范惠玲，劉 秦，白生文，羅 天，朱雪峰，繆純慶

(1.河西學(xué)院 農(nóng)業(yè)與生物技術(shù)學(xué)院,甘肅 張掖 734000;2.張掖市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院,甘肅 張掖 734000)

鹽堿是限制作物生長和生殖的逆境因素之一，鹽堿脅迫下植物因遭受干旱、離子毒害、礦質(zhì)元素缺乏等出現(xiàn)不同程度的鹽害癥狀，如葉片黃化早衰[1]、植株生長速度減緩[2]、籽?；蚬麑嵉钠焚|(zhì)下降[3]，產(chǎn)量大幅度降低[4]，更甚者出現(xiàn)整株死亡現(xiàn)象，對農(nóng)業(yè)生產(chǎn)造成極大危害。中國鹽堿地總面積約0.99億hm2，約占中國國土面積的33%，西北內(nèi)陸地區(qū)是中國鹽堿地主要分布地區(qū)之一[5]，篩選、培育耐鹽作物對改良、利用鹽堿地具有經(jīng)濟和生態(tài)的雙重效益。

蕓芥(ErucasativaMill.)屬十字花科芝麻菜屬，是一種油、飼、藥多用途作物，具有抗旱、抗病蟲害、耐瘠薄和不易落粒等優(yōu)點，在甘肅省中部干旱地區(qū)的隴西、渭源和隴東黃土高原的環(huán)縣、華池、鎮(zhèn)原等地，以及岷縣、卓尼等降雨稀少、土壤貧瘠乏力且鹽漬度較高地區(qū)有較大的種植面積。開展蕓芥種質(zhì)資源的耐鹽性鑒定和耐鹽種質(zhì)的篩選，對蕓芥及其近緣植物油菜品種改良、促進鹽堿地蕓芥栽培均具有重要的現(xiàn)實意義。近年來，圍繞麥類作物[6]、豆類作物[7]、油料作物[8]、牧草類[9]、玉米[10]、黍稷[11]、高粱[12]等作物耐鹽性的鑒定和耐鹽品種的篩選等方面已開展了很多研究。Hilda等[13]報道指出，在鹽漬土中蕓芥是一種耐性作物。但是，目前針對蕓芥不同品種對鹽脅迫的形態(tài)-生理響應(yīng)及耐鹽性鑒定等方面的研究進展緩慢，對不同蕓芥資源耐鹽性的差別缺乏定量的綜合評價。作物的耐鹽性屬于數(shù)量性狀，不同作物(或植物)在鹽脅迫下，其形態(tài)特征、生理生化或分子機制發(fā)生一定程度的變化，但不同植物種間和不同品種間，甚至同種不同種質(zhì)材料間其耐鹽性都存在明顯的差異[9]。因此，從現(xiàn)有的種質(zhì)中篩選出耐鹽性強的種質(zhì)材料是植物抗逆雜交育種及基因工程育種的主要手段之一。

在長期的栽培過程中，蕓芥不僅積累了較多的優(yōu)良抗逆基因資源[14]，而且蕓芥不同品種或種間具有較高的遺傳多樣性[15]。本研究以26份蕓芥種質(zhì)為材料，設(shè)置NaCl鹽分梯度的盆栽試驗，測定各種蕓芥種質(zhì)資源苗期的生理和形態(tài)生長指標，利用模糊數(shù)學(xué)隸屬函數(shù)法和相關(guān)分析法對鹽脅迫下蕓芥苗期的形態(tài)及生理指標進行耐鹽性綜合評價，比較不同蕓芥種質(zhì)的耐鹽性差異，探討各指標與耐鹽性之間的關(guān)系，以期為挖掘優(yōu)良耐鹽蕓芥資源提供技術(shù)支持。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

選用26份蕓芥(ErucasativaMill.)，均來自河西學(xué)院農(nóng)業(yè)與生物技術(shù)學(xué)院農(nóng)學(xué)教研室。材料名稱和來源見表1，其中10份為當(dāng)?shù)夭牧希?6份為育成種質(zhì)資源材料。

