胡德美 鮑泥滿 鄭霏艷

摘要：目的 探究三七蒸制、烘焙、油炸、砂燙四種炮制方法五種皂苷（R1、Rg1、Re、Rb1、Rd）含量的變化，以及相對(duì)于生三七多出來(lái)的色譜峰的分析。方法 利用高效液相分析三七不同炮制方法下的色譜峰的情況。結(jié)果 五種皂苷的含量下降程度比較為蒸制<油炸<砂燙;烘焙這種炮制方式，除了Rb1的量有所減少，其四種皂苷含量都有所增加;相對(duì)于生三七，圖譜上明顯增加的峰的個(gè)數(shù)及含量總體來(lái)說(shuō)增加比較為砂燙>油炸>蒸>烘焙。結(jié)論 三七的炮制方法不同，化學(xué)成分的比例、結(jié)構(gòu)也不同。

關(guān)鍵詞：炮制;三七;化學(xué)成分

中圖分類號(hào)：R285.5 ? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A ? 文章編號(hào)：1007-2349（2019）07-0054-06

【Abstract】Objective： To explore the changes of the contents of five saponins （R1， Rg1， Re， Rb1， Rd） in steaming， baking， frying and sand-heating of Pseudo-Ginseng and analyze the chromatographic peaks of raw Pseudo-Ginseng. Methods： High-performance liquid phase analysis was used to analyze the peaks of Pseudo-Ginseng in different processing methods. Results： The reduction of the content of the five saponins was compared， steamed < frying < sand-heat< baking. In addition to the decrease in the amount of Rb1， the baking method increased the content of four saponins. Compared with raw Pseudo-Ginseng， the number and the content of the obviously increased peaks on the map generally increased to be sand-heat > frying > steaming > baking. Conclusion： The different processing methods of Pseudo-Ginseng have different proportion and structure of chemical components.

【Key words】Keywords： processing， Pseudo-Ginseng， chemical composition

三七為五加科植物三七Panax notoginseng（Burkill）F.H.Chen ex C.Chow & W.G.Huang的干燥根及根莖[1]。又名田七，主產(chǎn)于云南和廣西。三七為我國(guó)重要的傳統(tǒng)藥物，也是歷史悠久的天然資源。三七味甘，微苦，性溫，歸肝、胃、心、小腸經(jīng)，具有止血、活血散瘀、消腫定痛的功效，被譽(yù)為傷科圣藥，素有“金不換”、“南國(guó)神草”等盛名，又被現(xiàn)代中藥學(xué)家稱為“參中之王[2]。傳統(tǒng)中醫(yī)醫(yī)藥在遣藥組方時(shí)非常講究“藥之生熟”，生熟用法不同且功效各異[3]。未經(jīng)炮制過(guò)的三七為生三七，經(jīng)炮制過(guò)的三七為熟三七?！侗静菥V目拾遺》首次記載了三七補(bǔ)益作用，熟三七在臨床上主要用于由生血乏源、失血過(guò)多、腎精虧損、大病久治不愈等引起的血虛證，產(chǎn)后血虛和習(xí)慣性產(chǎn)后血暈等;也可用于身體虛弱，氣血不足，癥見面色蒼白、頭昏眼花、四肢無(wú)力、食欲不振[4-6]。三七的炮制方法傳統(tǒng)資料記載有“蒸熟”和“油炸”兩種[7]，通過(guò)查閱文獻(xiàn)及其他中藥炮制的借鑒，本文還增加了烘焙和砂燙這兩種炮制方法。以期利用高效液相分析三七不同炮制方法色譜峰之間的區(qū)別，找出不同的炮制方法色譜峰的變化特征，為后續(xù)的化學(xué)及藥理研究提供基礎(chǔ)。2015版《藥典》[8]三七的高效液相質(zhì)量控制只以三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1這三個(gè)成分為指標(biāo)，本實(shí)驗(yàn)用高效液相法同時(shí)測(cè)定五種皂苷類成分（三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Re、人參皂苷Rb1、人參皂苷Rd），既很好的區(qū)別三七與人參、西洋參，又更加充分地評(píng)價(jià)三七。

1 材料與方法

1.1 藥品 三七，購(gòu)自云南省昆明市官渡區(qū)土中藥材批發(fā)行，經(jīng)云南中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院炮制中心趙榮華教授鑒定為五加科人參屬植物三七Panax notoginseng（Burkill）F.H.Chen ex C.Chow & W.G.Huang的干燥根及根莖。

1.2 試劑 甲醇（購(gòu)自天津市風(fēng)船化學(xué)試劑科技有限公司），乙腈（購(gòu)自MREDA TECHNOLOGY INC，MADE IN USA），娃哈哈純凈水，除乙腈為色譜純外，其他均為分析純。三七總皂苷標(biāo)準(zhǔn)品，（購(gòu)自國(guó)家藥品生物制品檢定所，批號(hào)：110870-201002）。

1.3 儀器 Agilent 1260系列高效液相色譜儀，VWD紫外檢測(cè)器，Chemstation化學(xué)工作站;水浴鍋（型號(hào)：HH-6，國(guó)華電器有限公司）;十萬(wàn)分之一天平（型號(hào)AB265-S，瑞士梅特勒-托利多公司），色譜柱：Agilent Zorbax SB-C18（4.6 mm×250 mm，5μm），水浴鍋（型號(hào)：HH-6，國(guó)華電器有限公司），溫度計(jì)（購(gòu)自testo，型號(hào)905-T1），電熱鼓風(fēng)干燥箱（上海一恒科學(xué)儀器有限公司），微波爐（紅番茄，型號(hào)HK-0905A2T），沙子（河沙），油（金龍魚調(diào)和油）。

