謝 娟，景孌戀

（湖北省漢川市人民醫(yī)院腫瘤科，湖北 漢川432300）

肺癌是全球癌癥相關(guān)死亡的主要原因，非小細(xì)胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）占所有肺癌病例的近85%［1］。臨床研究表明，氟脲苷對幾種實體瘤具有抗腫瘤作用，包括乳腺癌、結(jié)腸直腸癌、胃癌、非小細(xì)胞肺癌和胰腺癌［2］。QIU等［3］發(fā)現(xiàn)成熟miR-499序列中的rs3746444T／C多態(tài)性可能通過調(diào)節(jié)癌癥相關(guān)基因的表達(dá)而導(dǎo)致預(yù)后不良。ZHANG等［4］發(fā)現(xiàn)miR-328在肺癌患者血清中呈現(xiàn)高表達(dá)的狀態(tài)。耿紀(jì)群等［5］通過meta分析發(fā)現(xiàn)高血清HE4水平是肺癌患者預(yù)后不良的標(biāo)志，尤其是在亞洲肺癌患者中。CEA（serum carcinoembryonic antigen）在晚期非小細(xì)胞肺癌血清中表達(dá)異常［6］。WANG等［7］發(fā)現(xiàn)NSCLC患者血清POTEE水平與TNM分期有關(guān)，是潛在的預(yù)后因素。基于此，本研究選取2017年2月至2018年2月我院收治的晚期非小細(xì)胞肺癌患者33例采用氟脲苷聯(lián)合化療治療，旨在探究氟脲苷聯(lián)合化療治療晚期非小細(xì)胞肺癌對患者血清中miR-328、miR-499、HE4、CEA和POTEE水平的影響。

材料和方法

1 一般資料

選取2017年2月至2018年2月我院收治的晚期非小細(xì)胞肺癌患者66例為研究對象，其中，男性36例，女性30例；年齡27到69歲，平均年齡46.2±7.5歲。腫瘤TNM分期Ⅲ期患者25例，Ⅳ期患者41例。其中鱗癌34例，腺癌32例。所有患者均經(jīng)病理科和影像學(xué)診斷為晚期非小細(xì)胞肺癌。所有患者基本資料差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。本研究經(jīng)過本院倫理委員會批準(zhǔn)，且所有患者均簽署知情同意書。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①同時患有其他器官癌癥的患者。②對本研究所用藥物過敏的患者。③本研究前接受過藥物或手術(shù)治療的患者。④同時患有精神疾病的患者。

2 分組

將患者隨機(jī)分為對照組和治療組，每組各33例。對照組中男14例，女19例；年齡32～69歲，平均51.2±3.4歲；其中鱗癌13例，腺癌20例；治療組中男22例，女11例；年齡27～61歲，平均41.0±3.7歲；其中鱗癌21例，腺癌12例。兩組人員在年齡、家族史、性別、身高體重、組織學(xué)類別等差異無統(tǒng)計學(xué)意義，具有可比性。

制度性章程一旦建立，政府只負(fù)責(zé)執(zhí)行合作章程、維持市場秩序等問題的處理，轉(zhuǎn)型為市場服務(wù)，具體市場實務(wù)一般不需過問[8]?！包S金周”長假對旅游企業(yè)的沖擊僅是旅游業(yè)面臨的眾多不穩(wěn)定因素之一，為保障旅游企業(yè)在遇到?jīng)_擊時能有效運營，成本支出的增加得到控制，需要建立企業(yè)協(xié)調(diào)合作機(jī)制。旅游企業(yè)間、行業(yè)間的合作及協(xié)調(diào)此時變?yōu)橹黧w，提高企業(yè)競爭力、共享資源、降低交易費用、降低成本、聯(lián)合開發(fā)客源市場和旅游精品等是旅游企業(yè)間開展合作的目標(biāo)性動因。企業(yè)協(xié)調(diào)機(jī)制包括不同發(fā)展策略下的企業(yè)間和企業(yè)內(nèi)外部協(xié)調(diào)方式。

3 藥物和治療方法

所有患者在第1和第8天均給予注射用鹽酸吉西他濱（江蘇豪森藥業(yè)集團(tuán)有限公司生產(chǎn)，規(guī)格：1.0g）1000mg／m2，1次／d。此外，所有患者在第1天至第5天靜脈滴注順鉑（江蘇豪森藥業(yè)集團(tuán)有限公司生產(chǎn)，規(guī)格：6mL：20mg×5瓶）75mg／m2，1次／d。治療組在此基礎(chǔ)上，在第1天至第5天靜脈滴注氟脲苷（廣東嶺南制藥有限公司生產(chǎn)，規(guī)格：0.25g）1500mg／m2，1次／d。兩組均連續(xù)治療21 d。化療期間給予止嘔及其他對癥處理。

