馬占蕾

甘肅省中醫(yī)院，甘肅 蘭州 730030

黑果枸杞（Lycium ruthenicum Murr）為茄科枸杞屬多年生灌木植物，其味甘、性平、清心熱。藏藥稱黑果枸杞為“旁瑪”，根據(jù)《晶珠本草》《四部醫(yī)典》等記載，藏醫(yī)以其成熟果實(shí)入藥，治療心熱病、心臟病、月經(jīng)不調(diào)、停經(jīng)等病癥[1]?！毒S吾爾藥志》記載，維吾爾醫(yī)常用黑果枸杞果實(shí)及根皮治療尿道結(jié)石、癬疥、齒齦出血等癥，民間用作滋補(bǔ)強(qiáng)壯、明目及降壓藥[2，3]。

黑果枸杞漿果呈球形，成熟后為紫黑色，無毒，有甜味?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)及營養(yǎng)學(xué)表明，黑果枸杞富含原花青素和花色苷類色素，有別于枸杞[4]，此外，黑果枸杞還含有其他多酚、黃酮、甜菜堿、多糖、糖蛋白及脂肪酸等[5]，從類胡蘿卜素含量來看，黑果枸杞遠(yuǎn)低于寧夏枸杞[6]?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明黑果枸杞還具有抗疲勞、降血糖、抗氧化及其他營養(yǎng)保健作用[5]。

一、黑果枸杞產(chǎn)業(yè)現(xiàn)狀

（一）野生黑果枸杞的分布和生態(tài)價(jià)值

野生黑果枸杞分布于我國陜西北部黃土高原、寧夏、甘肅、青海、內(nèi)蒙古西部、新疆和西藏等地區(qū)，中亞、高加索和歐洲等地區(qū)亦有分布。其中，我國新疆、甘肅分布較多，在新疆主要分布于塔里木下游地區(qū)，甘肅則主要分布于河西走廊的武威市、金昌市、張掖市和酒泉市的鹽化荒漠地帶。

黑果枸杞耐干旱，耐鹽堿，耐沙埋，耐嚴(yán)寒，常生長于鹽堿土荒地、沙地或路旁。黑果枸杞是典型的根蘗類植物[7]，其發(fā)達(dá)的根系和頑強(qiáng)的生命力使黑果枸杞具有很強(qiáng)的抗逆性，黑果枸杞生態(tài)適應(yīng)幅度寬，能在干旱、貧瘠和鹽堿土壤上生長，可作為改善鹽堿、治理荒漠化和防風(fēng)固沙的一種重要手段來推廣。

（二）黑果枸杞種植現(xiàn)狀

2010年以來，在國內(nèi)保健熱潮興起的大背景下，因認(rèn)為黑果枸杞有美容、防皺紋、抗衰老以及抗癌、防治心血管疾病等功效，市場對(duì)黑果枸杞的需求量大增。在2010年前黑果枸杞基本以野生為主，產(chǎn)量有限，使黑果枸杞的價(jià)格快速上漲，2012年精品黑果枸杞甚至達(dá)到4000元/kg，致使產(chǎn)地群眾對(duì)黑果枸杞開始瘋狂采摘，甚至暴力爭奪資源，對(duì)黑果枸杞的野生資源保護(hù)形成了嚴(yán)重威脅。黑果枸杞價(jià)位高，也刺激了產(chǎn)地群眾對(duì)黑果枸杞進(jìn)行野生變家種的積極性。因黑果枸杞生命力強(qiáng)，引種成功率很高，管理成本低，因此從2012～2015年黑果枸杞的種植面積迅速擴(kuò)大，最初從青海開始引種栽植，進(jìn)而擴(kuò)展到寧夏、甘肅、新疆，當(dāng)前，陜西靖邊、定邊，山東泰安也開始人工栽植。甘肅省主要集中于玉門、酒泉，以及白銀，從2016年開始，種植面積基本穩(wěn)定在1萬畝左右，隨著人工栽植技術(shù)的成熟，人工栽植黑果枸杞的產(chǎn)量也逐漸增加，由開始時(shí)的干果產(chǎn)量10～15kg/畝，現(xiàn)在已發(fā)展到100kg/畝，甚至達(dá)到200kg/畝以上。