1.2 蕓芥芽期脅迫試驗

為摸清蕓芥芽期對不同NaCl溶液脅迫的耐受性差異，以26份蕓芥為材料，參照王治江等[4]和劉自剛等[8]的方法并略加修改。取直徑為9 cm的培養(yǎng)皿，洗凈后于80℃烘箱內(nèi)烘12 h，待其恢復(fù)室溫后底部鋪放兩層滅菌濾紙備用。從充分混合的凈種子中，隨機取籽粒飽滿、大小均一的種子，用75%酒精表面消毒，蒸餾水沖洗3～4次，晾干后置于鋪雙層濾紙的培養(yǎng)皿中，每皿50粒種子，均勻排列。分別配置0(CK)、0.2%、0.4%、0.6%、0.8%和1.0% 共 6個濃度梯度的NaCl處理液，向培養(yǎng)皿中加入相應(yīng)處理液8 mL至濾紙水分飽和，每處理設(shè)3個重復(fù)，稱重并記錄各培養(yǎng)皿和種子的總重量后，置于人工氣候箱中發(fā)芽，晝/夜溫度為25℃/20℃，時間為14 h/10 h，光照強度為108 μmol·m-2·s-1，濕度75%。試驗過程中每天采用稱重補水法按時補充水分，以保持培養(yǎng)皿內(nèi)鹽濃度不變，并統(tǒng)計發(fā)芽種子數(shù)(發(fā)芽標準以胚根突破種皮達到種子長為發(fā)芽)。3 d統(tǒng)計發(fā)芽勢，7 d統(tǒng)計發(fā)芽率，并取10株測定胚根長、胚芽長、胚根鮮重、胚芽鮮重。

表1供試材料名稱及來源

Table1Thenameandoriginofmaterialsstudied

編號 No.材料名稱 Name來源 Origin編號 No.材料名稱 Name來源 Origin106蕓87-82 06 yun 87-82育成材料 Breeding material14臨洮蕓芥 Lintao yunjie當(dāng)?shù)夭牧?Local material2張蕓216-1 Zhangyun 216-1育成材料 Breeding material1513蕓芥68-3 13 yunjie 68-3育成材料 Breeding material3渭源蕓芥 Weiyuan yunjie當(dāng)?shù)夭牧?Local material16民樂蕓芥 Minle yunjie育成材料 Breeding material4靜寧蕓芥 Jingning yunjie當(dāng)?shù)夭牧?Local material1713蕓芥76-4 13 yunjie 76-4育成材料 Breeding material513蕓芥75-3 13 yunjie 75-3育成材料 Breeding material18慶陽蕓芥 Qingyang yunjie當(dāng)?shù)夭牧?Local material6天水蕓芥 Tianshui yunjie當(dāng)?shù)夭牧?Local material19卓妮蕓芥 Zhuoni yunjie當(dāng)?shù)夭牧?Local material712蕓芥83-1 12 yunjie 83-1育成材料 Breeding material20隴西蕓芥 Longxi yunjie當(dāng)?shù)夭牧?Local material8岷縣蕓芥 Minxian yunjie當(dāng)?shù)夭牧?Local material2113蕓芥29-5 13 yunjie 29-5育成材料 Breeding material9會寧蕓芥 Huining yunjie當(dāng)?shù)夭牧?Local material2213蕓芥79-2 13 yunjie 79-2育成材料 Breeding material1006蕓 86-y 06 yun 86-y育成材料 Breeding material2313蕓芥8-13 13 yunjie 8-13育成材料 Breeding material1113蕓芥12-6 13 yunjie 12-6育成材料 Breeding material2408張蕓77-2 08 zhangyun 77-2育成材料 Breeding material12永登蕓芥 Yongdeng yunjie當(dāng)?shù)夭牧?Local material2508張蕓6-3 08 zhangyun 6-3育成材料 Breeding material1304靖蕓100-2 04 Jingyun 100-2育成材料 Breeding material2608武蕓3-1 08 wuyun 3-1育成材料 Breeding material

發(fā)芽勢=(3 d內(nèi)發(fā)芽種子數(shù)/總種子數(shù))×100%；

發(fā)芽率=(7 d內(nèi)發(fā)芽種子數(shù)/總種子數(shù))×100%；

發(fā)芽指數(shù)=∑(Gt/Dt)(Gt為第t天的發(fā)芽種子數(shù)，Dt為發(fā)芽天數(shù))。

胚芽、胚根長度和鮮重的測定：發(fā)芽試驗結(jié)束后每個處理分別取10株長勢基本一致且子葉完全展開的胚苗，用蒸餾水洗凈，濾紙吸干水分，用分析天平稱其鮮重。同時，每培養(yǎng)皿隨機取10株胚苗測其芽長、根長。