完全緩解（CR）：患者病灶消失；部分緩解（PR）：患者病灶消失 ＞30%；穩(wěn)定（SD）：患者病灶介于緩解與惡化之間；進(jìn)展（PD）：病灶進(jìn)展＞20%，或已轉(zhuǎn)移?？陀^緩解率（ORR）＝（CR＋PR）／總例數(shù)。疾病控制率（CBR）＝（CR＋PR＋SD）／總例數(shù)。

4 臨床療效評價

水泥：通常用于GRC中的水泥主要有快硬硫鋁酸鹽水泥、低堿度硫鋁酸鹽水泥、普通硅酸鹽水泥、白色硅酸鹽水泥。泰科石采用的是阿爾博波特蘭水泥，其強(qiáng)度及白度都比普通水泥高。

5 觀察指標(biāo)

治療前，對照組與治療組血清中miR-328、miR-499、HE4、CEA和POTEE的水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。治療后，對照組與治療組血清中miR-328、HE4、CEA和POTEE的水平明顯下降，而miR-499的水平明顯上升；同組治療前后比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。經(jīng)不同治療后，治療組血清中miR-328、HE4、CEA和POTEE的水平較對照組下降的更顯著，而miR-499的水平上的更升顯著，兩組組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表3。

對兩組患者共66例進(jìn)行不良反應(yīng)評價，均無死亡病例產(chǎn)生。33例對照組和33例治療組均未出現(xiàn)肌酐升高、脫發(fā)、耳毒性和周圍神經(jīng)毒性的不良反應(yīng)。相比于對照組，治療組出現(xiàn)的白細(xì)胞減少、血小板降低、惡心和嘔吐均明顯減少，且差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；而兩組出現(xiàn)的貧血、肝功ALT／AST升高、血尿和蛋白尿差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見表4。

5.3 Karnofsky（KPS）評分 采用KPS評分對66例我院收治的晚期非小細(xì)胞肺癌患者進(jìn)行功能狀態(tài)的評分，總分為100分，分?jǐn)?shù)越低，表示患者健康狀態(tài)越差。

統(tǒng)計學(xué)軟件為PRISM 7.0，兩組患者的miR-328、miR-499、HE4、CEA和POTEE指標(biāo)比較采用t檢驗，用表示。臨床治療效果比較選用 χ2檢驗。

6 統(tǒng)計學(xué)處理

5.4 不良反應(yīng)評價 不良反應(yīng)評價應(yīng)用Common Terminology Criteria for Adverse Events（CTCAE v.4.03）［8］進(jìn)行等級評估，分為5個等級，1級（輕度），2級（中度），3級（嚴(yán)重），4級（危機(jī)生命），5級（死亡）。記錄兩組每周的血常規(guī)，血生化肝腎功等情況，并對癥處理。

結(jié) 果

1 兩組臨床療效比較

青年教師是學(xué)校發(fā)展的后備力量，青年教師的專業(yè)發(fā)展決定著學(xué)校的可持續(xù)發(fā)展，這已經(jīng)引起了學(xué)校的足夠重視，具體表現(xiàn)在為青年教師搭建了一系列的平臺和舞臺，比如師徒結(jié)對、課例打磨、校本教研、外出學(xué)習(xí)等.然而，這一切都是基于外部力量的青年教師的被動成長，缺少青年教師對自己專業(yè)成長路徑的自主規(guī)劃和系統(tǒng)梳理，本文在具體實踐的基礎(chǔ)上，試圖從初中青年數(shù)學(xué)教師的視角，借助“教科研+”的主要陣地，自主開展專業(yè)論文寫作為切入點，簡單談幾點體會，不當(dāng)之處，敬請指正.

表1 兩組臨床療效比較

2 兩組KPS評分比較

治療后，對照組和治療組的Karnofsky（KPS）評分均顯著提升，同組治療前后比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。對照組和治療組的Karnofsky（KPS）評分在治療前比較無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），但兩組經(jīng)不同治療后，治療組的Karnofsky（KPS）評分明顯高于對照組，兩組組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表2 兩組KPS評分比較（）

注：與對照組比較，☆P＜0.05；與治療前比較，*P＜0.05

KPS評分治療前 治療后對照組 33 53.89±7.16 70.13±10.47*治療組 33 54.03±7.33 83.27±12.28組別 n／例☆*

3 兩組血清中miR-328、miR-499、HE4、CEA和POTEE的水平比較

5.1 血清中miR-328和miR-499的水平 采取66例我院收治的晚期非小細(xì)胞肺癌患者治療前后的外周血3mL。所有實驗在在取樣后兩小時內(nèi)開始。miR-328和miR-499的SYBR Green miRNA熒光定量PCR試劑盒購自HaiGene公司（貨號：AP01476，AP01564）。miRNA快速提取試劑盒購自HaiGene公司（貨號：B1802）。miRNA反轉(zhuǎn)錄試劑盒購自HaiGene公司（貨號：D1801）。使用miRNA快速提取試劑盒抽取外周血的miRNA。使用miRNA反轉(zhuǎn)錄試劑盒將純化好的總miRNA進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄。再使用miR-328和miR-499 SYBR Green miRNA熒光定量PCR試劑盒在ABI7500儀器上進(jìn)行qPCR反應(yīng)，實驗重復(fù)3次。