表2 不同激素濃度組合繼代培養(yǎng)對(duì)芽增殖系數(shù)的影響

表3 正交設(shè)計(jì)方差分析（完全隨機(jī)模型）

種植面積的擴(kuò)大使市場對(duì)黑果枸杞種苗的需求逐年上漲，目前，黑果枸杞的市場價(jià)400～600元/kg，黑果枸杞扦插苗的價(jià)格10元/株左右，種子實(shí)生苗的價(jià)格3元/株左右，仍有較高種植效益，而且黑果枸杞的人工栽培作為保護(hù)其野生資源一種重要措施還應(yīng)加大推廣種植力度，因此研究黑果枸杞種苗的組培快繁技術(shù)對(duì)擴(kuò)大黑果枸杞種苗來源，以及作為黑果枸杞人工繁育的技術(shù)儲(chǔ)備都有重要意義。

二、組培快速繁殖技術(shù)

（一）試驗(yàn)材料

野生黑果枸杞（lycium ruthenicum Murr)，采集于酒泉市民勤縣。

（二）試驗(yàn)方法

1.外植體消毒。將采來的黑果枸杞，剪去葉片，用流水沖洗干凈，在超凈工作臺(tái)上將沖洗好的枝條剪切成帶有1～2個(gè)腋芽莖段，用75%的酒精表面滅菌30s，然后用0.1%的升汞溶液處理7min，并用無菌水沖洗5至6次備用。

2.初代培養(yǎng)。處理后的外植體接種到MS+不同激素+30mg/g蔗糖+6mg/g瓊脂培養(yǎng)基上，pH6.0，在溫度22～25℃、光照12h/d、光照強(qiáng)度2 000～3 000lx下培養(yǎng)，觀察腋芽的萌發(fā)及生長狀況，統(tǒng)計(jì)誘導(dǎo)率。

3.繼代培養(yǎng)。經(jīng)初代培養(yǎng)25d后不定芽長到3cm左右，將誘導(dǎo)的新莖剪段轉(zhuǎn)接入MS+不同激素+30mg/g蔗糖+6mg/g瓊脂培養(yǎng)基上，再培養(yǎng)30d，培養(yǎng)基pH和培養(yǎng)條件同初代培養(yǎng)，觀察并記錄誘導(dǎo)幼苗分化的時(shí)間和芽苗數(shù)量。

4.生根培養(yǎng)。以1/2MS為基本培養(yǎng)基，加入不同激素濃度組合激素和15mg/g蔗糖+6mg/g瓊脂，培養(yǎng)30d，培養(yǎng)基pH和培養(yǎng)條件同初代培養(yǎng)，觀察并記錄不定根的產(chǎn)生時(shí)間和數(shù)量。

三、結(jié)果與分析

（一）不同激素濃度對(duì)帶芽莖段初代培養(yǎng)的影響

從表1可知，不同激素濃度會(huì)對(duì)外植體初代培養(yǎng)產(chǎn)生不同的影響。經(jīng)初代培養(yǎng)25d后，MS+6-BA0.5+NAA0.2的處理萌發(fā)率最高，達(dá)到了83.3%，從芽的生長狀況來看植株長勢好，叢生芽多，葉片呈綠色。MS+6-BA1.5+NAA0.2的處理萌發(fā)率最低，有愈傷組織形成，植株長勢極差，葉片黃綠色。

（二）不同激素濃度組合對(duì)繼代培養(yǎng)芽增殖系數(shù)的影響

利用正交法設(shè)計(jì)來研究不同激素水平組合對(duì)繼代培養(yǎng)芽增殖的影響，從表2、3可知，培養(yǎng)30d后，兩種激素不同濃度配比對(duì)芽增殖系數(shù)有顯著影響，綜合來看，最優(yōu)組合為MS+6-BA0.5 mg·L-1+NAA0.1mg·L-1。此培養(yǎng)基組合可作為黑果枸杞莖段芽增殖最佳培養(yǎng)基使用。

