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        甘油三酯分子的分離鑒定方法

        2019-08-22 10:25:54陶寧萍王明福王錫昌
        中國(guó)油脂 2019年8期
        關(guān)鍵詞:映體色譜法脂質(zhì)

        張 靜,陶寧萍,2,王明福,王錫昌

        (1.上海海洋大學(xué) 食品學(xué)院,上海 201306; 2.上海水產(chǎn)品加工及貯藏工程技術(shù)研究中心,上海201306)

        作為天然存在的脂類(lèi)形式,甘油三酯(Triglyceride,TG)是主要的脂肪傳遞介質(zhì),同時(shí)也是體內(nèi)重要的儲(chǔ)能物質(zhì),通常以脂滴的形式貯存于骨骼肌中,水解產(chǎn)生脂肪酸后通過(guò)β氧化和氧化磷酸化作用提供能量[1-2]。TG分子由一個(gè)甘油碳骨架及上面通過(guò)酯鍵連接的三個(gè)脂肪酸分子構(gòu)成。在沒(méi)有認(rèn)識(shí)到油脂的本質(zhì)前,人們一直以為油脂中的TG是由同一種脂肪酸組成的。直到20世紀(jì)初,人們才認(rèn)識(shí)到TG是混合物,并逐漸認(rèn)識(shí)到油脂的性質(zhì)與脂肪酸的種類(lèi)及其在甘油三個(gè)羥基位置上的分布有關(guān),構(gòu)成TG的脂肪酸種類(lèi)、不飽和度及幾何構(gòu)型都對(duì)油脂的性質(zhì)有重要的影響[1]。

        體外及體內(nèi)研究均發(fā)現(xiàn),不同種類(lèi)油脂如PO、RO、LINO、SO和LO(PO,棕櫚油;RO,菜籽油;LINO,亞麻籽油;SO,葵花籽油;LO,豬油)在消化過(guò)程中的脂肪酸釋放速率有所不同,短鏈飽和脂肪酸(如PO中的C16∶ 0)釋放程度高于長(zhǎng)鏈多不飽和脂肪酸(如LINO中的C18∶ 3)[3-4]。因此,對(duì)TG分子進(jìn)行精確的分離鑒定,對(duì)于研究其在生物體內(nèi)的代謝作用有著十分重要的意義。

        本文將從不同脂肪酸鏈TG分子、TG同分異構(gòu)體分子及TG對(duì)映體分子的分析三個(gè)方面進(jìn)行論述,以期對(duì)之后發(fā)展穩(wěn)定、快速、精確、高分辨及高通量的TG分析檢測(cè)技術(shù)提供參考。

        1 不同脂肪酸鏈TG分子分離鑒定

        1.1 氣相色譜法(GC)

        氣相色譜法始于19世紀(jì)50年代,是分析檢測(cè)脂肪酸最常用的方法。對(duì)TG利用氣相色譜法進(jìn)行分析,通常對(duì)其先進(jìn)行甲酯化處理,使脂肪酸變成甲酯的狀態(tài),再進(jìn)行氣相色譜分析,得到油脂脂肪酸組成。通過(guò)與脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間對(duì)照,確定脂肪酸分子類(lèi)[5]。李玉琪等[6]對(duì)比了酸處理法、堿處理法、三氟化硼處理法三種不同的甲酯化方法,結(jié)果顯示不同的甲酯化方法各有優(yōu)缺點(diǎn),根據(jù)出峰數(shù)目及峰面積的不同結(jié)果,三氟化硼甲酯化法效果更優(yōu)。

        高溫氣相色譜法(HTGC)對(duì)于直接分析高沸點(diǎn)TG分子具有良好的效果。高溫毛細(xì)管柱的柱溫可以達(dá)到400℃,此條件下HTGC與質(zhì)譜聯(lián)用,TG無(wú)需進(jìn)行甲酯化衍生,即可在色譜柱上按碳數(shù)由小到大依次洗脫,縮短樣品預(yù)處理時(shí)間[7-8]。Sutton等[9]利用HTGC與飛行時(shí)間質(zhì)譜(TOF-MS)聯(lián)用,對(duì)幾種TG標(biāo)準(zhǔn)品混合物在25 min內(nèi)完成保留指數(shù)分析,實(shí)現(xiàn)了對(duì)分子及碎片離子的同時(shí)鑒定。