表3 兩組血清中miR-328、miR-499、HE4、CEA和POTEE的水平比較（）

表3 兩組血清中miR-328、miR-499、HE4、CEA和POTEE的水平比較（）

注：與對照組比較，☆P＜0.05；與治療前比較，*P＜0.05

組別 觀察時間 miR-328 miR-499 HE4（pmol／L） CEA（ng／mL） POTEE（pg／mL）對照組 治療前 3.16±0.42 0.36±0.08 217.21±21.26 5.41±0.35 327.21±47.18治療后 1.85±0.36* 0.87±0.12* 124.27±13.77* 3.17±0.16* 211.37±22.84*治療組 治療前 3.20±0.49 0.37±0.07 220.85±24.15 5.33±0.42 339.71±58.27治療后 1.32±0.31*☆ 1.09±0.15*☆ 55.23±9.35*☆ 2.84±0.31*☆ 163.95±29.61*☆

4 不良反應(yīng)評價

5.2 血清中HE4、CEA和POTEE的水平 采取66例我院收治的晚期非小細(xì)胞肺癌患者治療前后的外周血3mL，行酶聯(lián)免疫吸附試驗（enzymelinked immunosorbent assay，ELISA）。HE4的ELISA試劑盒購自廈門研科生物技術(shù)有限公司（貨號：XWCEK1908）。CEA的ELISA試劑盒購自帝肯（上海）貿(mào)易有限公司（貨號：RE59101）。POTEE的ELISA試劑盒購自北京華夏遠(yuǎn)洋科技有限公司（貨號：E3654h）。按照試劑盒說明書，大致方法如下：使用前讓所有試劑恒溫到室溫，使用前輕輕混合所有液體試劑。向孔中加入50～100μL制備的標(biāo)準(zhǔn)品和樣品。蓋板并在室溫下孵育2 h。從孔中徹底吸出或傾倒溶液并丟棄液體。使用噴射洗瓶或自動96孔板洗滌器洗滌孔4次。向孔中加入100μL稀釋的檢測抗體。蓋板并在室溫下孵育1 h。從孔中徹底吸出或傾倒溶液并丟棄液體。洗滌4次。向每個孔中加入100μL稀釋的HRP綴合物。蓋上蓋板并在室溫下孵育30 min。從孔中徹底吸出或傾倒溶液并丟棄液體。洗滌4次。每孔加入100μL生色底物。在室溫下在黑暗中顯影30min。每孔加入100μL終止液。孔中的溶液應(yīng)從藍(lán)色變?yōu)辄S色。必須在停止反應(yīng)后30min內(nèi)評估該板。讀取每個孔在450nm和550nm處的吸光度。從450nm值減去550nm值以校正微孔板中的光學(xué)缺陷。使用曲線擬合統(tǒng)計軟件繪制符合標(biāo)準(zhǔn)的四參數(shù)邏輯曲線，然后計算測試樣品的結(jié)果。

對照組完全緩解7例，部分緩解9例，穩(wěn)定8例，客觀緩解率為48.48%，疾病控制率為72.73%；治療組完全緩解9例，部分緩解15例，穩(wěn)定4例，客觀緩解率為72.73%，疾病控制率為84.85%，兩組客觀緩解率和疾病控制率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表4 兩組方案毒副反應(yīng)比較（n）

討 論

肺癌被認(rèn)為是全球癌癥導(dǎo)致死亡的主要原因之一［9］。肺癌的分類基于組織學(xué)特征，主要分為兩種亞型：非小細(xì)胞肺癌（NSCLC），其占85%的肺癌病例，以及小細(xì)胞肺癌（SCLC）；且NSCLC的5年生存率低于15%［10］。氟尿苷是一種細(xì)胞生長抑制劑，通過嘧啶核苷磷酸化酶生物轉(zhuǎn)化為5-氟尿嘧啶，能夠抑制腫瘤細(xì)胞增殖和遷徙［11］?；诖耍疚闹荚谔骄糠遘章?lián)合化療治療晚期非小細(xì)胞肺癌對患者血清NSCLC相關(guān)生化因子水平的影響。本研究中，氟脲苷聯(lián)合化療治療治療后，對照組和治療組的KPS評分均顯著提升（P＜0.05），且治療組的客觀緩解率、疾病控制率和KPS評分均大于對照組（P＜0.05），治療組的不良反應(yīng)顯著降低（P＜0.05）。氟脲苷聯(lián)合化療治療晚期非小細(xì)胞肺癌的客觀緩解率率和疾病控制率分別為72.73%和84.85%。相比于單一的使用鹽酸吉西他濱進(jìn)行化療治療晚期非小細(xì)胞肺癌，氟尿苷聯(lián)合鹽酸吉西他濱治療晚期非小細(xì)胞肺癌具有較好的療效。因此，其為臨床治療晚期非小細(xì)胞肺癌提供了方案選擇。

