馬蘭芝 李 迎,3 尚世臣 黃 斌 尚玉璞 王冬平 陳振文

(1. 軍事醫(yī)學(xué)研究院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，北京 100071)(2. 首都醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)部，北京 100069)(3.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，長(zhǎng)春 130118)

長(zhǎng)爪沙鼠(Merionesunguiculatus)具有獨(dú)特的解剖特性，由于具有明顯的腦底動(dòng)脈Willis環(huán)變異缺失即先天畸形而成為理想的腦缺血研究的實(shí)驗(yàn)材料[1]。首都醫(yī)科大學(xué)以長(zhǎng)爪沙鼠腦底動(dòng)脈Willis環(huán)變異缺失類型和單側(cè)頸動(dòng)脈結(jié)扎后的模型癥狀為指導(dǎo)，通過(guò)同一血管類型和一致的表型為特征，進(jìn)行長(zhǎng)爪沙鼠后代全同胞兄妹繁殖，成功培育了腦缺血模型高發(fā)長(zhǎng)爪沙鼠近交系群體CMU/1和CMU/2[2]。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物內(nèi)臟器系數(shù)是反映其生物學(xué)特性的一個(gè)重要指標(biāo),本文就CMU/1和CMU/2近交系動(dòng)物的臟器指標(biāo)進(jìn)行測(cè)試，為其生物醫(yī)學(xué)研究應(yīng)用提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

近交F20～F23代的腦缺血模型近交系長(zhǎng)爪沙鼠，3～4月齡，CMU/1近交系長(zhǎng)爪沙鼠40只(雌性9只，雄性31只)，CMU/2近交系長(zhǎng)爪沙鼠13只(雌性)，首都醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供[SCXK(京)-2013-0005]。動(dòng)物飼養(yǎng)于普通級(jí)環(huán)境內(nèi)，室溫為20～24 ℃，日常飼喂60Co照射消毒飼料及飲用無(wú)菌水，自由采食及飲水。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)首都醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)(No.AEEI-2017-032)。

1.2 實(shí)驗(yàn)儀器

分析電子天平——賽多利斯(CP224S),德國(guó)賽多利斯股份公司；常規(guī)解剖器械。

1.3 方法

取3～4月齡成年動(dòng)物稱其體質(zhì)量后處死，解剖取心、肝、脾、肺、腎、腎上腺、胰腺、胸腺、睪丸、卵巢，剝離結(jié)締組織分析天平稱重。

1.4 臟器系數(shù)

臟器系數(shù)又稱臟體比，即臟器質(zhì)量與其體質(zhì)量的比值。

1.5 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 23.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，先進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)后，再使用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)對(duì)測(cè)得的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行比較分析。長(zhǎng)爪沙鼠各臟器發(fā)育的一致性用Kendall 和諧系數(shù)描述。用Pearson 相關(guān)系數(shù)和直線回歸方程描述體質(zhì)量與各臟器質(zhì)量的相關(guān)性。α±0.05 為顯著性水平。

2 結(jié)果

2.1 CMU/1和CMU/2近交系長(zhǎng)爪沙鼠的體質(zhì)量和臟器質(zhì)量測(cè)定

結(jié)果顯示：CMU/1和CMU/2近交系長(zhǎng)爪沙鼠的體質(zhì)量和臟器質(zhì)量差異不顯著(P>0.05)(見(jiàn)表1)，通過(guò)方差齊性檢驗(yàn)分析腎臟和肺臟的數(shù)據(jù)具有統(tǒng)計(jì)意義。

表1 CMU/1和CMU/2近交系長(zhǎng)爪沙鼠的 體質(zhì)量和臟器質(zhì)量比較Table 1 Comparison of body weight and organ weight of gerbil in CMU/1 and CMU/2 inbred lines

2.2 CMU/1和CMU/2近交系長(zhǎng)爪沙鼠的臟器系數(shù)測(cè)定

結(jié)果顯示：CMU/1和CMU/2近交系長(zhǎng)爪沙鼠的肺臟器系數(shù)差異顯著(P<0.05)，其它差異不顯著(P>0.05)；t值為負(fù)值表明CMU/2的主要臟器略小于CMU/1(見(jiàn)表2)，通過(guò)方差檢驗(yàn)分析脾臟、腎上腺和心臟的數(shù)據(jù)具有統(tǒng)計(jì)意義。

表2 CMU/1和CMU/2近交系長(zhǎng)爪沙鼠的臟器系數(shù)比較Table 2 Viscera coefficient comparison of CMU/1 and CMU/2 inbred strain of gerbil

注:*P<0.05 表示差異顯著。

Note:*P<0.05 indicates significant difference.

