對羥基苯甲醇的薄層色譜鑒別2

注：1-5為貴州天麻樣品(大方11-15)，6為對羥基苯甲醇對照品，7為天麻對照藥材

圖6 對羥基苯甲醇的薄層色譜鑒別3

2.2 水分測定

照2015版《中國藥典》第四部(通則0832)第二法(烘干法)，稱取貴州產(chǎn)15批天麻藥材進(jìn)行水分測定。結(jié)果見表2。

2.3 二氧化硫殘留量

照2015版《中國藥典》第四部(通則2331)第一法(滴定法)。結(jié)果見表2。

2.4 浸出物

照2015版《中國藥典》第四部(通則2201)醇溶性浸出物測定法項下的熱浸法測定，用稀乙醇作溶劑，檢查其醇溶性浸出物。結(jié)果見表2。

表2 天麻水分、浸出物、二氧化硫殘留量測定結(jié)果 (%)

注：水分含量藥典規(guī)定不得超過15.0%；浸出物含量藥典規(guī)定不得少于15.0%；二氧化硫殘留量藥典規(guī)定不得超過400mg/kg。

3 分析與討論

3.1 結(jié)果分析

由薄層鑒別結(jié)果圖1、圖2、圖3可看出，15批貴州天麻樣品中天麻素和對羥基苯甲醇的斑點清晰，穩(wěn)定性較強。由表2可知，15批天麻樣品的水分含量、二氧化硫殘留量、浸出物均符合 2015版《中國藥典》一部“天麻”藥材項下的規(guī)定，即水分檢測不得過15.0%，貴州天麻水分平均值為7.889 7%；二氧化硫殘留不得過400 mg/kg，貴州天麻二氧化硫殘留量平均值為0.000%；浸出物不得少于15.0%，貴州天麻浸出物平均值為55.551 1%，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于藥典標(biāo)準(zhǔn)。說明貴州天麻的品質(zhì)較好，各項檢測指標(biāo)都符合藥典標(biāo)準(zhǔn)，具有一定的市場競爭優(yōu)勢。

3.2 討論

中藥本身就是一個復(fù)雜系統(tǒng)，成分多樣，具有多成分多靶點的特點，單以某中藥中所含的某一特定成分的含量去評價其藥的質(zhì)量是遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠的，但是可以作為一種評定的依據(jù)和手段。貴州省是全國中藥資源最豐富的省區(qū)之一，其奇特的地理地形地貌，多樣的氣候類型，為貴州省中藥資源的發(fā)展提供了先決條件，使其擁有獨特的優(yōu)勢。天麻作為貴州省的特色道地藥材，其質(zhì)量優(yōu)劣問題最為關(guān)鍵，天麻含有豐富的化學(xué)成分，文獻(xiàn)研究發(fā)現(xiàn)，多以天麻素和對羥基苯甲醇的含量作為主要化學(xué)成分分析的對象，故本實驗選用天麻素和對羥基苯甲醇為天麻中的指標(biāo)成分，采用TLC法對其進(jìn)行定性鑒別，用于評價貴州天麻質(zhì)量的穩(wěn)定性。

本研究均采用2015版《中國藥典》測定方法對貴州天麻的主要化學(xué)成分進(jìn)行薄層鑒別，測定其水分、浸出物及二氧化硫殘留量的含量，各項測定結(jié)果均達(dá)到藥典規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)，其結(jié)果可作為一種參考依據(jù)，為貴州天麻的進(jìn)一步開發(fā)利用提供實驗支撐。