孫夢(mèng)珂 丘富安

一起豬藍(lán)耳病的診治及防控措施

孫夢(mèng)珂①丘富安②

（①福建農(nóng)林大學(xué)福建省獸醫(yī)中藥與動(dòng)物保健重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 福建 福州 350002 ②福州中科基因技術(shù)有限公司 福建 福州）

為了確診一起疑似藍(lán)耳病病例，本研究采用Elisa法和熒光定量PCR法進(jìn)行血清學(xué)和分子生物學(xué)診斷，結(jié)果顯示：流產(chǎn)母豬的S/P平均值顯著超過正常母豬的S/P平均值，且熒光定量PCR結(jié)果顯示藍(lán)耳病病毒核酸為陽性，綜合結(jié)果判斷該病例為豬繁殖與呼吸綜合征。

豬繁殖與呼吸綜合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome, PRRS)俗稱“藍(lán)耳病”，是一種由豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)感染引起，以母豬流產(chǎn)、死胎、木乃伊胎、返情或者不發(fā)情等繁殖障礙以及小豬呼吸綜問題為臨床癥狀的傳染病。隨著1987年美國首先報(bào)道后[1]，荷蘭、加拿大、德國、也先后報(bào)道了該病。在1996年，中國首次分離到PRRS病毒，從而證實(shí)了本病在我國的存在。PRRSV 是單股RNA病毒，這一性質(zhì)決定了其具有較強(qiáng)的變異性，且病毒之間很容易發(fā)生基因重組[2]。目前我國分離到主要來源于歐洲株和北美洲株，兩者在RNA序列上有百分之五十至七十的同源性。藍(lán)耳病毒存在水平傳播和垂直傳播兩種形式，其可通過口鼻分泌物、糞尿中排毒，即使是康復(fù)豬也能在臨床癥狀恢復(fù)中的2~3個(gè)月持續(xù)排毒，此外，飼養(yǎng)人員成為病毒傳播的重要途徑。種豬如母豬可通過胚胎，公豬可通過精液進(jìn)行垂直傳播。除了種豬，仔豬、育肥豬和成年豬均可發(fā)病，研究報(bào)道，仔豬可達(dá)100%的發(fā)病率、50%以上的死亡率，母豬可達(dá)30%以上的流產(chǎn)率。藍(lán)耳病毒在細(xì)胞的凋亡后進(jìn)入血液與淋巴循環(huán)，導(dǎo)致毒血癥。由于巨噬細(xì)胞被破壞不能有效的識(shí)別抗原導(dǎo)致機(jī)體免疫抑制，易感染細(xì)菌性疾病。目前，診斷藍(lán)耳病的常用的方法有臨床診斷、Elisa法、分子生物學(xué)方法以及病毒分離。

1 發(fā)病情況

福建省某自繁自養(yǎng)場(chǎng)，生產(chǎn)母豬400頭左右，在2018年11月份若干母豬出現(xiàn)不食，測(cè)體溫發(fā)現(xiàn)病豬體溫升高至41℃以上，耳朵發(fā)紺，眼結(jié)膜發(fā)紅充血、眼瞼出現(xiàn)水腫，之后幾天陸續(xù)出現(xiàn)出現(xiàn)母豬流產(chǎn)和產(chǎn)死胎，咳嗽、氣喘等呼吸道癥狀。根據(jù)臨床癥狀豬場(chǎng)懷疑豬繁殖與呼吸綜合征。該場(chǎng)未免疫藍(lán)耳疫苗。

2 方法

2.1 Elisa法檢測(cè)藍(lán)耳病抗體 采用愛德士豬藍(lán)耳病抗體試劑盒檢測(cè)發(fā)病豬血清，具體步驟按愛德士說明書操作。

2.2 藍(lán)耳病毒熒光定量PCR檢測(cè) 使用洛陽愛森病毒DNA/RNA提取試劑盒按照使用說明書提取組織中的藍(lán)耳病毒RNA，然后使用廣州達(dá)安基因藍(lán)耳病毒核酸檢測(cè)試劑盒檢測(cè)藍(lán)耳病毒核酸，具體步驟按試劑盒使用說明書操作。

3 結(jié)果

3.1 Elisa法檢測(cè)藍(lán)耳病抗體 從S/P值的分布結(jié)果(表1)表明，流產(chǎn)母豬的S/P值分布主要集中在S/P≥3區(qū)間。從圖1可知，流產(chǎn)母豬的陽性率為90%，正常母豬的陽性率為50%，說明流產(chǎn)母豬的感染率比正常母豬的多。流產(chǎn)母豬的藍(lán)耳流產(chǎn)母豬的S/P的平均值為2.76，超過2.5(IDEXX藍(lán)耳抗體野毒感染經(jīng)驗(yàn)閾值)。且流產(chǎn)母豬S/P平均值顯著大于正常母豬豬群的S/P平均值，因?yàn)樨i群未免疫藍(lán)耳病疫苗，可能流產(chǎn)母豬豬群存在藍(lán)耳病毒血癥，綜上所述，猜測(cè)流產(chǎn)與藍(lán)耳病存在相關(guān)性。