        除了單一GC,多維GC(MDGC)近年來(lái)也多用于分析復(fù)雜樣品。Waktola等[10]使用HTGC與二維GC聯(lián)用進(jìn)行橄欖油中TG分子的分離分析。其中,第一維GC色譜柱采用相對(duì)較短的非極性柱,第二維采用中極性的色譜柱,柱溫可達(dá)到350℃。第一維GC通過(guò)相對(duì)相對(duì)分子質(zhì)量不同及碳原子數(shù)不同而區(qū)分TG分子,這也意味著具有相同相對(duì)分子質(zhì)量或碳原子數(shù)的分子會(huì)在同一個(gè)地方出峰。二維GC則可以根據(jù)每個(gè)分子的不飽和程度對(duì)其進(jìn)行進(jìn)一步區(qū)分。相比一維GC可檢出15種TG分子,二維GC可以檢出大于29種TG分子。

        1.2 高效液相色譜法(HPLC)

        高效液相色譜法根據(jù)其分離原理主要包括正相高效液相色譜法(NPLC)、非水反相高效液相色譜法(NARP)、超高效液相色譜法(UHPLC)和二維液相色譜法(2D-LC)[11-18]。

        1.2.1 正相高效液相色譜法

        通常NPLC更適用于不同極性脂類(lèi),如甘油酯、游離脂肪酸、磷脂的分離。但對(duì)于極性近似的脂類(lèi),NPLC無(wú)法做到有效分離[12]。在分離TG時(shí),其色譜峰會(huì)有很大程度的重疊,因此NPLC很少獨(dú)立對(duì)TG分子進(jìn)行分離分析,多與其他類(lèi)型色譜聯(lián)用。

        1.2.2 非水反相高效液相色譜法

        NARP對(duì)于脂質(zhì)的分離程度依賴(lài)于分子中碳鏈的長(zhǎng)度和雙鍵數(shù)。常用的NARP固定相是C18鍵合硅膠,含有十八碳烷基,并與硅烷醇表面以共價(jià)鍵結(jié)合。流動(dòng)相對(duì)分離效果影響很大,一般選用以乙腈為主的混合溶劑,此外還可選用丙酮、二氯甲烷、甲醇、四氫呋喃、氯仿等[17]。NARP分離TG受很多因素的影響,但在一定條件下仍具有規(guī)律性,流出順序一般是根據(jù)碳數(shù)及雙鍵數(shù)而定,每個(gè)雙鍵相當(dāng)于減少兩個(gè)碳原子,TG組分一般按照當(dāng)量碳數(shù)(Equivalent carbon number,ENC)出峰。ENC又稱(chēng)為分配數(shù)(Partition number,PN),其值為甘油三酯中脂肪酸的總碳數(shù)和(CN)減去總雙鍵數(shù)(n)的2倍,具有相同ECN值的甘油三酯組分稱(chēng)為臨界對(duì)(Critical pairs),例如,PPP與PPO、POO與OOO具有相同的ECN值。臨界對(duì)相對(duì)保留時(shí)間相同,同出一個(gè)峰(此情況下,Sn-1、2、3位排布差異對(duì)出峰時(shí)間也沒(méi)有影響)。NARP對(duì)于具有相同ENC的TG組分無(wú)法實(shí)現(xiàn)有效分離[19]。

        1.2.3 超高效液相色譜法

        超高效液相色譜系統(tǒng)使用粒徑不超過(guò)2 μm的色譜柱[20]。相比普通高效液相色譜,UHPLC可以在更寬的線速度范圍內(nèi)保持恒定柱效,加快分離速度,提高分離靈敏度。Arfa等[21]利用UHPLC-APCI-MS系統(tǒng)對(duì)四種北非芝麻中的TG進(jìn)行鑒定,結(jié)果顯示其檢測(cè)范圍在0.001~0.400 mg/mL之間,線性良好,相關(guān)系數(shù)達(dá)到0.995。相比HPLC-APCI-MS系統(tǒng)可檢測(cè)到19種芝麻T(mén)G分子,此種方法可檢測(cè)到30種芝麻T(mén)G分子[22]。

        1.2.4 二維液相色譜法

        TG分子同分異構(gòu)體由于具有相似的結(jié)構(gòu)及化學(xué)性質(zhì),僅憑普通的液相色譜,對(duì)其分離極其困難?;诟黝?lèi)色譜的優(yōu)缺點(diǎn),2D-LC更適用于復(fù)雜樣本的分析,不僅可以良好地分離不同類(lèi)脂質(zhì),而且可以用于類(lèi)別內(nèi)分離以及痕量物質(zhì)的檢測(cè),被廣泛用于TG組學(xué)的研究。2D-LC分離是將收集正相色譜的組分再進(jìn)行反相色譜分析,或與之順序相反。常用的組合為離子交換/反相二維色譜[23-24]。

