張喜峰，程雯慧，張春梅*

（1.河西學(xué)院 農(nóng)業(yè)與生物技術(shù)學(xué)院，甘肅 張掖 734000；2.甘肅省河西走廊特色資源利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，甘肅 張掖 734000）

黃參（Sphallerocarpusgracilis）為多年生傘形科迷果芹屬植物，在國內(nèi)主要分布于新疆、甘肅等西北地區(qū)，具有食用歷史較長、營養(yǎng)成分豐富等特點(diǎn)，其中多糖、蛋白質(zhì)含量較高，與世界衛(wèi)生組織推薦的參照蛋白模式基本吻合，屬于優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)；應(yīng)用前景廣闊[1]；目前，國內(nèi)外研究主要集中在黃參多糖、多酚和黃參食品開發(fā)等方面[2-5]；而有關(guān)黃參蛋白質(zhì)（Sphallerocarpus gracilis protein，SGP）的應(yīng)用研究相對較少；蛋白質(zhì)采用初級分離鹽析沉淀后，采用柱層析進(jìn)行后續(xù)純化步驟，雖純度高，但步驟繁瑣，周期較長，不利于工業(yè)化生產(chǎn)[6]。

三相萃?。╰hree phase-partitioning extraction，TPPE）是基于一種液-固-液形成三相基礎(chǔ)上非色譜分離技術(shù)，具有簡單、快速、成本低、回收率高等特點(diǎn)[7]；其主要由一定量無機(jī)鹽（通常為硫酸銨）、蛋白質(zhì)粗提液和小分子親水性有機(jī)溶劑（通常為叔丁醇）充分混合，靜置一段時(shí)間后，即可形成多酚類成分主要富集在上相即叔丁醇相，中間相為分離的蛋白質(zhì)，下相主要為多糖和其他親水物質(zhì)；三相的形成與鹽的濃度、表面張力和滲透作用密切相關(guān)[8]。羅磊等[9]采用叔丁醇/硫酸銨三相體系萃取金銀花過氧化物酶，并對其酶學(xué)性質(zhì)進(jìn)行了分析；GAGAOUA M等[10]采用三相萃取分離甜瓜汁中甜瓜蛋白酶，獲得了最佳萃取條件；AVHADDN等[11]對纖溶酶超聲輔助三相萃取條件進(jìn)行了優(yōu)化；其溫和的分離環(huán)境在天然產(chǎn)物活性成分分離和純化過程中具有重要作用，已廣泛應(yīng)用于金屬、油脂、酶等有效成分的分離[12-14]。

本研究擬對黃參中蛋白質(zhì)進(jìn)行三相萃取研究，通過單因素和正交試驗(yàn)優(yōu)化其萃取條件，采1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl，DPPH）、2,2'-聯(lián)氮-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）二銨鹽（2,2'-azinobis-（3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate，ABTS）自由基清除率、鐵離子還原能力（ferric ion reducing antioxidantpower，F(xiàn)RAP）值和氧自由基吸收能力（oxygen radicalabsorbance capacity，ORAC）對黃參中蛋白組分抗氧化性進(jìn)行研究，以期為黃參中蛋白質(zhì)的深度開發(fā)和工業(yè)化生產(chǎn)提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

黃參：采自甘肅山丹縣，經(jīng)張春梅副教授鑒定為迷果芹屬（Sphallerocarpus）傘形目傘形屬；經(jīng)清洗、陰干、粉碎后過60目篩，低溫保存?zhèn)溆?。叔丁醇、硫酸銨、氫氧化鈉、鹽酸（均為分析純）：天津永晟精細(xì)化工有限公司；維生素C（vitamin C，VC）（分析純）：上海源葉生物科技有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

DFY-1000C小型粉碎機(jī)：溫嶺市林大機(jī)械有限公司；恒溫磁力攪拌器；陜西環(huán)宇儀器設(shè)備公司；PHS-25/25C精密臺式pH計(jì)；遼寧賽亞斯科技有限公司；L6S紫外可見分光光度計(jì)；上海重逢科學(xué)儀器有限公司；GDXL-16D低速低溫離心機(jī)：常州市凱航儀器有限公司。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 黃參蛋白質(zhì)提取液制備