1.3 蕓芥苗期脅迫試驗

苗期鹽脅迫設(shè)置0.6%和0.8% NaCl的50% Hoagland營養(yǎng)液處理溶液，參照閆旭東[16]的方法并略加修改。培養(yǎng)盒口徑13 cm、高11 cm，同時選擇粒徑為1 mm的蛭石作為培養(yǎng)基質(zhì)。培養(yǎng)盒洗凈晾干，將150 g滅菌的蛭石裝入培養(yǎng)盒中，壓實壓平備用。在盛有蛭石的培養(yǎng)盒中，沿盒壁注入150 mL鹽處理液，對照注入150 mL營養(yǎng)液，將10粒經(jīng)過表面消毒滅菌的蕓芥種子均勻擺放在培養(yǎng)盒中，上覆0.5 cm厚蛭石，壓實壓平。每處理重復(fù)3次(盒)。在溫室大棚中培養(yǎng)。每隔48 h加150 mL營養(yǎng)液。定期觀察出苗及生長情況，于培養(yǎng)第10 d，調(diào)查出苗數(shù)，計算正常種苗率；培養(yǎng)第15 d，從基質(zhì)中小心完整地取出10株幼苗，用清水將根部基質(zhì)洗去，吸水紙輕輕拭干幼苗表面水分。用游標卡尺測量苗高(從分根點到幼苗最高點的距離)和根長(從分根點到最長根部的距離)，并分別稱量地上鮮重(簡稱苗鮮重)和地下鮮重(簡稱根鮮重)。

1.4 耐鹽性評定方法

參照劉敏軒等[11]的方法，采用模糊數(shù)學(xué)隸屬函數(shù)法進行參試蕓芥耐鹽性評價。利用公式X(μ)=(X-Xmin)/(Xmax-Xmin)來計算各測定指標的抗鹽性隸屬函數(shù)值，其中X為某一抗鹽性指標的測定值，Xmax為該指標的最大值，Xmin為最小值。先求出各指標在不同鹽濃度下的隸屬值，再把每一指標在不同鹽濃度下的隸屬值累加求平均值，最后再將各個抗鹽指標的隸屬值累加求總平均值，通過比較26份蕓芥材料抗鹽隸屬值總平均值大小，初步確定其耐鹽性強弱。

通過比較隸屬總平均值大小，篩選耐鹽性排在前、中、后的6份材料，按照1.3中所述的方法對其進行鹽脅迫培養(yǎng)。培養(yǎng)第28 d，從基質(zhì)中取出幼苗，洗凈根部基質(zhì)，自然晾干，觀察各不同材料的生長形態(tài)和鹽害狀況，確認6份蕓芥資源的耐鹽性。

1.5 蕓芥耐鹽生理指標測定

按1.3中所述的苗期脅迫生長試驗條件處理，鹽脅迫濃度分別為0.6%和0.8%。在鹽脅迫處理28 d后剪取同一部位葉片，參照高俊鳳[17]的方法測定可溶性糖、脯氨酸含量和細胞膜相對透性。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

采用Microsoft Office Excel 2003軟件整理試驗數(shù)據(jù)，采用DPS 7.05統(tǒng)計軟件進行方差顯著性分析與LSD (P<0.01)多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 芽期蕓芥對不同濃度鹽脅迫的耐受性差異

從表2中可以看出，隨著鹽濃度的增加，發(fā)芽勢、發(fā)芽率、發(fā)芽指數(shù)、胚根長與胚芽長均呈下降趨勢；在0.2%和0.4%低濃度鹽溶液脅迫下，發(fā)芽率分別為97.33%和82.00%，發(fā)芽指數(shù)分別為99.05和73.31，胚根長分別為為2.72 cm和1.48 cm，胚芽長分別為2.20 cm和1.32 cm。當(dāng)鹽溶液濃度為0.6%時，發(fā)芽率和發(fā)芽指數(shù)分別為51.33%和42.41，胚根長和胚芽長分別為1.01 cm和0.96 cm，當(dāng)脅迫濃度升至0.8%～1.0%時，僅有2%～8%種子能夠萌發(fā)，發(fā)芽指數(shù)為1.09～6.37，因種子幼根或幼芽殘缺、畸形甚至腐爛，屬于不正常發(fā)芽，無法測量胚根和胚芽長度。這些結(jié)果表明≥0.6%的鹽脅迫對蕓芥種子的萌發(fā)、胚根長和胚芽長產(chǎn)生明顯的抑制作用。從表1還發(fā)現(xiàn)，發(fā)芽勢與發(fā)芽率一直保持相等，表明0.2%～1.0%不同濃度鹽脅迫僅僅對供試蕓芥種子發(fā)芽產(chǎn)生抑制作用，并沒有影響種子的發(fā)芽速度或發(fā)芽整齊度。