        2D-LC主要分為離線與在線兩種形式。將非水反相/銀離子色譜(NARP/Ag+-HPLC)離線二維色譜與質(zhì)譜聯(lián)用,對(duì)花生油中的TG具有良好的定性與定量分析效果,該離線2D-LC具有出色的正交選擇性。整個(gè)過(guò)程需要將第一維色譜的洗脫液收集,隨后進(jìn)樣到第二維色譜,再次進(jìn)行分離,所以時(shí)間較長(zhǎng),且有機(jī)溶劑耗費(fèi)較大[25]。相比離線分析模式,在線檢測(cè)通過(guò)接口將兩個(gè)分離體系內(nèi)互補(bǔ)的色譜柱串聯(lián)起來(lái),第一根色譜柱的洗脫液可被收集并自動(dòng)進(jìn)樣到第二根色譜柱,具有耗時(shí)短、重現(xiàn)性好的優(yōu)點(diǎn)。但對(duì)專(zhuān)用接口的要求較高,而且操作難度也相應(yīng)增大。此外,對(duì)于具有不同保留機(jī)制的兩種分離模式,必須考慮二維溶劑與在線分離系統(tǒng)的相容性,可能不適于高效快速分析。

        綜上所述,未來(lái)建立快速、高通量的2D-LC,對(duì)TG分析檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展和TG組學(xué)研究有很好的促進(jìn)作用。

        1.3 超臨界流體色譜法(SFC)

        SFC以超臨界流體做流動(dòng)相,是依靠流動(dòng)相的溶劑化能力來(lái)進(jìn)行分離、分析的色譜過(guò)程。SFC兼有氣相色譜和液相色譜的色譜。1961年,SFC的概念第一次由Lovelock和Klesper提出,之后該技術(shù)得到了快速的發(fā)展。作為GC和HPLC的補(bǔ)充,SPC具有分離溫度低、速度快、兼容性好的優(yōu)點(diǎn)。因此,SFC可以良好地分離熱敏性物質(zhì),選擇性高,并且可與火焰離子化檢測(cè)器、熒光檢測(cè)器等多種檢測(cè)器聯(lián)用[26-27]。此外,相比GC或者HPLC,SFC可以簡(jiǎn)單地將產(chǎn)品與溶劑分離,后處理更加便捷,產(chǎn)品純度更高。

        在脂類(lèi)的分析中,SFC常使用粒徑小于2 μm的硅膠柱,可以實(shí)現(xiàn)廣范圍、高通量的快速分析,常用于極性和非極性脂質(zhì)的區(qū)分。反相色譜柱的使用可以根據(jù)TG分子碳骨架所連接的脂肪酸種類(lèi)不同,分離單個(gè)分子,比如TG的同分異構(gòu)體。Lee等[28]通過(guò)SFC與C30反相色譜柱聯(lián)用,對(duì)食用油中的TG分子進(jìn)行分析,共鑒定35種TG分子,其中包括6對(duì)同分異構(gòu)體,如PPLn/PLnP、PPO/POP等。

        研究者比較HPLC與SFC對(duì)于生物樣本中脂質(zhì)信息的分析能力,結(jié)果顯示,SFC可以利用分子中的脂肪酸鏈長(zhǎng)與雙鍵數(shù)對(duì)分子進(jìn)行分離,HPLC對(duì)雙鍵數(shù)4以上的分子保留較低,對(duì)雙鍵數(shù)0~3的分子無(wú)法分離。兩種方法同與四級(jí)桿-飛行質(zhì)譜聯(lián)用,兩者的離子相對(duì)強(qiáng)度響應(yīng)值無(wú)顯著差異,但就Hex2Cer d18∶ 1/12∶ 0分子而言,HPLC的離子相對(duì)強(qiáng)度響應(yīng)值是SFC的一半,如[M+H-Hex2]+在HPLC中的響應(yīng)值為11.5%,在SFC中為22.6%。另外,HPLC的分析時(shí)間需要10 min左右,而SFC只需要6 min左右[29]。因此,相較于HPLC,SFC更適合于非極性脂質(zhì)的分離分析。

        1.4 質(zhì)譜法(MS)

