李友英，藍嵐，程川，尼瑪央宗，張康林，賀安祥

（四川省甘孜藏族自治州畜牧業(yè)科學研究所，四川 康定 626000）

四川省甘孜藏族自治州（簡稱甘孜州）是川西北牧區(qū)的重要組成部分，全州轄18個縣，其中石渠、德格、白玉、色達、理塘為五大牧區(qū)縣。牦牛是甘孜州養(yǎng)殖業(yè)的主要品種，牦牛產(chǎn)業(yè)的合理發(fā)展，有利于牧民經(jīng)濟收入的增長[1-3]。牦牛寄生蟲病種類繁多，線蟲、吸蟲、絳蟲、球蟲等腸道寄生蟲較為常見[4]。糞檢法是較為傳統(tǒng)的腸道寄生蟲病檢查方法，方法簡單，易實施，一般不出現(xiàn)假陽性[5]。2018年農(nóng)業(yè)農(nóng)村部向甘孜州下達了動物疫情監(jiān)測與防治任務(wù)，其中包括寄生蟲病監(jiān)測與防治。本研究對甘孜州牦牛常見腸道寄生蟲病的感染情況進行了調(diào)查，旨在摸清該地區(qū)的寄生蟲感染率及感染強度，為該病的綜合防治提供參考依據(jù)。

1 調(diào)查內(nèi)容及方法

1.1 樣品采集 牦牛糞便樣品采自甘孜州石渠、德格、白玉、色達、理塘五大牧區(qū)縣，每個縣選取4個鄉(xiāng)，每個鄉(xiāng)隨機采集50份新鮮糞便樣品，共采集1 000份。樣品來源相關(guān)信息見表1。

方法：早上7：00～8：00，對牦牛排出的新鮮糞便進行采集。戴上PE手套，撥開牦牛新鮮糞便的表面，取中心部分，采集50～100g糞便裝入自封袋中，密封并編號。所有樣品采集完后于4℃冰箱保存，運回實驗室待檢，在12h內(nèi)完成檢測。

表1 樣品采集地信息

1.2 蟲卵檢測

1.2.1 糞便預(yù)處理 從每份樣品中取約20 g糞便，加入1～2倍自來水浸濕，用玻棒充分攪勻，制成混懸液，適量添加自來水，用60目篩過濾到500 mL燒杯中，除去雜質(zhì)，將自來水加滿燒杯攪勻，靜置1 h，棄上清液，留沉淀物備用。

1.2.2 離心沉淀法 在上述糞便預(yù)處理得到的沉淀物中加入2～3倍自來水攪勻，過80目篩，濾入100mL燒杯中充分攪拌。取8 mL混懸液加入10 mL離心管中，加蓋后混勻，2500r/min離心3min，用吸管吸去上清液，保留底層沉淀，加2～3滴自來水重懸，吸取1滴混懸液于載玻片上，加蓋玻片后在10×與40×物鏡下鏡檢。

1.2.3 飽和食鹽水漂浮法 將1.2.2鏡檢剩余的混懸液中加飽和食鹽水8 mL，2 500 r/min離心3min，再用吸管加滿飽和食鹽水至試管口，形成向上的半月面，其上放置蓋玻片，使蓋玻片接觸液面，靜置10～15min后，移開蓋玻片，置于載玻片上，在10×與40×物鏡下鏡檢。

1.3 統(tǒng)計處理 用IBM SPSS Statistics 20對所有數(shù)據(jù)進行方差分析和多重比較。

2 調(diào)查結(jié)果

2.1 牦牛腸道寄生蟲蟲卵形態(tài) 在牦牛糞便蟲卵檢測中，發(fā)現(xiàn)了線蟲、吸蟲、絳蟲及球蟲等幾種腸道寄生蟲蟲卵，經(jīng)形態(tài)學加以鑒別，結(jié)果見圖1。

