韋忠建 陸碧瓊 胡江平

(1賀州學(xué)院旅游與體育健康學(xué)院，廣西 賀州 542800；2廣西民族師范學(xué)院體育學(xué)院)

運(yùn)動(dòng)尤其是有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)延緩機(jī)體衰老有著積極意義，但有氧運(yùn)動(dòng)尤其是長(zhǎng)時(shí)間的低強(qiáng)度有氧運(yùn)動(dòng)很難長(zhǎng)久堅(jiān)持，致使延緩衰老效果無(wú)法長(zhǎng)期保持。而一定強(qiáng)度的間歇性運(yùn)動(dòng)不僅可在間歇時(shí)間消除疲勞、易于堅(jiān)持，且同樣具有良好的延緩衰老效果。喬秀芳〔1〕研究發(fā)現(xiàn)，6 w的間歇性跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)可顯著提高小鼠骨骼肌和心肌抗氧化水平及自由基消除能力。劉曉莉等〔2〕通過(guò)研究也得出相似的結(jié)論。雖然目前已有學(xué)者對(duì)間歇性運(yùn)動(dòng)與衰老關(guān)系進(jìn)行了研究，但研究多集中于無(wú)氧運(yùn)動(dòng)或力竭運(yùn)動(dòng)，而對(duì)于不同強(qiáng)度的間歇性運(yùn)動(dòng)對(duì)延緩衰老效果的比較研究較少。一定強(qiáng)度的有氧間歇性運(yùn)動(dòng)的效果可能更好，且更適合老年人。本文探討不同負(fù)荷強(qiáng)度的間歇性游泳運(yùn)動(dòng)對(duì)衰老小鼠腓腸肌丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性的影響。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 從廣西省動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心購(gòu)買實(shí)驗(yàn)所需的雌性小鼠，3個(gè)月左右，共50只。適宜的溫度和環(huán)境下飼養(yǎng)(溫度25℃左右、濕度50%左右)，自由飲食，所有小鼠食用統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)的飼料。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法 適應(yīng)喂養(yǎng)1 w后， 50只小鼠隨機(jī)分成兩組，一組10只(SIG組)，一組40只(衰老造模組)。SIG組每天注射125 mg/kg的生理鹽水，注射位置為頸背部，注射時(shí)間為6 w；造模組每天在相同的位置和時(shí)間注射相同劑量的D-半乳糖溶液，注射6 w后，所有小鼠眼眶取血制備血清，測(cè)量血清中MDA、SOD的含量。造模結(jié)束后，從40只小鼠隨機(jī)選取比較適合運(yùn)動(dòng)干預(yù)的小鼠30只，分成數(shù)量相等的3組，即衰老對(duì)照組(ACG組)、無(wú)負(fù)重的間歇性游泳組(NWIEG組)、負(fù)重間歇性游泳運(yùn)動(dòng)組(WIEG組)。NWIEG組每天運(yùn)動(dòng)3次，每次運(yùn)動(dòng)時(shí)20 min，每次休息5 min，每周運(yùn)動(dòng)5次，共運(yùn)動(dòng)8 w。WIEG組負(fù)重質(zhì)量(系在尾部)為體重的7%，每天運(yùn)動(dòng)6次，每次運(yùn)動(dòng)3 min，休息3 min，每周5次，共運(yùn)動(dòng)8 w。運(yùn)動(dòng)組在相同的水箱里進(jìn)行游泳，水的深度和溫度保持一致；各組飲食、飲水和生活環(huán)境上保持一致。

1.3 腓腸肌MDA、SOD含量的測(cè)定 血清制備：注射6 w后，小鼠眼眶取血，將血液樣本置于離心機(jī)中，以3 500 r/min離心15 min，然后取血清進(jìn)行測(cè)試。腓腸肌組織勻漿制備：小鼠用乙醚麻醉后，取出腿部的腓腸肌(小鼠均為同一位置的肢體)，用生理鹽水將腓腸肌清洗干凈，再用濾紙將腓腸肌上面的水分吸干凈，然后稱重保存。取出組織，搗碎，取一定數(shù)量放入勻漿機(jī)，按照1∶9的比例〔組織重量(g)：勻漿介質(zhì)(ml)〕加入預(yù)冷的生理鹽水研磨成10%的組織勻漿，以3 500 r/min離心15 min，取上清液，然后進(jìn)行檢測(cè)。試劑盒購(gòu)買于南京建成生物工程研究所，按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。MDA含量測(cè)定采用硫代巴比妥法、SOD活性測(cè)定采用黃嘌呤氧化酶法。