2 樣品的制備

2.1 供試品溶液的制備 精密稱取三七粉末600 mg，置250 mL圓底燒瓶中，加入50 mL甲醇溶液，80℃回流2h，放冷，補(bǔ)重，搖勻，靜置后用0.45μm濾膜過(guò)濾，取續(xù)濾液[9]。

2.2 對(duì)照品溶液的制備 按照2015版《藥典》要求，三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1三者含量不低于5.0%。配三七總皂苷對(duì)照品溶液，以Rg1的濃度為0.4 mg/mL標(biāo)準(zhǔn)。精密稱量0.1429 g的三七總皂苷，置于10 mL的容量瓶，加甲醇定量至10 mL，得到三七總皂苷溶液濃度為1.429 mg/mL。其中五種皂苷成分的濃度為三七皂苷R 10.099 mg/mL、人參皂苷Rg1 0.400 mg/mL、人參皂苷Re 0.054 mg/mL、人參皂苷Rb1 0.424 mg/mL、人參皂苷Rd 0.104 mg/mL。

3 色譜分析

3.1 色譜條件 色譜柱：Agilent Zorbax SB-C18（4.6 mm×150 mm，5μm）;流動(dòng)相：乙腈-水，梯度洗脫，梯度見表1;柱溫：20℃;進(jìn)樣量：10μL;流速：1 mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng)：203nm[10]，結(jié)果見表1。

3.2 線性關(guān)系考察 精密吸取三七總皂苷對(duì)照品溶液4、6、8、10、12、14 uL，根據(jù)表1色譜條件測(cè)定峰面積，以進(jìn)樣量（ug）為橫坐標(biāo)，以峰面積為縱坐標(biāo)，得出五種皂苷成分的回歸方程、相關(guān)系數(shù)與線性范圍見表2。五種皂苷的回歸曲線、回歸方程、線性相關(guān)系數(shù)、以及線性范圍見圖1-圖5。

通過(guò)以上線性關(guān)系可以看出，通過(guò)此方法測(cè)定三七的五種皂苷含量，數(shù)據(jù)相關(guān)性較好，說(shuō)明該方法用于測(cè)定和評(píng)價(jià)三七的五種皂苷含量可行。同時(shí)，將生三七的三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1的峰面積代入回歸方程，可以得出三種皂苷的含量為8.10%，符合藥典對(duì)三七質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求。

4 三七不同炮制品的制備及圖譜的比較

4.1 三七的炮制 蒸制：常溫蒸制6 h，切片，干燥，打粉，過(guò)80目篩;油炸：用植物油炸至表面呈金黃色，冷卻，打粉，過(guò)80目篩;砂燙：將片狀三七砂燙至表面呈金黃色，打粉，過(guò)80目篩;烘焙：將生三七粉用微波爐中檔烘焙至三七粉散發(fā)獨(dú)特香味。

4.2 三七及不同炮制品材料圖 見圖6-圖11。

4.3 四種炮制方法的供試品制備 分別準(zhǔn)確稱量0.6 g四種炮制三七粉及生三七粉，按照2.1供試品溶液的制備方法，并且以3.1色譜條件進(jìn)樣分析，得出四種炮制方法和生三七的五種皂苷峰面積如表3。

4.4 四種三七炮制方法的HPLC圖譜分析與比較 見圖12-圖21。

5 討論

由圖（6-11）可以看出，與生三七比較，炮制品的外觀顏色都有所變化，砂燙和油炸的三七表面都呈金黃色，而烘焙品和蒸制品的顏色與未炮制的三七粉比較，顏色稍微加深。

從五種皂苷含量來(lái)分析，由表3可以看出，和生品比較，四種炮制方法里除了烘焙方法，其他三種炮制方法的五種皂苷含量均有所下降，且下降程度為砂燙>油炸>蒸。而烘焙與生品比較，除了Rb1有所下降，其他均有所升高。

從新產(chǎn)生的成分來(lái)分析，由圖（12-21）可以看出，峰的個(gè)數(shù)及含量總體來(lái)說(shuō)增加比較為砂燙>油炸>蒸>烘焙。發(fā)生這一現(xiàn)象的原因可能是加熱溫度不同而導(dǎo)致，溫度越高，變化越顯著。其次，還發(fā)現(xiàn)了烘焙與油炸這兩種炮制方法較其他炮制方法更有意義的地方，在Rb1出峰之后與Rd出峰之前的這段時(shí)間段，新產(chǎn)生的成分以及原有成分的變化較明顯，這些變化有待進(jìn)一步的深入研究。

熟三七在臨床上的應(yīng)用還不普及，物質(zhì)基礎(chǔ)研究得并不深入，本實(shí)驗(yàn)初步探索出三七不同的炮制方法化學(xué)成分的區(qū)別，為后續(xù)熟三七的研究可提供一定的指導(dǎo)和選擇，以期在熟三七化學(xué)成分及藥理作用方面都有更加深入和全面的研究。

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