對不同濃度鹽脅迫下蕓芥發(fā)芽勢、發(fā)芽率、發(fā)芽指數(shù)、胚根長和胚芽長進行方差分析，結(jié)果顯示在同一處理濃度下，發(fā)芽指數(shù)、胚根長和胚芽長與對照間的差異均達顯著水平(P<0.05)；除0.2%之外，在其它濃度處理下，發(fā)芽勢和發(fā)芽率與對照間的差異達極顯著水平(P<0.01)。在本試驗所選擇的脅迫梯度下，0.6%鹽脅迫所造成的蕓苔萌發(fā)抑制率接近50%，0.8%鹽脅迫基本造成了生長的停滯，因此認為這兩個濃度為本試驗條件下鹽脅迫抑制生長的閾值，后續(xù)試驗選擇這兩個濃度進行。

2.2 苗期蕓芥耐鹽性評價

2.2.1 0.6%和0.8%NaCl脅迫下蕓芥正常種苗率、苗高和根長的變化 鹽脅迫下正常種苗率是反映種質(zhì)耐鹽性最直觀的指標，從表3中可以看出，鹽脅迫對參試材料正常種苗率的影響達顯著水平(P<0.05)，隨著鹽脅迫濃度的增加，正常種苗率變小。 在0.6% NaCl脅迫下，正常種苗率平均值為57.62%，26份參試材料中，正常種苗率≥90%的材料有4份，70%≤正常種苗率<90%的材料有2份， 50%≤正常種苗率<70%的材料有9份， 30%≤正常種苗率<50%的材料有9份。當(dāng)鹽脅迫濃度為0.8%時，正常種苗率的平均值為34.45%，僅有7份材料的正常種苗率≥50%。

隨著鹽脅迫濃度的增加，參試材料的苗高呈現(xiàn)下降趨勢。在0.6%NaCl脅迫下，所有材料的平均苗高為0.99 cm，其中有16份材料的苗高≥1 cm, 0.8 cm≤苗高<1 cm的材料有4份。當(dāng)NaCl濃度為0.8%時，所有參試材料的平均苗高為0.77 cm，其中有4份材料的苗高≥1 cm，0.8 cm ≤苗高<1 cm的材料有10份。

由表3可知，鹽脅迫對參試材料根長的影響達顯著水平(P<0.05)，0.6%NaCl溶液脅迫下，所有材料根長的均值為0.69 cm， 7份蕓芥的根長介于0.80～2.34 cm之間；在0.8%NaCl溶液脅迫下，有6份材料的根長大于用0.6%NaCl溶液脅迫下的測定值，但26份試材根長的平均值為0.44 cm，明顯低于用0.6%NaCl溶液脅迫下的均值(0.69 cm)，3份材料根長介于0.88～1.06 cm之間，7份材料根長介于0.00～0.20 cm之間。

2.2.2 不同濃度NaCl脅迫下蕓芥苗鮮重和根鮮重的變化 對不同濃度鹽脅迫下參試材料苗鮮重的測定結(jié)果顯示(表4)，隨著鹽濃度的增加，苗鮮重呈現(xiàn)下降趨勢，且各參試材料間差異達顯著水平(P<0.05)。在0.6%鹽脅迫下，26份材料苗鮮重的均值為0.0244 g，苗鮮重變化范圍為0～0.0371 g， 6份材料的苗鮮重≥ 0.0300 g。 0.0200 g ≤苗鮮重<0.0300 g的材料有15份，其余5份材料的苗鮮重介于0.0000～0.0186 g。在0.8%鹽濃度下，所有材料苗鮮重的均值為0.0176 g，苗鮮重變化范圍為0.0000～0.0247 g，0.0200 g≤苗鮮重<0.0300 g的材料有11份。

