馬 妍
(遼寧省林業(yè)發(fā)展服務(wù)中心,遼寧 沈陽 110001)
楊樹是我國地域分布最為廣泛的造林樹種,隨著楊樹栽植的面積不斷擴(kuò)大,楊樹爛皮病的發(fā)生逐漸呈現(xiàn)出上升的趨勢,長此以往會造成新營造的楊樹純林大面積死亡,給林業(yè)生產(chǎn)和生態(tài)建設(shè)帶來巨大的阻礙。楊樹爛皮病病原菌為子囊菌亞門核菌綱的污黑腐皮殼菌。值得注意的是,該病為典型的寄主主導(dǎo)型病害,病原菌為弱寄生菌,只可以寄生在生長不良或受日灼傷、凍傷以及受到機(jī)械損傷的樹木,因此給防治帶來相當(dāng)大的困難。
隨著現(xiàn)代林業(yè)的發(fā)展,化學(xué)農(nóng)藥(殺菌劑或殺蟲劑)的使用量已在逐年降低。但當(dāng)某種病害或蟲害大發(fā)生大流行的時候,化學(xué)防治依然是最能夠立竿見影的防治措施,故不可廢除。
本研究將常用的殺菌劑多菌靈作為研究對象,研究其對污黑腐皮殼菌的防治效果,并初步探討其抑菌機(jī)理。旨在為更好、更科學(xué)地研制楊樹爛皮病防治藥劑提供理論依據(jù)。
污黑腐皮殼菌分離自沈陽市區(qū)行道樹感病楊樹。
多菌靈50%可濕性粉劑(山東德州大成農(nóng)藥有限公司)。
圖1 多菌靈對污黑腐皮殼菌生長的影響
圖2 多菌靈對污黑腐皮殼菌可溶性蛋白含量的影響
圖3 多菌靈對污黑腐皮殼菌MDA含量的影響
在無菌條件下,將多菌靈藥劑配成多個不同的藥劑濃度PDA培養(yǎng)基平板。濃度設(shè)定為:100、200、1000和2000毫克/升。用無菌打孔器打取直徑為5毫米的菌片,接于含藥劑培養(yǎng)基中央,置于25℃恒溫箱中黑暗培養(yǎng),以加入清水的培養(yǎng)基作為對照,每處理5次重復(fù)。培養(yǎng)后每天采用十字交叉法測量菌落直徑,連續(xù)測量5天。試驗(yàn)結(jié)束時,計算出各處理菌絲生長的平均直徑。
室溫下,將菌片分別用相應(yīng)濃度的多菌靈浸泡2小時,以無菌水浸泡菌絲體作為對照,每個處理3次重復(fù)。
采用考馬斯亮藍(lán)G 2 5 0法測定可溶性蛋白,采用硫代巴比妥酸法測定丙二醛(MDA)。
如圖1所示,污黑腐皮殼菌在各殺菌劑濃度培養(yǎng)基中生長均接近“J”型曲線,接種1天后,除1000和2000毫克/升處理組的菌株未生長外,其他各組處理均進(jìn)入生長期。實(shí)驗(yàn)開始時,至培養(yǎng)第5天時,對照組長至68毫米,為各處理組直接最大的,兩組高濃度處理(1000和2000毫克/升)也出現(xiàn)一定的生長現(xiàn)象。該試驗(yàn)結(jié)果表明,多菌靈對污黑腐皮殼菌的生長存在一定的抑制作用。
通過觀察,研究結(jié)果如圖2和圖3所示。本研究當(dāng)中,不同濃度的多菌靈對污黑腐皮殼菌菌絲細(xì)胞均有不同程度的破壞作用。其中可溶性蛋白含量隨著多菌靈濃度的升高而含量降低,而MDA含量則是隨著多菌靈濃度的升高而升高。該結(jié)果表明,表明菌絲細(xì)胞在受到殺菌劑脅迫時,會通過提高自身細(xì)胞可溶性蛋白含量來增大細(xì)胞對于不良環(huán)境的抗性,但細(xì)胞膜依然受到破壞,膜脂化加劇,產(chǎn)生大量的MDA。
本文對污黑腐皮殼菌響應(yīng)多菌靈的脅迫問題,分別在菌株生長和生理代謝兩個層面進(jìn)行了系統(tǒng)的研究,并初步探討了多菌靈對污黑腐皮殼菌的抑菌機(jī)理。研究發(fā)現(xiàn),多菌靈無論在生長和生理代謝層面,均對污黑腐皮殼菌有較好的抑制作用。
楊樹爛皮病又稱楊樹腐爛病、楊樹潰瘍病,其病程較為復(fù)雜,發(fā)病隱蔽,且發(fā)病率高,容易造成楊樹林的成片死亡,給現(xiàn)代林業(yè)帶來嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。該病自發(fā)現(xiàn)以來,一直是農(nóng)林業(yè)生產(chǎn)的重點(diǎn)防治對象。林業(yè)生產(chǎn)上慣用的做法是,在林木發(fā)病之前,及時做好藥物保護(hù),往往會收到較為理想的防治效果。多菌靈為廣譜性殺菌劑,由于其良好的殺菌效果,被廣泛的應(yīng)用于農(nóng)林業(yè)的苗圃當(dāng)中。通過本研究,從菌株生長和生理代謝兩個層面可以得出結(jié)論:多菌靈對污黑腐皮殼菌的抑制作用主要體現(xiàn)在蛋白質(zhì)的代謝并造成病原菌的細(xì)胞膜脂化,給細(xì)胞帶來破壞,進(jìn)而起到殺菌作用。