圖1 幾種蟲卵形態(tài)圖（10×40）

2.2 五個牧區(qū)縣牦牛4種腸道寄生蟲蟲卵的感染率 結(jié)果見表2。從表2分析可得，各個縣不同腸道寄生蟲的感染率均有差異，同一縣不同腸道寄生蟲的感染率也有差異。石渠、德格、白玉、色達、理塘五個牧區(qū)縣的總感染率分別為87.0%、84.5%、72.5%、79.5%、75.0%。各縣的線蟲感染率均較高，顯著高于球蟲的感染率（P＜0.05）。

表2 牦牛4種腸道寄生蟲蟲卵的感染率

2.3 五個牧區(qū)縣牦牛4種腸道寄生蟲蟲卵的感染率比較 結(jié)果見圖2。五個牧區(qū)縣線蟲、吸蟲、絳蟲、球蟲的總感染率分別為54.8%、33.8%、33.5%、18.7%（據(jù)表2計算而得）。其中，線蟲感染率最高，絳蟲與吸蟲次之，球蟲最低。

2.4 五個牧區(qū)縣牦牛4種腸道寄生蟲蟲卵的混合感染情況 結(jié)果見圖3。各縣總體感染率均超過50%（見表2），石渠縣與德格縣的總感染率顯著高于其余三縣（P＜0.05）；總混合感染率為79.7%，主要以單獨感染和兩重感染為主，占總感染率的81.05%。

圖2 牦牛4種腸道寄生蟲蟲卵的感染率比較

圖3 牦牛4種腸道寄生蟲蟲卵的混合感染率

3 討論

3.1 傳統(tǒng)糞檢法的改良 牦牛糞便不同于普通牛糞，雜質(zhì)多且不容易沉淀，鏡檢視野不清晰，容易誤判。本試驗加大了溶解糞便的水量，將20g糞便加水經(jīng)60目篩過濾后，用500mL水溶解，靜置沉淀，再經(jīng)80目篩過濾，結(jié)果得到了較為清晰的視野。

3.2 牦牛體內(nèi)寄生蟲的感染情況 賀飛飛等[5]對青海省興?？h牦牛寄生蟲的流行情況進行調(diào)查，結(jié)果顯示：牦牛體內(nèi)寄生蟲的種類以線蟲、絳蟲、吸蟲、球蟲為主。因此，本次調(diào)查也以線蟲、絳蟲、吸蟲和球蟲這4種常見腸道寄生蟲為調(diào)查對象。結(jié)果表明，五個牧區(qū)縣牦牛腸道寄生蟲的總體混合感染率為79.7%，石渠、德格、白玉、色達、理塘五縣的總感染率分別為87.0%、84.5%、72.5%、79.5%、75.0%；線蟲、吸蟲、絳蟲、球蟲的總感染率分別為54.8%、33.8%、33.5%、18.7%。線蟲感染率低于賀飛飛等[5]報道的青海省興?？h牦牛寄生蟲的感染率；絳蟲感染率高于吉爾格力等[6]報道的新疆和靜縣牦牛寄生蟲的感染率。

五縣總的一重、二重、三重、四重感染率分別為43.1%、21.5%、11.8%、3.3%，可見單獨感染率最高，二重感染率稍高，三重感染率偏低，四重感染率最低。各縣牦牛寄生蟲的混合感染情況均有差異，石渠縣與德格縣的總感染率顯著高于其余三縣（P＜0.05）。

4 調(diào)查結(jié)論

本次調(diào)查顯示，牦牛體內(nèi)以線蟲的感染率最高，絳蟲與吸蟲次之，球蟲最低，感染率均偏高。混合感染主要以單獨感染和兩重感染為主，感染率高，感染強度大。雖然近兩年，政府及當?shù)匦竽莲F醫(yī)部門加強了對牦牛寄生蟲的藥物防治，寄生蟲感染情況有所改善，但是受養(yǎng)殖區(qū)域、養(yǎng)殖方式、傳統(tǒng)習俗等因素影響，防治工作還存在缺少連續(xù)性、各部門協(xié)調(diào)配合不足等問題，導致牦牛體內(nèi)寄生蟲的感染率仍然很高。筆者認為，牦牛寄生蟲防治工作需要因地制宜，科學合理，不斷完善，并必須確保連續(xù)性。