從NaCl溶液脅迫對蕓芥根鮮重的影響看，隨著鹽濃度的增加，參試材料的根鮮重顯著降低。當(dāng)NaCl溶液濃度為0.6%時，根鮮重的均值為0.0034 g，4份材料的根鮮重≥0.0050 g，0.0030 g≤根鮮重<0.0050 g的材料有8份，其它材料的根鮮重介于0.0000～0.0029 g之間。當(dāng)NaCl溶液濃度為0.8%時，根鮮重的均值僅為0.0023 g，3份材料的根鮮重≥ 0.0050 g，0.0030≤根鮮重<0.0050 g的材料有3份；而臨洮蕓芥、13蕓芥29-5、13蕓芥79-2和13蕓芥8-13這4份材料在高濃度脅迫下的根鮮重表現(xiàn)出增大的變化特點。

表2 不同濃度NaCl脅迫下芽期蕓芥萌發(fā)情況

注：表中數(shù)字為平均值±標準差；不同小寫字母表示同一指標不同濃度鹽處理間P<0.05水平差異顯著，不同大寫字母表示同一指標不同濃度鹽處理間P<0.01水平差異顯著；“-”代表缺少的數(shù)據(jù)。下同。

Notes: The data in the table are areage ± standard deviation; different lowercase letters indicate significant differences atP<0.05 among treatments; different capital letters indicate significant differences atP<0.01 among treatments; “-” indicates missing data. The same below.

表3 0.6%和0.8%NaCl脅迫下蕓芥的正常種苗率、苗高和根長

表4 0.6%和0.8%NaCl脅迫下蕓芥的苗鮮重和根鮮重/(g·株-1)

2.2.3 供試蕓芥對NaCl脅迫的耐受性評價 利用模糊數(shù)學(xué)隸屬函數(shù)法對26份蕓芥種質(zhì)的正常種苗率、苗高、根長、苗鮮重和根鮮重的隸屬函數(shù)值分別進行計算，求其平均值，根據(jù)平均值的大小將參試材料進行耐鹽性分類(表5)。0.6133≤隸屬值總平均值≤0.7261，屬于耐鹽性較強的材料，包括08武蕓3-1，民樂蕓芥等;0.4274≤隸屬值總平均值≤0.5911,屬于耐鹽性較中等的材料，包括臨洮蕓芥、張蕓216-1等；0.0280≤隸屬值總平均值≤0.3894屬于耐鹽性較弱的材料，包括13蕓芥68-3、13蕓芥76-4等。

圖1所示為耐鹽性不同的6份材料，包括08武蕓3-1和民樂蕓芥(耐鹽性較強)、臨洮蕓芥和張蕓216-1(耐鹽性中等)以及13蕓芥68-3和 13蕓芥76-4(耐鹽性較差)在0.8%NaCl脅迫下的生長狀況及鹽害程度差異，08武蕓3-1和民樂蕓芥的隸屬函數(shù)總平均值較大，各單株在0.8%NaCl脅迫下的長勢也較好，綠色葉片數(shù)目多，未出現(xiàn)明顯的鹽害癥狀；臨洮蕓芥和張蕓216-1在0.8%NaCl脅迫下的長勢變?nèi)?，地上部變短，葉片數(shù)明顯減少，表現(xiàn)出一定的鹽害癥狀，如有些單株的莖基部有黃色葉片，有些單株的邊緣葉干枯，部分葉片上有黃色斑點；13蕓芥68-3和 13蕓芥76-4在0.8%NaCl脅迫下的長勢較差，地上部更短，葉片稀少，表現(xiàn)嚴重的鹽害癥狀，如有些單株整株干枯甚至死亡，所有植株上都有干枯葉片出現(xiàn)，有些葉片呈卷曲狀。后續(xù)試驗以上述6份不同耐鹽性蕓芥為材料進行。