（三）不同激素濃度組合對(duì)生根的影響

經(jīng)增殖培養(yǎng)后的組培苗接種在各生根培養(yǎng)基上均可誘導(dǎo)出根，24d開始生根，30d可產(chǎn)生10～30條不定根，形成完整植株。從表4可知，不同培養(yǎng)基上的生長情況存在差異，綜合來看最佳生根培養(yǎng)基為1/2MS+NAA 0.1mg/L+IBA 0.1 mg/L。

表4 不同激素濃度組合對(duì)生根的影響

四、討論與結(jié)論

黑果枸杞是近年來才開發(fā)出來的藥食兩用資源，因開發(fā)時(shí)間不長，產(chǎn)業(yè)鏈短，目前還沒有深加工產(chǎn)品，多以干果出售為主，這也是限制黑果枸杞增值和銷量增加的因素，可鼓勵(lì)枸杞加工企業(yè)對(duì)黑果枸杞進(jìn)行精深加工開發(fā)，以增大黑果枸杞的市場容量，同時(shí)提高其附加值。此外，黑果枸杞在育苗、種植、管理、修剪、病蟲害防治、初加工等技術(shù)方面尚處于摸索階段，急需相關(guān)農(nóng)業(yè)科技部門進(jìn)行技術(shù)的規(guī)范化研究，并對(duì)產(chǎn)區(qū)藥農(nóng)開展培訓(xùn)，以提高黑果枸杞的規(guī)范化管理水平，也可保障黑果枸杞產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。

黑果枸杞在原花青素和花色苷類色素含量方面，確比枸杞有優(yōu)勢，且黑果枸杞主要產(chǎn)自我國西北地區(qū)，產(chǎn)區(qū)海拔高，具有光照時(shí)間長、晝夜溫差大、黑果枸杞病蟲害少、品質(zhì)優(yōu)等地域優(yōu)勢，應(yīng)積極宣傳，拓展銷路，尤其是要開拓國外市場。有研究表明，黑果枸杞的原花青素和花色苷類色素要高于藍(lán)莓，因此可作為在歐美國家暢銷的藍(lán)莓的替代品來推廣。

黑果枸杞野生資源一般分布在沙漠邊緣，是防風(fēng)固沙的良好植物，應(yīng)建立有效的保護(hù)機(jī)制，如在黑果枸杞野生資源分布區(qū)建立保護(hù)基地等，在保護(hù)基地內(nèi)禁止采摘黑果枸杞，防止群眾對(duì)其野生資源的破壞，同時(shí)也可使荒漠區(qū)脆弱的環(huán)境得到保護(hù)。在荒漠環(huán)境治理過程，也可把黑果枸杞作為防風(fēng)固沙植物而推廣，既可擴(kuò)大黑果枸杞野生資源面積，還可起到環(huán)境治理的目的。在推廣黑果枸杞人工種植方面，應(yīng)提倡黑果枸杞組培苗工廠化生產(chǎn)，以降低黑果枸杞組培苗生產(chǎn)成本，促進(jìn)其應(yīng)用面積，保護(hù)野生資源。

通過本研究，初步得出黑果枸杞組培苗最佳初代培養(yǎng)基是MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L+30mg/g蔗糖+6mg/g瓊脂，達(dá)到83.3%的萌芽率；最有利于不定芽增殖的繼代培養(yǎng)基是MS+6-BA0.5mg/L +NAA 0.1 mg/L+30mg/g蔗糖+6mg/g瓊脂，培養(yǎng)30d，芽增殖系數(shù)達(dá)3.63；最佳生根培養(yǎng)基1/2MS+ NAA 0.1mg/L+IBA 0.1 mg/L+15mg/g蔗糖+6mg/g瓊脂，24d開始生根，30d可產(chǎn)生10～30條不定根，生根率達(dá)到100%。