        針對(duì)不同的TG分子分析對(duì)象,氣相色譜及高效液相色譜系統(tǒng)通常需要與各種檢測(cè)器配合進(jìn)行,如蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(ELSD)、紫外檢測(cè)器(UV)、質(zhì)譜等。由于自然樣本中的TG分子多種多樣,相應(yīng)的對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)品難以獲得,因此對(duì)于TG的檢測(cè)多依賴(lài)于MS。利用MS可以分析得到TG分子的脂肪酸鏈種類(lèi)、位置及雙鍵數(shù)目等信息。

        1.4.1 不同離子源MS技術(shù)

        根據(jù)離子源不同,目前脂質(zhì)分析常用的有電噴霧電離質(zhì)譜(ESI-MS)、基質(zhì)輔助激光解吸電離質(zhì)譜(MALDI-MS)、大氣壓化學(xué)電離質(zhì)譜(APCI-MS)。

        ESI在脂質(zhì)組學(xué)分析中應(yīng)用廣泛,尤其是在shotgun技術(shù)中,是常見(jiàn)的直接快速鑒定TG的MS技術(shù)[30]。一般來(lái)講,ESI離子源產(chǎn)生的正電荷響應(yīng)較強(qiáng)。但其缺陷在于,TG為非極性化合物,須在ESI噴霧溶劑中加入少量鹽離子以提高電離效率,且只能產(chǎn)生較少的離子碎片,如[M+NH4]+和[M+Na]+[20]。因此,通過(guò)ESI得到的TG分子結(jié)構(gòu)信息有限。

        MALDI是最早使用的質(zhì)譜成像技術(shù),可以直接進(jìn)樣分析而不經(jīng)高效液相色譜分離[31]。質(zhì)譜成像技術(shù)是將成像處理軟件與質(zhì)譜的離子掃描技術(shù)相結(jié)合的一種新型分析方法。相比傳統(tǒng)質(zhì)譜法,質(zhì)譜成像技術(shù)更加直觀地顯示脂肪酸分布信息。MALDI可實(shí)現(xiàn)高通量全掃描正離子模式,減少峰之間的重疊,在一個(gè)圖譜里顯示出較多種類(lèi)的物質(zhì)。但由于MALDI對(duì)基質(zhì)的高要求,因此其穩(wěn)定性及重現(xiàn)性差強(qiáng)人意[32]。

        TG位置異構(gòu)體的分離分析一直是相關(guān)分析的難點(diǎn),APCI與非極性溶劑的兼容性良好,產(chǎn)生的質(zhì)譜圖相對(duì)簡(jiǎn)單,尤其適用于分析TG位置異構(gòu)體[32]。TG分子在APCI中經(jīng)離子化過(guò)程,根據(jù)最終產(chǎn)生的[M+H-RCOOH]+、[M+H-RCOO-R’CO]+、[RCO]+離子不同對(duì)脂肪酸在甘油骨架上的位置進(jìn)行鑒定(Sn-2,Sn-1(3))。

        1.4.2 不同質(zhì)量分析器MS技術(shù)

        對(duì)于MS分析效率的評(píng)價(jià)常常考慮三個(gè)方面:質(zhì)量分辨率,精確度和靈敏度。飛行時(shí)間質(zhì)譜(TOF-MS)和軌道離子阱質(zhì)譜(Orbitrap-MS)是脂質(zhì)分析中常用的高通量質(zhì)譜分析技術(shù)。TOF-MS中,產(chǎn)生的離子通過(guò)電場(chǎng)進(jìn)行加速,其飛行速度由于各自的m/z不同而產(chǎn)生差異。期間,質(zhì)量分辨率通常隨著飛行路徑的增長(zhǎng)而增加,并且可以通過(guò)離子反射器進(jìn)行擴(kuò)展。但漂移管的長(zhǎng)度通常受儀器所處空間大小的限制。TOF-MS的質(zhì)量分辨率通??梢赃_(dá)到40 000,準(zhǔn)確度約為5 μg/mL。因此,在分析相對(duì)分子質(zhì)量小于500的物質(zhì)時(shí),仍然可能存在有數(shù)十種不同的同重物質(zhì)。通常來(lái)講,只有當(dāng)質(zhì)量分辨率超過(guò)100 000時(shí)才可進(jìn)行同位素峰的區(qū)分并且給出可靠的總結(jié)公式[33]。因此,通常將TOF-MS與四級(jí)桿(Quadrupole,Q)串聯(lián)使用來(lái)提高分析的準(zhǔn)確性。在TG分子的分析中,TOF-MS常與ESI和MALDI進(jìn)行聯(lián)用。Ikeda等[34]利用LC/ESI-QTOF MS/MS對(duì)小鼠肝臟及白色脂肪組織中的TG分子進(jìn)行全面分析,分別鑒定出67種和69種TG分子。Chao等[35]利用UPLC-ESI-QTOF-MS/MS對(duì)乙醛酸鹽誘導(dǎo)的腎結(jié)石小鼠血清及腎臟中的TG組成進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)腎臟中只檢測(cè)到3種TG分子,而血清中檢測(cè)到31種TG分子,并發(fā)現(xiàn)含有16∶ 0及18∶ 2兩種脂肪酸的TG為其主要存在形式,分別占TG總量的19.3%和26.3%。Carcia等[36]利用MALDI-QTOF MS對(duì)TG分子進(jìn)行鑒定分析,實(shí)現(xiàn)了對(duì)奶粉中添加植物油脂的摻偽鑒別。