表1 母豬的S/P值分布 (頭)

圖1 母豬的藍(lán)耳抗體檢測(cè)結(jié)果

3.2 藍(lán)耳病毒熒光定量PCR檢測(cè) 藍(lán)耳病毒熒光定量PCR結(jié)果顯示，流產(chǎn)小豬的組織和流產(chǎn)母豬的血清均檢測(cè)出藍(lán)耳病毒核酸，結(jié)合臨床癥狀以及Elisa結(jié)果，推測(cè)這例母豬流產(chǎn)的病例為藍(lán)耳病導(dǎo)致的。

表2 熒光定量PCR檢測(cè)結(jié)果

圖2 藍(lán)耳病毒熒光定量PCR檢測(cè)結(jié)果

4 防控措施

關(guān)于藍(lán)耳病的防控，許多豬場(chǎng)還處于一個(gè)被動(dòng)階段，發(fā)病后才趕緊進(jìn)行治療和防控。藍(lán)耳病需主動(dòng)防控，如做好疫苗免疫、疫病凈化和生物安全等，尋求有效的適合本場(chǎng)的防控措施，能降低藍(lán)耳病發(fā)生所帶來的損失。（1）堅(jiān)持自繁自養(yǎng)的原則，若必須引種，從無本病地區(qū)引入豬群，在引進(jìn)種豬前，要進(jìn)行全面的血清學(xué)檢查，檢測(cè)合格方可進(jìn)入隔離區(qū)馴化，3~4周后，需要再次進(jìn)行血清學(xué)檢查，若檢查結(jié)果仍合格，則可將其混入豬群。進(jìn)群后也要堅(jiān)持定期對(duì)豬群中藍(lán)耳病毒的感染狀況進(jìn)行監(jiān)測(cè)，以了解該病在豬場(chǎng)的活動(dòng)狀況。（2）日常管理至關(guān)重要，養(yǎng)殖者要保持舍內(nèi)通風(fēng)、保溫、消毒等各方面，特別是消毒，制定良好的消毒計(jì)劃，并對(duì)消毒效果進(jìn)行評(píng)估，確保消毒到位。對(duì)于發(fā)病豬舍要嚴(yán)密封鎖，對(duì)發(fā)病豬舍周圍要采取一定的措施，避免疾病擴(kuò)散，對(duì)流產(chǎn)的胎衣、死胎及死豬都做好無害處理，隔離病豬。

5 小結(jié)

目前，在藍(lán)耳病暴發(fā)后是否免疫PRRS弱毒疫苗仍存在著爭議，有關(guān)研究仍然需要進(jìn)一步加強(qiáng)，使用疫苗須根據(jù)場(chǎng)內(nèi)情況制定方案。藍(lán)耳疫苗在接種3~4星期之后才產(chǎn)生保護(hù)性抗體，這期間就是藍(lán)耳病免疫抗體的空白期，倘若有野毒的活動(dòng)在群體里，容易導(dǎo)致免疫的失敗，因此這期間進(jìn)行精心地飼養(yǎng)管理是必要的。此外，感染豬的非特異免疫力低下，要想對(duì)豬進(jìn)行更為有效的防治，可使用中藥微生態(tài)制劑進(jìn)行預(yù)防保健，提高機(jī)體的非特異性免疫力，降低疾病的發(fā)生幾率。

[1] 劉光清, 蔡雪暉, 仇華吉等. 豬繁殖與呼吸綜合征的研究進(jìn)展[J]. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào), 2001, 23(1): 72-76.

[2] 仇華吉, 童光志, 周彥君等. 豬生殖-呼吸道綜合征病毒(PRRSV)CH-la株糖蛋白基因的遺傳變異分[J]. 病毒學(xué)報(bào), 2000, 16(4): 357-360.

[3] 張青嫻, 王克領(lǐng), 張立憲等. 高致病性藍(lán)耳病的研究進(jìn)展[J]. 中國畜牧獸醫(yī), 2008, 35(9): 105-107.

[4] 豬藍(lán)耳病活疫苗免疫效果試驗(yàn)觀察[J]. 豬業(yè)科學(xué), 2011, 28(4): 96-101.

（2019–05–08）

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