2.3 苗期蕓芥耐鹽生理特性的變化

2.3.1 0.6%和0.8%NaCl脅迫下蕓芥的脯氨酸含量 從圖2中可以看出，隨鹽濃度的升高，所選材料的脯氨酸含量也呈現(xiàn)上升趨勢。在0.6%和0.8%NaCl脅迫濃度下，耐鹽材料民樂蕓芥和08武蕓3-1脯氨酸含量顯著高于其它4份材料(P<0.05)。在0.6%鹽脅迫下，供試蕓芥脯氨酸含量大小排序為：民樂蕓芥>08武蕓3-1>張蕓216-1>臨洮蕓芥>13蕓芥76-4>13蕓芥68-3；在0.8%鹽脅迫下，供試蕓芥脯氨酸含量大小排序為：民樂蕓芥>08武蕓3-1>臨洮蕓芥>張蕓216-1>13蕓芥76-4>13蕓芥68-3。

2.3.2 0.6%和0.8%NaCl脅迫下蕓芥葉片的細胞膜相對透性 不同濃度鹽脅迫下，6份不同耐鹽性蕓芥的細胞膜相對透性見圖3。隨著脅迫濃度的升高，參試材料細胞膜相對透性呈現(xiàn)上升趨勢，尤其是當(dāng)鹽濃度為0.8%時，變化更為明顯。13蕓芥68-3和13蕓芥76-4(耐鹽性較差)的細胞膜相對透性顯著(P<0.05)高于民樂蕓芥和08武蕓3-1 (耐鹽性較強)。供試蕓芥細胞膜相對透性的大小排序為：13蕓芥76-4>13蕓芥68-3>張蕓216-1和臨洮蕓芥>08武蕓3-1>民樂蕓芥；在0.8%鹽脅迫下，供試蕓芥細胞膜相對透性的大小排序為13蕓芥76-4>13蕓芥68-3>張蕓216-1和臨洮蕓芥>08武蕓3-1>民樂蕓芥。

表5 隸屬函數(shù)法評價蕓芥對鹽脅迫的耐受性

A：08武蕓3-1；B：民樂蕓芥；C：臨洮蕓芥；D：張蕓216-1； E：13蕓芥68-3；F：13蕓芥76-4A: 08 wuyun 3-1; B: Minle yunjie; C: Lingtao yunjie; D: Zhangyun 216-1; E: 13 yunjie 68-3; F: 13 yunjie 76-4圖1 6份不同耐鹽性蕓芥在0.8%NaCl脅迫下生長形態(tài)差異Fig.1 Difference in growth morphologic 6 E. sativa with different salt tolerance under 0.8% NaCl stress

2.3.3 0.6%和0.8%NaCl脅迫下蕓芥可溶性糖含量 從圖4可知，隨NaCl濃度的升高，6份材料的可溶性糖含量呈現(xiàn)上升趨勢。在0.6%鹽脅迫下，供試蕓芥可溶性糖含量大小排序為13蕓芥76-4>13蕓芥68-3>張蕓216-1和臨洮蕓芥>08武蕓3-1>民樂蕓芥；在0.8%鹽脅迫下，供試蕓芥可溶性糖含量大小排序為13蕓芥76-4>13蕓芥68-3>張蕓216-1和臨洮蕓芥>08武蕓3-1>民樂蕓芥。

注：圖中小寫字母表示處理內(nèi)差異顯著(P<0.05)，下同。Note: The lowercase letters show significant differences among the treatment (P<0.05), the same below.圖2 0.6%和0.8%NaCl脅迫下不同耐鹽性蕓芥的脯氨酸含量Fig.2 Proline content of 6 E. sativa with different salttolerance under 0.6% and 0.8% NaCl stress

圖3 0.6%和0.8% NaCl脅迫下不同耐鹽性蕓芥葉片的細胞膜相對透性Fig.3 Relative membrane permeability of leaves of 6 E. sativawith different salt tolernace under 0.6% and 0.8% NaCl stress

圖4 0.6%和0.8% NaCl脅迫下不同耐鹽性蕓芥的可溶性糖含量Fig.4 Soluble sugar content of 6 E. sativa with different salttolerance under 0.6% and 0.8% NaCl stress