        Orbitrap-MS的檢測(cè)原理是基于內(nèi)部線形電極和外部圓柱形電極之間靜電場(chǎng)中的諧波軸向離子振蕩來(lái)進(jìn)行,對(duì)于離子的捕獲頻率依賴(lài)于離子的m/z值,其軸向捕獲頻率可以根據(jù)傅里葉變換進(jìn)行推算。掃描間隔2 s左右時(shí),Orbitrap-MS的質(zhì)量分辨率可以達(dá)到100 000。在和HPLC聯(lián)用時(shí),Orbitrap-MS的分辨率通常維持在60 000左右,采樣率約在4 Hz。與TOF-MS相比,Orbitrap-MS的采樣率較低,分析時(shí)間較長(zhǎng),但其質(zhì)量精確度可以達(dá)到1μg/mL 以下[37-39]。Q Exactive(QE)是近來(lái)常用于TG分子分析的一種Orbitrap質(zhì)譜儀。相比常見(jiàn)Orbitrap-MS 設(shè)備,QE在軌道阱前面又串聯(lián)了一個(gè)四級(jí)桿,離子可首先進(jìn)入四級(jí)桿質(zhì)量分析器進(jìn)行篩選,篩選后的母離子進(jìn)入QE中進(jìn)行高分辨研究。相比其他質(zhì)譜分析器,QE更適合于未知樣品的掃描定量,且對(duì)標(biāo)準(zhǔn)品的要求較低,適合對(duì)樣品中的TG分子進(jìn)行鑒定分析。Shan等[40]利用UHPLC-ESI-Q Exactive對(duì)內(nèi)毒素誘導(dǎo)的肺部損傷小鼠的肺部及血漿脂質(zhì)組成進(jìn)行分析,確定出TG(8∶ 0/10∶ 0/10∶ 0)等13種脂質(zhì)分子為其可能的生物標(biāo)記物。

        自然界的TG組成十分復(fù)雜,除了不同脂肪酸鏈的分子,同時(shí)含有一些同分異構(gòu)體及對(duì)映體分子。它們由于自身結(jié)構(gòu)的特殊性,一般的分析方法對(duì)其難以實(shí)現(xiàn)分離鑒定。接下來(lái),將對(duì)這兩種特殊TG分子的分離鑒定進(jìn)行總結(jié)。

        2 TG同分異構(gòu)體分子分離鑒定

        2.1 反相高效液相色譜法(RPLC)

        通過(guò)對(duì)RPLC的固定相及流動(dòng)相進(jìn)行修飾,可以對(duì)TG同分異構(gòu)體分子進(jìn)行分離。Momchilova等[41]利用三組固定相及流動(dòng)相組合對(duì)PLP/PPL等同分異構(gòu)體分子實(shí)現(xiàn)分離(見(jiàn)圖1)。其中,A組固定相為未封端Superspher RP-18柱,流動(dòng)相為乙腈-四氫呋喃(體積比80∶ 20),流速0.7 mL/min;B組固定相為封端Superspher RP-18(e)柱,流動(dòng)相為乙腈-乙醇(體積比65∶ 35),流速0.9 mL/min;C組固定相為封端Superspher RP-18(e)柱,流動(dòng)相為乙腈-二氯甲烷(體積比75∶ 25),流速0.6mL/min。從圖1可以看出,對(duì)固定相及流動(dòng)相的調(diào)整不會(huì)改變幾種TG分子的出峰順序,B組的分離度最佳。但三組的分析時(shí)間都達(dá)到170~230 min,分析時(shí)間過(guò)長(zhǎng),且得到的峰形較寬。