2.3 Kendall和諧系數(shù)

Kendall和諧系數(shù)(W)是分析動(dòng)物及動(dòng)物群體主要器官發(fā)育和諧性的統(tǒng)計(jì)學(xué)指標(biāo)。和諧系數(shù)(W)一般以0-1表示。W接近1時(shí)，其主要器官整體發(fā)育協(xié)調(diào)性好，反之就差。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：W(CMU/1)=0.967P=0.000；W(CMU/2)=0.964P=0.000。

2.4 直線回歸

2.4.1CMU/1近交系長(zhǎng)爪沙鼠的直線回歸方程：以體質(zhì)量(X)為自變量，臟器系數(shù)(Y)為因變量，建立直線回歸方程。結(jié)果表明，近交系長(zhǎng)爪沙鼠CMU/1的胸腺P<0.05，兩樣本間有線性關(guān)系。肝、脾、腎、腎上腺、肺、心、卵巢、胰腺、睪丸P>0.05，兩樣本間無(wú)線性關(guān)系。其中肝、脾、腎上腺、卵巢、胰腺與體質(zhì)量呈正相關(guān)，腎、肺、心、胸腺、睪丸與體質(zhì)量呈負(fù)相關(guān)，見(jiàn)表3。

2.4.2CMU/2近交系長(zhǎng)爪沙鼠的直線回歸方程：結(jié)果表明，近交系長(zhǎng)爪沙鼠CMU/2的肝、肺P<0.05，兩樣本間有線性關(guān)系。脾、腎、腎上腺、心、卵巢、胰腺、胸腺P>0.05，兩樣本間無(wú)線性關(guān)系。其中肝、脾、腎、腎上腺、肺、心、卵巢、胰腺與體質(zhì)量呈負(fù)相關(guān)，胸腺與體質(zhì)量呈正相關(guān)。(見(jiàn)表4)

表3 CMU/1近交系長(zhǎng)爪沙鼠主要臟器系數(shù)與 體質(zhì)量的直線性關(guān)系Table 3 Relationship between main organ coefficient and body weight of gerbil in CMU/1 inbred line

表4 CMU/2近交系長(zhǎng)爪沙鼠主要臟器系數(shù)與 體質(zhì)量的直線性關(guān)系Table 4 Relationship between main organ coefficient and body weight of gerbil in CMU/2 inbred line

3 討論

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物主要臟器的質(zhì)量及臟器系數(shù)是病理學(xué)、藥理學(xué)、生理學(xué)、營(yíng)養(yǎng)學(xué)、毒理學(xué)等研究中常用指標(biāo)。易受動(dòng)物品系、飼養(yǎng)條件、性別和年齡等因素的影響[3], 嚙齒類動(dòng)物臟器質(zhì)量研究始于20 世紀(jì)60 年代，Klemml 和Novd 首先報(bào)道了發(fā)育中的動(dòng)物體質(zhì)量與年齡存在正相關(guān)性[4-5]。

研究結(jié)果表明： Kendall和諧系數(shù)W(CMU/1)=0.967P=0.000；W(CMU/2)=0.964P=0.000。兩組動(dòng)物W值均接近1，表明其主要器官整體發(fā)育協(xié)調(diào)性好，和器官協(xié)調(diào)一致性很好；近交系長(zhǎng)爪沙鼠CMU/2的肝、肺P<0.05，兩樣本間有線性關(guān)系。脾、腎、腎上腺、心、卵巢、胰腺、胸腺P>0.05，兩樣本間無(wú)線性關(guān)系。其中肝、脾、腎、腎上腺、肺、心、卵巢、胰腺與體質(zhì)量呈負(fù)相關(guān)，胸腺與體質(zhì)量呈正相關(guān)；近交系長(zhǎng)爪沙鼠CMU/1的胸腺P<0.05，兩樣本間有線性關(guān)系。肝、脾、腎、腎上腺、肺、心、卵巢、胰腺、睪丸P>0.05，兩樣本間無(wú)線性關(guān)系。其中肝、脾、腎上腺、卵巢、胰腺與體質(zhì)量呈正相關(guān)，腎、肺、心、胸腺、睪丸與體質(zhì)量呈負(fù)相關(guān)。文獻(xiàn)報(bào)道[3]肝和脾的臟器系數(shù)為(3.12±0.54)、(0.09±0.03)，本研究的近交系長(zhǎng)爪沙鼠比封閉群的低；CMU/1和CMU/2近交系的臟器系數(shù)除肺以外差異不顯著，CMU/2的體質(zhì)量、腎、肺、胰腺、胸腺略小于CMU/1。研究測(cè)試數(shù)據(jù)的方法和統(tǒng)計(jì)結(jié)果表述與文獻(xiàn)報(bào)道[3]的一致，與戴麗軍等[6]的測(cè)試方法不同，統(tǒng)計(jì)結(jié)果描述的一致。因此，建立該近交系長(zhǎng)爪沙鼠臟器系數(shù)和體質(zhì)量與臟器的線性關(guān)系， 對(duì)提供必要的生物學(xué)背景材料具有重要意義。