稱取一定量黃參粉末按照料液比1∶50（g∶m L）加入0.2 mol/L的磷酸鹽緩沖溶液（pH 7），在25℃振蕩處理30m in后，在4 000 r/min離心10m in，上清液為黃參蛋白質(zhì)提取液。

1.3.2 黃參蛋白質(zhì)三相萃取技術(shù)

取100m L已制備的黃參蛋白質(zhì)提取液，加入固體硫酸銨使其飽和度為20%～60%，采用1mol/LHCl或1mol/L NaOH調(diào)節(jié)體系pH為3.5～5.5，按照提取液∶叔丁醇體積比（1.0∶0.1～1.0∶2.5）加入一定量的叔丁醇后，充分混勻，在20～40℃水浴處理15～35m in，在4 000 r/m in離心10m in，收集含黃參蛋白質(zhì)的中間相，經(jīng)冷凍干燥（-45℃干燥24 h，真空度10 Pa）后得黃參蛋白質(zhì)組分，命名為SGP-1。

1.3.3 傳統(tǒng)鹽析沉淀黃參蛋白質(zhì)

取100m L已制備的黃參蛋白質(zhì)提取液，加入31.3 g固體硫酸銨，對其進(jìn)行分級沉淀，經(jīng)離心、透析除鹽、冷凍干燥（-45℃干燥24 h，真空度10 Pa）得黃參蛋白質(zhì)組分，命名為SGP-2。

1.3.4 黃參蛋白質(zhì)含量測定及提取率計(jì)算

采用凱氏定氮法測定黃參蛋白質(zhì)含量[15]，蛋白質(zhì)提取率計(jì)算公式如下：

1.3.5 黃參蛋白質(zhì)體外抗氧化活性測定

（1）DPPH·清除能力測定

SRP-1、SRP-2的抗氧化性測定參考文獻(xiàn)DPPH自由基清除法[16]，略作修改；分別取不同質(zhì)量濃度（0.2～1.0mg/mL）SGP-1和SGP-2各2m L，加入0.2mmol/LDPPH溶液2.0m L，在室溫避光反應(yīng)30min后在波長519 nm處測定其吸光度值，以VC為陽性對照，DPPH·清除率計(jì)算公式如下：

（2）ABTS+自由基清除能力測定

參照文獻(xiàn)[17]方法略作改動：將4.9mmol/L過硫酸鉀和7mmol/L ABTS+溶液等體積混合后，室溫避光反應(yīng)12 h后，采用0.45μm有機(jī)相針式濾器對青綠色ABTS+溶液進(jìn)行過濾后，采用甲醇稀釋，其波長734 nm處的吸光度值為0.70±0.02。分別取不同質(zhì)量濃度（0.2～1.0mg/m L）SRP-1和SRP-2各150μL，加入ABTS+溶液2.85m L，混合均勻，室溫反應(yīng)2 h后，在波長734 nm處測定其吸光度值，VC為陽性對照，ABTS+自由基清除率計(jì)算公式如下：

式中：A0為不含樣品吸光度值；A1為含樣品和ABTS+吸光度值；A2為不含ABTS+樣品吸光度值。

（3）還原力的測定

按照VASCO C等[18]文獻(xiàn)，測定樣品FRAP值。取不同質(zhì)量濃度（0.2～1.0mg/m L）SRP-1和SRP-2各150m L，均加入4.5m LFRAP工作液，在37℃加熱反應(yīng)40m in，在波長593 nm處測定其吸光度值，根據(jù)吸光度值，求得FeSO4相應(yīng)濃度，定義為FRAP值。

（4）抗氧化能力指數(shù)的測定

參照文獻(xiàn)[19]方法測定ORAC值（抗氧化能力指數(shù)），ORAC值以Trolox當(dāng)量（Troloxequivalent，TE）（μmolTE/mg）表示。

3×0+8+3×9+6+3×0+0+3×1+2+3×4+5+3×6=8+27+3+6+2+12+5+18=81，于是在這個(gè)加權(quán)和的方式下，若想讓UPC的每位數(shù)字和被10整除，則校驗(yàn)碼應(yīng)為9，即81+9=90被10整除．因此，正確的UPC應(yīng)是 0 8 9 6 0 0 1 2 4 5 6 9．