        注:A.Arachidic acid,二十碳酸;E.Eicosapentaenoic acid,二十碳五烯酸;D.Docosahexaenoic acid,二十二碳六烯酸。

        圖1 RPLC分離TG同分異構(gòu)體

        2.2 銀離子高效液相色譜法

        依據(jù)銀離子(Ag+)與雙鍵之間具有微弱的螯合力,可使不同雙鍵數(shù)的TG有效分離。Ag+與α和β位的雙鍵結(jié)合力不同,利用銀離子高效液相色譜可以將位置異構(gòu)體分開(kāi)[42]。Ag+一般以AgClO4或AgNO3的形式,可以溶于流動(dòng)相中,也可以直接涂于固定相上,可用硅膠或ODS作為固定相。流動(dòng)相根據(jù)樣品不同差別較大,如甲醇-異丙醇、乙腈-丙酮、乙腈-四氫呋喃-二氯甲烷等[4]。

        3 TG對(duì)映體分子分離鑒定

        手性色譜是目前分離分析TG對(duì)映體分子的主要方法,主要通過(guò)TG對(duì)映體與手性固定相之間的作用力不同而達(dá)到分離目的。利用手性色譜可以不經(jīng)衍生化處理而對(duì)對(duì)映體分子實(shí)現(xiàn)分離。固定相是影響手性色譜分離效果的主要因素。脂質(zhì)對(duì)映體分子分離中常用到的固定相有纖維素-反式-(3,5-二甲基氨基甲酸酯)、纖維素-反式-(3-氯-4-甲苯基氨基甲酸酯)[43]。

        利用手性色譜對(duì)幾種TG對(duì)映體標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行分離,如PoPoP/PPoPo、PPPo/PoPP對(duì)映體,出峰時(shí)間十分接近,在樣品被分析之前,需要先用標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行出峰時(shí)間校正。然而,對(duì)映體的標(biāo)準(zhǔn)品一般都需要特別合成得到,成本較高。同時(shí),手性色譜分離TG對(duì)映體的分離時(shí)間較長(zhǎng)。

        4 數(shù)據(jù)庫(kù)在TG分析中應(yīng)用

        TG分子的分析結(jié)果會(huì)產(chǎn)生大量的數(shù)據(jù),目前還沒(méi)有對(duì)這些數(shù)據(jù)進(jìn)行自動(dòng)處理和分析的相關(guān)系統(tǒng),常參考脂質(zhì)組學(xué)數(shù)據(jù)處理方法進(jìn)行處理。其中,對(duì)樣品中的脂質(zhì)進(jìn)行定性定量分析是最為基本、最關(guān)鍵的一步,而這需要依賴(lài)數(shù)據(jù)庫(kù)。數(shù)據(jù)庫(kù)不但可以提供生物體中各種代謝物的結(jié)構(gòu)信息,還包含化合物生化信息、疾病相關(guān)的代謝差異以及有關(guān)的定量數(shù)據(jù)。對(duì)于TG而言,需要建立關(guān)于生物系統(tǒng)中所有TG化合物的數(shù)據(jù)庫(kù),為未知的TG化合物及其代謝物的結(jié)構(gòu)鑒定提供相關(guān)信息,或可用于已知TG分子生物功能的解釋[44-45]。目前,已有為脂質(zhì)組學(xué)設(shè)計(jì)的特定數(shù)據(jù)庫(kù)與軟件,如表1所示。

        表1 幾種常用脂質(zhì)組學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)[44-45]

        5 結(jié)束語(yǔ)

        TG作為動(dòng)植物油脂的主要組成成分,其分子結(jié)構(gòu)決定了油脂的理化性質(zhì)及營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。因此,TG的分子組成可以作為油脂品質(zhì)評(píng)價(jià)的重要指標(biāo),從而達(dá)到鑒別摻偽、確定產(chǎn)地等目的。對(duì)于結(jié)構(gòu)組成復(fù)雜的TG分子,未來(lái)對(duì)其鑒定分析將主要聚焦在實(shí)現(xiàn)更高靈敏度、更高通量的檢測(cè);對(duì)于TG中的同分異構(gòu)體及對(duì)映體等,提高檢測(cè)方法的穩(wěn)定性,使其具有良好的重現(xiàn)性;對(duì)現(xiàn)有的脂質(zhì)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行完善,使其可以提供更加全面的TG結(jié)構(gòu)信息,并實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)產(chǎn)生大量數(shù)據(jù)的自動(dòng)分析處理。

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