3 討 論

3.1 模糊數(shù)學(xué)隸屬函數(shù)法適用于蕓芥種質(zhì)耐鹽性的評價

植物的耐鹽性是一個涉及多種代謝途徑的復(fù)雜的適應(yīng)過程，采用單一指標評價其耐鹽程度具有片面性，不能真實客觀地反映植物的耐鹽表現(xiàn)[18]。因此，進行植物耐鹽堿資源評價鑒定時，應(yīng)綜合考慮各個指標對耐鹽性的貢獻，才能更真實地反映所評價資源的綜合耐鹽堿能力。柴媛媛等[19]的研究表明，采用模糊數(shù)學(xué)隸屬函數(shù)法不僅能消除若干指標間的差異，也能夠較準確地評價甜高粱的耐鹽性。劉敏軒等[11]的研究表明，模糊數(shù)學(xué)隸屬函數(shù)法也適用于評價黍稷耐中性混合鹽的能力。本研究采用模糊數(shù)學(xué)隸屬函數(shù)法研究了26份蕓芥資源在不同NaCl鹽脅迫下的耐鹽性，并分析了不同生理指標與耐鹽性的相關(guān)性，認為該方法適用于蕓芥耐鹽性的評價。

3.2 脯氨酸和可溶性糖含量與蕓芥耐鹽性之間均呈正顯著相關(guān)性

迄今為止，已有大量關(guān)于鹽堿脅迫強度與脯氨酸含量變化關(guān)系的文獻報道。在鹽堿等逆境脅迫下，植物體內(nèi)游離脯氨酸含量顯著增加，因此其可作為耐鹽育種的重要生理指標[20]。本研究結(jié)果表明，耐鹽材料的脯氨酸含量顯著高于其它材料，且脯氨酸含量與耐鹽性之間呈顯著正相關(guān)?？扇苄蕴鞘侵匾臐B透調(diào)節(jié)物質(zhì)，在植物遭受逆境時大量合成，以維持細胞內(nèi)滲透勢及保護膜系統(tǒng)的穩(wěn)定性。氯化鈉脅迫會導(dǎo)致植物體內(nèi)可溶性糖含量顯著增加[21]。本研究結(jié)果表明，耐鹽材料的可溶性糖含量顯著高于其它材料，說明可溶性糖含量與耐鹽性之間關(guān)系密切。當(dāng)植物體某一部分處于鹽、堿脅迫下時，細胞膜受到不同程度的破壞，一般來說，細胞膜透性小說明其遭到的破壞程度小，而耐鹽性則較強[22]。本試驗結(jié)果表明，當(dāng)鹽脅迫濃度為0.8%時，耐鹽性較強的材料與耐鹽性較差的材料間細胞膜透性差距較大，說明脯氨酸、可溶性糖和細胞膜透性可以考慮作為鑒定蕓芥幼苗耐鹽性的生理指標。

3.3 26份蕓芥種質(zhì)材料的耐鹽性存在明顯差異

Hilda等[13]的研究發(fā)現(xiàn)，蕓芥伊朗品種耐鹽性較弱，意大利“B-115”品種耐鹽性較強。本試驗表明，26 份蕓芥種質(zhì)在NaCl脅迫下，其耐鹽性差別較大，民樂蕓芥和08武蕓3-1 耐鹽性較強，高濃度鹽脅迫下長勢好、無鹽害癥狀，脯氨酸和可溶性糖含量均較高、質(zhì)膜透性較低；臨洮蕓芥和張蕓216-1耐鹽性居中，高濃度鹽脅迫下長勢變?nèi)?，鹽害程度較輕，脯氨酸和可溶性糖含量低于民樂蕓芥和08武蕓3-1，質(zhì)膜透性卻高于前二者；13蕓芥68-3和13蕓芥76-4的耐鹽性較差，高鹽脅迫下長勢差，受到重度鹽害，脯氨酸和可溶性糖含量均顯著低于其它材料。這些研究結(jié)果證明，同一植物不同栽培類型的耐鹽性存在明顯的差異。

綜上所述，蕓芥游離脯氨酸含量對鹽脅迫敏感，與參試材料耐鹽性呈顯著相關(guān)，可作為衡量蕓芥種質(zhì)耐鹽脅迫能力的重要生理指標之一。另外，本試驗僅探討了單一鹽分脅迫對不同蕓芥材料幼苗生長和部分生理性狀的影響，但實際上西北蕓芥種植區(qū)域的鹽漬土中往往含多種鹽分離子，不同無機離子之間存在著相互作用。同時，植物在不同生長時期、不同環(huán)境下對鹽脅迫的反應(yīng)不同，耐鹽性亦不同。因此，關(guān)于蕓芥在不同生長發(fā)育階段的耐鹽性對比試驗以及在實際鹽堿土壤條件下的耐鹽性狀況尚需進一步研究。