1.3.5 數(shù)據(jù)處理

所有試驗(yàn)均重復(fù)3次，數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差形式表示；數(shù)據(jù)采用Origin2016軟件作圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 三相萃取單因素試驗(yàn)

2.1.1 硫酸銨飽和度對黃參蛋白分離效果的影響

蛋白質(zhì)鹽析效果不僅與鹽的種類有關(guān)，而且與鹽的濃度密切相關(guān)。硫酸銨飽和度是影響三相萃取體系主要因素之一；不同飽和度條件下三相體系對黃參蛋白質(zhì)分離具有不同提取效果。固定黃參蛋白粗提液與叔丁醇體積比為1.0∶1.0，改變硫酸銨飽和度分別為20%、30%、40%、50%、60%，研究硫酸銨飽和度對黃參蛋白質(zhì)三相萃取效果的影響，結(jié)果見圖1。

圖1 硫酸銨飽和度對黃參蛋白質(zhì)三相萃取效果的影響Fig.1 Effect of ammonium sulfate saturation on three phasepartitioning extraction of Sphallerocarpus gracilis protein

硫酸銨的鹽析作用可有效促進(jìn)蛋白質(zhì)發(fā)生沉淀作用；NH4+和SO42-由于霍夫密斯特效應(yīng)在蛋白質(zhì)、酶等生物大分子的分子間相互作用的兩端具有重要作用。叔丁醇與蛋白質(zhì)粗提液互溶，一定量硫酸銨加入溶解后，出現(xiàn)明顯分層現(xiàn)象；即上相為叔丁醇相，下相主要含鹽，鹽析作用結(jié)果出現(xiàn)中間蛋白質(zhì)沉淀固體相，形成液-固-液三相體系。由圖1可知，隨著硫酸銨飽和度逐漸增加，黃參蛋白質(zhì)提取率呈現(xiàn)先增大后減小的趨勢，當(dāng)飽和度為50%時(shí)，提取率達(dá)到最大值；與其他梯度下硫酸銨飽和度相比，其提取率差異顯著（P＜0.05）；繼續(xù)增加飽和度，蛋白質(zhì)提取率逐漸下降；原因可能是硫酸銨在低飽和時(shí)，硫酸銨與叔丁醇協(xié)同效果較弱，導(dǎo)致部分蛋白質(zhì)停留在下相；當(dāng)飽和度過高時(shí)，可能促使其他雜蛋白被沉淀于中間相，影響其提取效果。因此，確定硫酸銨飽和度為50%。

2.1.2 叔丁醇加入量對黃參蛋白分離效果的影響

叔丁醇與其他醇類有機(jī)溶劑相比，是一種獨(dú)特一元醇，不僅具有溶解非極性成分外，還有醇沉和浮選劑作用，與一定量硫酸銨協(xié)同作用可有效純化目標(biāo)產(chǎn)物。本試驗(yàn)中，固定硫酸銨飽和度為50%，改變蛋白質(zhì)提取液與叔丁醇體積比分別為1.0∶0.5、1.0∶1.0、1.0∶1.5、1.0∶2.0、1.0∶2.5，分析叔丁醇加入量對黃參蛋白分離效果的影響，結(jié)果見圖2。

圖2 叔丁醇加入量對黃參蛋白質(zhì)三相萃取效果的影響Fig.2 Effect of tert-butanoladdition on three phase-partitioning extraction of Sphallerocarpus gracilis protein

由圖2可知，當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)提取液和叔丁醇體積比在1.0∶0.5～1.0∶1.0范圍內(nèi)時(shí)，黃參蛋白質(zhì)提取率逐漸增加，當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)提取液和叔丁醇體積比為1.0∶1.0時(shí)，提取率達(dá)到最大值，為（86.51±0.21）%；與蛋白質(zhì)提取液和叔丁醇體積比1.0∶0.5相比，提取率差異顯著（P＜0.05）；當(dāng)上述二者體積比在1.0∶1.0～1∶2.5內(nèi)，提取率之間差異均不顯著（P＞0.05）；叔丁醇加入量較小時(shí)，其與硫酸銨協(xié)同效果較弱，導(dǎo)致黃參蛋白質(zhì)沉淀效果較差；當(dāng)叔丁醇加入量過高時(shí)，蛋白質(zhì)提取率趨于穩(wěn)定，基本不變。因此，從節(jié)約成本角度考慮，確定蛋白質(zhì)提取液和叔丁醇體積比為1.0∶1.0。

