馬妍

摘要：本文從菌株生長和生理代謝兩個側(cè)面探討楊樹爛皮病菌對多菌靈脅迫的響應(yīng)，探究多菌靈對引起楊樹爛皮病的病原菌的抑菌機理。結(jié)果表明，多菌靈無論在生長和生理代謝層面，均對楊樹爛皮病菌有較好的抑制作用，且多菌靈對楊樹爛皮病菌的抑制作用主要體現(xiàn)在蛋白質(zhì)的代謝。本研究可以為多菌靈科學(xué)防治楊樹爛皮病提供科學(xué)依據(jù)。

關(guān)鍵詞：多菌靈;楊樹爛皮病;防治

楊樹是我國地域分布最為廣泛的造林樹種，隨著楊樹栽植的面積不斷擴大，楊樹爛皮病的發(fā)生逐漸呈現(xiàn)出上升的趨勢，長此以往會造成新營造的楊樹純林大面積死亡，給林業(yè)生產(chǎn)和生態(tài)建設(shè)帶來巨大的阻礙。楊樹爛皮病病原菌為子囊菌亞門核菌綱的污黑腐皮殼菌。值得注意的是，該病為典型的寄主主導(dǎo)型病害，病原菌為弱寄生菌，只可以寄生在生長不良或受日灼傷、凍傷以及受到機械損傷的樹木，因此給防治帶來相當大的困難。

隨著現(xiàn)代林業(yè)的發(fā)展，化學(xué)農(nóng)藥（殺菌劑或殺蟲劑）的使用量已在逐年降低。但當某種病害或蟲害大發(fā)生大流行的時候，化學(xué)防治依然是最能夠立竿見影的防治措施，故不可廢除。

本研究將常用的殺菌劑多菌靈作為研究對象，研究其對污黑腐皮殼菌的防治效果，并初步探討其抑菌機理。旨在為更好、更科學(xué)地研制楊樹爛皮病防治藥劑提供理論依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 菌株來源

污黑腐皮殼菌分離自沈陽市區(qū)行道樹感病楊樹。

1.2 供試藥劑

多菌靈50%可濕性粉劑（山東德州大成農(nóng)藥有限公司）。

1.3 多菌靈對病原菌生長的影響

在無菌條件下，將多菌靈藥劑配成多個不同的藥劑濃度PDA培養(yǎng)基平板。濃度設(shè)定為：100、200、1000和2000毫克/升。用無菌打孔器打取直徑為5毫米的菌片，接于含藥劑培養(yǎng)基中央，置于25℃恒溫箱中黑暗培養(yǎng)，以加入清水的培養(yǎng)基作為對照，每處理5次重復(fù)。培養(yǎng)后每天采用十字交叉法測量菌落直徑，連續(xù)測量5天。試驗結(jié)束時，計算出各處理菌絲生長的平均直徑。

1.4 多菌靈對病原菌生理代謝的影響

室溫下，將菌片分別用相應(yīng)濃度的多菌靈浸泡2小時，以無菌水浸泡菌絲體作為對照，每個處理3次重復(fù)。

采用考馬斯亮藍G250法測定可溶性蛋白，采用硫代巴比妥酸法測定丙二醛（MDA）。

2 結(jié)果與分析

2.1 多菌靈對病原菌生長的影響

如圖1所示，污黑腐皮殼菌在各殺菌劑濃度培養(yǎng)基中生長均接近“J”型曲線，接種1天后，除1000和2000毫克/升處理組的菌株未生長外，其他各組處理均進入生長期。實驗開始時，至培養(yǎng)第5天時，對照組長至68毫米，為各處理組直接最大的，兩組高濃度處理（1000和2000毫克/升）也出現(xiàn)一定的生長現(xiàn)象。該試驗結(jié)果表明，多菌靈對污黑腐皮殼菌的生長存在一定的抑制作用。

2.2 多菌靈對病原菌生理代謝的影響

通過觀察，研究結(jié)果如圖2和圖3所示。本研究當中，不同濃度的多菌靈對污黑腐皮殼菌菌絲細胞均有不同程度的破壞作用。其中可溶性蛋白含量隨著多菌靈濃度的升高而含量降低，而MDA含量則是隨著多菌靈濃度的升高而升高。該結(jié)果表明，表明菌絲細胞在受到殺菌劑脅迫時，會通過提高自身細胞可溶性蛋白含量來增大細胞對于不良環(huán)境的抗性，但細胞膜依然受到破壞，膜脂化加劇，產(chǎn)生大量的MDA。

3 結(jié)論與討論

本文對污黑腐皮殼菌響應(yīng)多菌靈的脅迫問題，分別在菌株生長和生理代謝兩個層面進行了系統(tǒng)的研究，并初步探討了多菌靈對污黑腐皮殼菌的抑菌機理。研究發(fā)現(xiàn)，多菌靈無論在生長和生理代謝層面，均對污黑腐皮殼菌有較好的抑制作用。

楊樹爛皮病又稱楊樹腐爛病、楊樹潰瘍病，其病程較為復(fù)雜，發(fā)病隱蔽，且發(fā)病率高，容易造成楊樹林的成片死亡，給現(xiàn)代林業(yè)帶來嚴重的經(jīng)濟損失。該病自發(fā)現(xiàn)以來，一直是農(nóng)林業(yè)生產(chǎn)的重點防治對象。林業(yè)生產(chǎn)上慣用的做法是，在林木發(fā)病之前，及時做好藥物保護，往往會收到較為理想的防治效果。多菌靈為廣譜性殺菌劑，由于其良好的殺菌效果，被廣泛的應(yīng)用于農(nóng)林業(yè)的苗圃當中。通過本研究，從菌株生長和生理代謝兩個層面可以得出結(jié)論：多菌靈對污黑腐皮殼菌的抑制作用主要體現(xiàn)在蛋白質(zhì)的代謝并造成病原菌的細胞膜脂化，給細胞帶來破壞，進而起到殺菌作用。