本文研制的是一種無機(jī)泡沫吸波材料，是利用碎玻璃或火山灰等為主要原材料，在其中添加電磁損耗物質(zhì)，熔融發(fā)泡而成的一種隱身材料，如圖7所示。

ZHANG等［4］發(fā)現(xiàn)miR-328在肺癌患者血清中呈現(xiàn)高表達(dá)的狀態(tài)，而miR-499呈現(xiàn)低表達(dá)的狀態(tài)。最近，一系列流行病學(xué)研究評估了成熟miR-499中rs3746444T／C多態(tài)性與各種人類疾病風(fēng)險和預(yù)后之間的關(guān)聯(lián)［12-14］。本研究中，治療后，對照組與治療組血清中miR-328的水平明顯下降（P＜0.05），而miR-499的水平明顯上升（P＜0.05）。經(jīng)不同治療后，治療組血清中miR-328水平較對照組下降的更顯著，而miR-499的水平上升更顯著（P＜0.05）。ANDO等［15］在評估中認(rèn)為小鼠miR-499對腫瘤生長有抑制作用，提示了miR-499表達(dá)的異常下降是腫瘤發(fā)生發(fā)展的一個重要因素，暗示了miR-499可作為潛在的分子標(biāo)志物和臨床療效指標(biāo)。盡管發(fā)現(xiàn)miR-328在肺癌患者血清中高表達(dá)，且經(jīng)過治療后其表達(dá)水平明顯降低，但是許多研究發(fā)現(xiàn)miR-328能夠靶向不同的基因來促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖和遷移［16］。然而，關(guān)于miR-328的機(jī)制研究未涉及到非小細(xì)胞肺癌，期待進(jìn)一步研究。但是，這并不影響miR-328能作為潛在治療晚期非小細(xì)胞肺癌的臨床療效指標(biāo)。

CEA是參與細(xì)胞黏附的糖蛋白，通常在胎兒發(fā)育期間產(chǎn)生，多項研究表明CEA能促進(jìn)癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移［17］。以前的研究報道了POTEE在腫瘤進(jìn)展中起表觀遺傳調(diào)控作用［18］。在裸鼠中HE4過表達(dá)促進(jìn)了腫瘤生長［19］。因此，HE4、CEA和POTEE均為促腫瘤因子。本研究發(fā)現(xiàn)，經(jīng)過治療后，對照組與治療組血清中HE4、CEA和POTEE的水平明顯下降（P＜0.05）。并且，氟脲苷聯(lián)合化療治療晚期非小細(xì)胞肺癌后患者血清中HE4、CEA和POTEE的水平下降地更明顯（P＜0.05）?；颊哐逯械腍E4、CEA和POTEE生化因子的降低進(jìn)一步證明了氟脲苷聯(lián)合化療治療晚期非小細(xì)胞肺癌具有較好的療效，與前面KPS評分、客觀緩解率和疾病控制率的臨床指標(biāo)相符。提示HE4、CEA和POTEE均可作為潛在的治療晚期非小細(xì)胞肺癌的臨床療效指標(biāo)。根據(jù)不良反應(yīng)評價，相比于對照組，治療組出現(xiàn)的白細(xì)胞減少、血小板降低、惡心和嘔吐均明顯減少，且差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。提示氟脲苷聯(lián)合化療治療方案耐受性好，安全性高。但因本組例數(shù)相對較少，因此需進(jìn)一步加大樣本量獲得更可靠的臨床證據(jù)。

爸爸依然篤定地一步步向前走去，好像沒有什么東西會讓他回頭……可是當(dāng)他走到拐彎處，就在他側(cè)身拐彎的剎那，好像不經(jīng)意似的悄悄回過頭來，很快地瞟了弟弟他們一眼，然后才消失在拐彎處。

綜上所述，氟脲苷聯(lián)合化療具有較好的臨床療效，能夠顯著降低miR-328、HE4、CEA和POTEE的水平，提升miR-499的水平，其耐受性好、安全性高，具有一定的臨床推廣應(yīng)用價值。