2.1.3 體系pH對黃參蛋白分離效果的影響

目標(biāo)蛋白的帶電情況在一定意義上決定了鹽析作用效果，目標(biāo)蛋白所帶靜電荷主要是由體系pH決定的，在確定叔丁醇加入量和硫酸銨飽和度基礎(chǔ)上，采用1mol/LHCl或1mol/L NaOH改變體系pH分別為3.5、4.0、4.5、5.0、5.5，研究體系pH對黃參蛋白分離效果的影響，結(jié)果見圖3。

圖3 體系pH值對黃參蛋白質(zhì)三相萃取效果的影響Fig.3 Effect of system pH on three phase-partitioning extraction of Sphallerocarpus gracilis protein

在目標(biāo)蛋白質(zhì)等電點(diǎn)與三相體系pH接近時(shí)，硫酸銨與目標(biāo)蛋白質(zhì)之間的相互作用最小，影響目標(biāo)蛋白質(zhì)分離效果。當(dāng)體系pH大于目標(biāo)蛋白質(zhì)等電點(diǎn)時(shí)，蛋白質(zhì)帶有負(fù)電荷，主要有富集于三相體系下相趨勢；當(dāng)體系pH小于目標(biāo)蛋白質(zhì)等電點(diǎn)時(shí)，蛋白質(zhì)帶有正電荷，利于蛋白質(zhì)在中間相形成固相沉淀物；由圖3可知，當(dāng)體系pH值為4.5時(shí)，蛋白質(zhì)提取率達(dá)到最大值，為（87.1±0.119）%；與其他不同體系pH獲得的蛋白提取率進(jìn)行比較，差異顯著（P＜0.05）；體系pH偏高或偏低，均會影響其提取效果。因此，確定體系pH值為4.5。

2.1.4 萃取溫度對黃參蛋白分離效果的影響

溫度是影響三相萃取目標(biāo)產(chǎn)物因素之一，研究體系萃取溫度對黃參蛋白分離效果的影響，結(jié)果見圖4。由圖4可知，當(dāng)溫度為25℃時(shí)，提取率達(dá)到最高，為（87.43±0.136）%；分別與萃取溫度為20℃和30℃蛋白質(zhì)提取率進(jìn)行比較，差異顯著（P＜0.05）；繼續(xù)增加萃取溫度時(shí)，蛋白質(zhì)提取率基本不變，且差異不顯著（P＞0.05）；原因可能是在較低溫度條件下進(jìn)行萃取時(shí)，會影響目標(biāo)產(chǎn)物傳質(zhì)效果，導(dǎo)致三相形成較慢，且目標(biāo)蛋白質(zhì)與有機(jī)溶劑叔丁醇接觸時(shí)間長，會影響蛋白質(zhì)生物活性；溫度較高時(shí)，在提高傳質(zhì)效果的同時(shí)，可能會促使部分蛋白質(zhì)在固液界面發(fā)生溶解，導(dǎo)致中間相目標(biāo)物質(zhì)減少，影響其提取效果。因此，確定萃取溫度為25℃。

圖4 萃取溫度對黃參蛋白質(zhì)三相萃取效果的影響Fig.4 Effectof extraction temperature on three phase-partitioning extraction of Sphallerocarpus gracilis protein

2.1.5 萃取時(shí)間對黃參蛋白分離效果的影響

萃取時(shí)間是影響目標(biāo)成分萃取效果另一因素；其不僅影響目標(biāo)產(chǎn)物得率，在工業(yè)化生產(chǎn)中極大影響著生產(chǎn)成本，研究體系萃取時(shí)間對黃參蛋白分離效果的影響，結(jié)果見圖5。由圖5可知，萃取時(shí)間對黃參蛋白質(zhì)提取率影響得率差異不顯著（P＞0.05），當(dāng)萃取時(shí)間為15m in后，黃參蛋白質(zhì)提取率隨萃取時(shí)間變化趨勢不明顯。因此，確定萃取時(shí)間為15min。

圖5 萃取時(shí)間對黃參蛋白質(zhì)三相萃取效果的影響Fig.5 Effect of extraction time on three phase-partitioning extraction of Sphallerocarpus gracilis protein