1.4 數(shù)據(jù)處理 采用SPSS17.0軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1 造模前后小鼠形態(tài)特征、體重及MDA含量、SOD活性的變化 在造模前所有的小鼠健康狀況良好，表現(xiàn)為毛色發(fā)亮、無(wú)脫毛現(xiàn)象、精神飽滿、反應(yīng)靈敏迅速、飲食、飲水及排便正常。造模后，SIG組身體狀況無(wú)明顯變化，且體重較注射前明顯增加；而造模組身體出現(xiàn)了明顯變化，主要有毛色暗淡、脫毛、反應(yīng)遲鈍、食欲下降等，表現(xiàn)出明顯的衰老癥狀。造模組體重較造模前顯著增加(P<0.05)，但與SIG組相比卻顯著下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；同時(shí)造模組MDA含量較造模前明顯升高(P<0.01)，而SOD活性較造模前明顯下降(P<0.01)，見(jiàn)表1。

2.2 造模8 w后各組腓腸肌MDA、SOD含量的變化 ACG組8 w后MDA含量較SIG組顯著升高(P<0.05)，而SOD活性較SIG組顯著下降(P<0.05)；NWIEG組8 w后MDA含量較ACG明顯下降(P<0.05)，而SOD活性較ACG組明顯升高；WIEG組8 w后MDA含量較ACG組有所下降，但無(wú)顯著性差異(P>0.05)，而SOD活性較ACG組有所升高，但也無(wú)顯著性差異(P>0.05)，見(jiàn)表2。

表1 造模前后兩組體重、血清MDA、SOD的變化

與注射前比較：1)P<0.05,2)P<0.01;與SIG組比較：3)P<0.05

表2 造模8 w后各組腓腸肌MDA含量和SOD活性

1)與ACG組比較，2)與SIG組比較，3)與NWIEG組比較：均P<0.05

3 討 論

衰老模型的建立作為整個(gè)實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，其成功與否直接關(guān)系到后續(xù)實(shí)驗(yàn)干預(yù)效果。D-半乳糖注射是制作衰老模型的常用手段。注射D-半乳糖所引發(fā)的衰老過(guò)程和機(jī)制與自然衰老較為相似，因此被廣泛應(yīng)用于衰老動(dòng)物模型的建立。作為膜脂過(guò)氧化最重要的產(chǎn)物之一，MDA的大量產(chǎn)生不僅引起蛋白質(zhì)、核酸等生命大分子的交聯(lián)聚合，且還能加劇細(xì)胞膜的損傷，使細(xì)胞的功能顯著下降。SOD作為機(jī)體天然存在的自由基清除因子，具有抗衰老、抑制心腦血管疾病、提高人體免疫功能等作用。但隨著機(jī)體衰老的發(fā)生，MDA含量將不斷增加，而SOD活性逐漸降低。運(yùn)動(dòng)尤其是有氧運(yùn)動(dòng)可提高機(jī)體的抗氧化水平、加速自由基等代謝產(chǎn)物的消除。金雯等〔3〕通過(guò)研究得出，長(zhǎng)期規(guī)律性的游泳運(yùn)動(dòng)(每天1 h)可顯著降低大鼠股四頭肌MDA的含量及使SOD活性顯著升高。李垂坤〔4〕通過(guò)研究也得出，8個(gè)月的游泳運(yùn)動(dòng)(每天1 h)可顯著提高小鼠大腦抗氧化的能力，對(duì)延緩小鼠大腦的衰老有著積極的作用。伍慶華等〔5〕研究得出，易筋經(jīng)運(yùn)動(dòng)可提高老年人SOD活性、降低MDA的含量，延緩衰老。但也有研究認(rèn)為大強(qiáng)度的無(wú)氧運(yùn)動(dòng)同樣能提高機(jī)體的抗氧化水平〔1,2〕。

本研究表明隨著衰老的發(fā)生，機(jī)體自由基產(chǎn)生增多、抗氧化水平不斷下降。無(wú)負(fù)重的間歇性游泳運(yùn)動(dòng)可使小鼠抗氧化能力明顯增強(qiáng)，減少自由基的產(chǎn)生和加快自由基消除速度，而負(fù)重7%(自身體重)的間歇性游泳運(yùn)動(dòng)雖然也能提高小鼠的抗氧化能力及自由基的消除能力，但提高幅度小于無(wú)負(fù)重運(yùn)動(dòng)。小鼠在負(fù)重7%(自身體重)的間歇性游泳運(yùn)動(dòng)可能處于一種輕度的無(wú)氧運(yùn)動(dòng)狀態(tài)，致使MDA、SOD變化幅度有限，這與陸碧瓊〔6〕、魏優(yōu)秀等〔7〕研究結(jié)果基本一致。陸碧瓊〔6〕認(rèn)為，相比于負(fù)重5%(自身體重)的間歇性游泳運(yùn)動(dòng)，無(wú)負(fù)重的間歇性游泳的抗衰老效果更好。

綜上，長(zhǎng)期進(jìn)行無(wú)負(fù)重的間歇性游泳運(yùn)動(dòng)和負(fù)重(7%自身體重)的間歇性游泳運(yùn)動(dòng)對(duì)改善小鼠腓腸肌MDA含量及SOD活性都有一定的效果，但相比負(fù)重運(yùn)動(dòng)，無(wú)負(fù)重的間歇性運(yùn)動(dòng)效果更好。