拜克力·米吉提
(新疆阿克蘇地區(qū)庫(kù)車(chē)縣北山牧場(chǎng)公路動(dòng)物檢查消毒站,新疆庫(kù)車(chē) 842000)
口蹄疫病毒對(duì)酸、堿特別敏感。在pH3時(shí),瞬間喪失感染力,pH5.51s內(nèi)90%被滅活;1~2%氫氧化鈉或4%碳酸氫鈉液1min內(nèi)可將病毒殺死。-70~-50℃病毒可存活數(shù)年,85℃1分鐘即可殺死病毒。牛奶經(jīng)巴氏消毒(72℃15min)能使病毒感染力喪失。在自然條件下,病毒在牛毛上可存活24日,在麩皮中能存活104日。紫外線(xiàn)可殺死病毒,乙醚、丙酮、氯仿和蛋白酶對(duì)病毒無(wú)作用。
主要是口、鼻、蹄、乳頭等部位出現(xiàn)水泡。發(fā)泡初期,牛有流涎癥狀,豬、羊表現(xiàn)跛行。
羊的潛伏期為2~8d。癥狀輕微,不易被察覺(jué)??谇徽衬?、舌上時(shí)有水泡,但較小,有米粒至豆粒大小。蹄部病變和牛相似,發(fā)生水泡時(shí)表現(xiàn)跛行。
水泡皮(液)、O/P液、血液樣品。
選采新鮮、成熟、未破裂或剛破不久的水泡皮,陳舊、結(jié)痂或腐敗變質(zhì)的殘破水泡皮不好用,甚至不能用。
牛樣應(yīng)采取舌表面的水泡皮,在水泡尚未破潰或剛破潰時(shí),牛的口中少量流涎或不流涎,這是采集病料的最佳時(shí)機(jī)。
豬樣應(yīng)采取蹄叉部、蹄冠部或鼻鏡部的水泡皮,不要采取蹄踵部角質(zhì)化表皮。
羊的水泡材料較難采集,水泡通常小而分散,需要仔細(xì)尋找。
采取水泡皮時(shí)應(yīng)盡量保持無(wú)菌,用消毒剪子剪下水泡皮后,置入無(wú)菌小瓶中,加入由等量甘油和0.04mol/L磷酸鹽緩沖液(pH7.2~7.6)配制成的運(yùn)輸液中,可加入適量抗生素。加蓋及用膠帶封口,帖上標(biāo)簽,-20℃下保存。水泡皮樣品每份至少1~2g。
用消毒過(guò)的注射器從未破潰水泡中吸出水泡液,水泡液應(yīng)清亮透明,裝入滅菌瓶中,(可加入適量的抗生素,如青霉素1000IU/ml,鏈霉素1mg/m1),加蓋后用膠帶封口,貼上標(biāo)簽,冷藏保存。
O/P液是動(dòng)物食道/咽部刮取的粘膜樣品。用于查明牛、羊等反芻動(dòng)物感染FMD及持續(xù)帶毒狀況。
采樣前禁食12h(可飲水)。食道探杯使用前用2% NaOH溶液浸泡消毒3~5min,再用清水沖洗后使用。采到的樣品應(yīng)立即冷凍保存。
在0.04mol/LPBS 緩沖液中按每升加1%酚紅2ml,樣品保存液pH值一定要在7.2~7.6之間。
無(wú)菌采取動(dòng)物血液10~15ml,分離血清(每頭動(dòng)物不少于2m1),分裝入兩個(gè)滅菌的離心管里。加蓋、封口并貼上標(biāo)簽,編號(hào),置于4℃保存或凍結(jié)保存,但不能反復(fù)凍融,否則抗體效價(jià)下降。包裝:與水泡皮/水泡液樣品的方法相同。
診斷方法及免疫監(jiān)測(cè)。
口蹄疫的實(shí)驗(yàn)室診斷主要是病原學(xué)診斷和抗體檢測(cè)兩個(gè)方面。
(1)補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn);
(2)RT-PCR 試驗(yàn);
(3)反向間接血凝試驗(yàn);
(4)間接夾心ELISA。
平時(shí)要積極預(yù)防、加強(qiáng)撿疫,常發(fā)地區(qū)要定期注射口蹄疫疫苗。常用的疫苗有口蹄疫弱毒疫苗、口蹄疫亞單位苗和基因工程苗,牛在注射疫苗后14d產(chǎn)生免疫力,免疫力可維持4~6個(gè)月。
(1)嚴(yán)格執(zhí)行衛(wèi)生防疫制度,保持牛床、牛舍的清潔、衛(wèi)生;糞便及時(shí)清除;定期用2%苛性鈉對(duì)全場(chǎng)及用具進(jìn)行消毒。
(2)加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,保持牛舍清潔、通風(fēng)、干燥、衛(wèi)生,平時(shí)減少機(jī)體的應(yīng)激反應(yīng)。
(3)強(qiáng)化日常消毒工作,圈舍、場(chǎng)地和用具以2%的火堿或10%的石灰乳,堅(jiān)持每?jī)商煜疽淮?,糞便進(jìn)行堆積發(fā)酵處理。
(4)加強(qiáng)檢疫制度,保證牛群健康。不從病區(qū)引購(gòu)牛只,不把病牛引進(jìn)入場(chǎng)。為防止疫病傳播,嚴(yán)禁羊、豬、貓、犬混養(yǎng)。
(5)定期接種口蹄疫疫苗。
(6)注射血清抗體天健牛毒清做緊急預(yù)防,可有效的預(yù)防該病。
(7)病牛一旦確診為口蹄疫,要及時(shí)隔離病牛、并及時(shí)進(jìn)行治療。