2.2 三相萃取條件優(yōu)化正交試驗(yàn)

在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上，對硫酸銨飽和度、蛋白質(zhì)提取液與叔丁醇體積比、體系pH值、萃取溫度進(jìn)行L9（34）正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，正交試驗(yàn)結(jié)果與分析見表1。

表1 三相萃取條件優(yōu)化正交試驗(yàn)結(jié)果與分析Table 1 Results and analysis of orthogonalexperiments for three phase-partitioning extraction conditions optim ization

由表1可知，各個(gè)因素對蛋白質(zhì)提取率影響大小順序?yàn)轶w系pH值＞硫酸銨飽和度＞蛋白質(zhì)提取液與叔丁醇體積比＞萃取溫度；獲得三相萃取黃參蛋白質(zhì)最佳萃取條件為A2B2C2D1，即硫酸銨飽和度為50%，蛋白質(zhì)提取液和叔丁醇體積比為1.0∶1.0，萃取體系pH值為4.5，萃取溫度為20℃。在此優(yōu)化條件下，進(jìn)行3次重復(fù)試驗(yàn)，蛋白質(zhì)平均提取率為（88.71±0.54）%。由表2可知，硫酸銨飽和度、蛋白質(zhì)提取液和叔丁醇體積比、體系pH值對蛋白質(zhì)提取影響達(dá)到極顯著水平（P＜0.01）。

表2 正交試驗(yàn)結(jié)果方差分析Table 2 Variance analysis of orthogonalexperiments results

2.3 三相萃取黃參蛋白與鹽析沉淀效果的比較

將黃參蛋白質(zhì)提取液分別采用三相萃取和鹽析沉淀，蛋白質(zhì)提取率分別為（88.71±0.54）%和（76.49±0.70）%。結(jié)果表明，三相萃取法要優(yōu)于硫酸銨沉淀法，經(jīng)萃取后中間相為固體，不需經(jīng)過脫鹽處理，操作簡單易得。

2.4 黃參蛋白質(zhì)體外抗氧化活性測定

將上述兩種方法制備的黃參蛋白質(zhì)組分SRP-1和SRP-2進(jìn)行了體外抗氧化研究，分析其DPPH、ABTS+自由基清除率、FRAP值和ORAC指數(shù)的影響，結(jié)果見圖6。

圖6 黃參蛋白質(zhì)清除DPPH自由基（a）、ABTS+自由基（b）、鐵還原力（c）及氧自由基吸收能力指數(shù)（d）檢測結(jié)果Fig.6 Determ ination results of DPPH radical(a),ABTS+radical(b)scavenging activities,ferric reducing activity powers(c)and oxygen radicalabsorbance capacity index(d)of Sphallerocarpus gracilis protein

由圖6a可知，在樣品質(zhì)量濃度為0.2～1.0mg/m L范圍內(nèi)，蛋白組分SGP-1、SGP-2和VC對DPPH自由基清除效果呈現(xiàn)濃度依賴性，且蛋白組分SGP-1對DPPH自由基清除能力高于SGP-2；當(dāng)樣品質(zhì)量濃度為0.4mg/m L時(shí)，蛋白組分SGP-1和SGP-2對DPPH自由基效果分別為（61.25±1.51）%和（51.2±1.40）%；蛋白組分SGP-2對DPPH自由基清除效果均低于陽性對照VC；相反，當(dāng)質(zhì)量濃度≥0.6mg/m L之后，蛋白組分SGP-1對DPPH自由基清除效果強(qiáng)于陽性對照VC；可能是由于制備的兩個(gè)蛋白質(zhì)樣品中化學(xué)組成差異造成的。

由圖6b可知，蛋白組分SGP-1、SGP-2和VC對ABTS+自由基清除效果隨著質(zhì)量濃度在0.2～1.0mg/m L范圍內(nèi)逐漸增加呈現(xiàn)濃度依賴性，且蛋白組分SGP-1、SGP-2對ABTS+自由基清除效果均小于VC；當(dāng)質(zhì)量濃度為1mg/m L時(shí)，蛋白組分SGP-1和SGP-2具有相似的ABTS+自由基清除效果，清除率分別為（89.2±1.46）%和（89.1±1.39）%；蛋白組分SGP-1質(zhì)量濃度為0.2mg/m L時(shí)，對ABTS+自由基清除率為（55.36±1.32）%；蛋白組分SGP-2質(zhì)量濃度為0.4mg/m L時(shí)，對ABTS+自由基清除率為（59.2±1.26）%；可能是蛋白質(zhì)樣品中其他成分在一定程度上影響其抗氧化強(qiáng)弱；因此，樣品對ABTS+自由基清除效果不同歸因于樣品中蛋白質(zhì)及其成分含量差異。

由圖6c可知，不同樣品抗氧化能力強(qiáng)弱呈現(xiàn)濃度依賴性，且均小于陽性對照VC；這種趨勢與圖6b具有顯著相似性；蛋白組分SGP-1具有最大的還原力；當(dāng)樣品質(zhì)量濃度為1mg/m L時(shí)，蛋白組分SGP-1和SGP-2的FRAP值分別為0.99mmol/L和0.59mmol/L；結(jié)果表明，蛋白組分SGP-1具有更強(qiáng)給Fe3+提供電子的能力；蛋白組分SGP-1比SGP-2具有結(jié)合Fe3+穩(wěn)定性更高，其具有更高FRAP值；說明其樣品組成中蛋白質(zhì)含量多少顯著影響其抗氧化能力。

由圖6d可知，蛋白組分SGP-1和SGP-2兩個(gè)樣品ORAC指數(shù)分別為（109±1.56）μmolTE/mg和（65±1.42）μmolTE/mg；與蛋白組分SGP-2相比，蛋白組分SGP-1具有顯著的ORAC指數(shù)（P＜0.05），其抑制自由基的抗氧化能力就越強(qiáng)。說明兩個(gè)樣品均可作為抗氧化劑清除2,2'-鹽酸脒基丙烷（2,2'-azobis（2-amidinopropane）dinydrochloride，AAPH）形 成的自由基；曹亞蘭等[20]報(bào)道大豆抗氧化肽與ORAC指數(shù)有直接相關(guān)性；結(jié)合以上數(shù)據(jù)可推斷，SGP-1和SGP-2的ORAC指數(shù)差異主要受兩個(gè)樣品中化學(xué)成分影響；因此，ORAC指數(shù)已成為衡量中藥材或功能食品總抗氧化能力非常重要指標(biāo)之一。

3結(jié)論

本研究采用三相萃取黃參蛋白質(zhì)，對其萃取條件優(yōu)化基礎(chǔ)上，并與傳統(tǒng)鹽析沉淀方法進(jìn)行了比較，表明三相萃取制備的黃參蛋白質(zhì)具有較高蛋白質(zhì)提取率；對兩種方法制備的蛋白質(zhì)分別命名為SGP-1和SGP-2，并對兩個(gè)樣品體外抗氧化活性進(jìn)行比較研究。結(jié)果表明，當(dāng)硫酸銨飽和度為50%，蛋白質(zhì)提取液和叔丁醇體積比為1.0∶1.0，萃取體系pH值為4.5，萃取溫度為20℃。在此優(yōu)化條件下，進(jìn)行3次重復(fù)試驗(yàn)，蛋白質(zhì)平均提取率為（88.71±0.54）%。蛋白組分SGP-1和SGP-2對DPPH、ABTS自由基最大清除率分別為（61.25±1.51）%、（51.2±1.40）%和（89.2±1.46）%、（89.1±1.39）%；蛋白組分SGP-1和SGP-2的FRAP值、ORAC指數(shù)分別為0.99mmol/L、（109±1.56）μmol TE/mg和0.59mmol/L、（65±1.42）μmol TE/mg。兩個(gè)樣品在一定質(zhì)量濃度范圍內(nèi)抗氧化活性均呈現(xiàn)濃度依賴性；與SGP-2相比，SGP-1具有較高抗氧化活性，可能與樣品中蛋白質(zhì)含量及其他成分或結(jié)構(gòu)有關(guān)，然后，抗氧化性與樣品之間復(fù)雜關(guān)系受多種因素的影響，后續(xù)工作進(jìn)一步闡明蛋白質(zhì)抗氧化活性機(jī)制，為黃參蛋白質(zhì)深入研究提供科學(xué)依據(jù)。