蔣公建，魏世軍，駱世軍，雷元軍，范建彪，符華林

（1.重慶市萬州區(qū)畜牧站，重慶 萬州 404100；2.重慶先鋒動物藥業(yè)有限公司，重慶 萬州 404100；3.重慶市開州區(qū)畜牧獸醫(yī)局，重慶 開州 405400；4.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院獸藥創(chuàng)新制劑工程技術(shù)研究中心，四川 成都 611130）

土霉素是20世紀40年代發(fā)現(xiàn)的四環(huán)素族廣譜抗菌藥物，獸醫(yī)臨床上廣泛用于治療大腸桿菌或沙門氏菌引起的下痢，多殺性巴氏桿菌引起的牛敗血癥、豬肺疫、禽霍亂，支原體引起的牛肺炎、豬氣喘病，血孢子蟲引發(fā)的泰勒焦蟲病以及放線菌病等[1]。土霉素在水中極微溶解，易溶于稀酸和稀堿，故常用其鹽酸鹽。臨床主要劑型有土霉素注射液、片劑、預(yù)混劑、混懸劑等[2-4]。

藥物的起效時間與藥物劑型息息相關(guān)，普通片劑由于崩解時間慢常常導(dǎo)致藥物起效較慢。分散片是一種速釋固體劑型，是指遇水迅速崩解并均勻分散的片劑，可口服或加水分散后飲用，也可咀嚼或含服，主要適用于難溶性藥物及生物利用度較差的藥物。現(xiàn)有的土霉素普通片劑，崩解遲緩，藥物溶出速度慢，生物利用度差，不能滿足臨床需要[4]。本研究將土霉素普通片劑制成分散片，利用分散片能迅速崩解、溶出的特點，解決土霉素內(nèi)服吸收不規(guī)則、不完全的問題，為提高其生物利用度奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 藥品及試劑 土霉素，含量9%，來自石家莊某生化有限公司；羧甲基淀粉鈉（CMS-Na）、微晶纖維素（MCC）、低取代羥丙基纖維素（L-HPC）、聚乙二醇（PEG4000），均購自安徽某藥用輔料有限公司；可溶性淀粉，購自成都某化工公司。

1.2 主要儀器 片劑崩解儀，ZRS-6型智能溶出試驗儀，TDP型單沖壓片機，紫外分光光度計。

1.3 土霉素分散片的制備方法

1.3.1 崩解劑的篩選 影響分散片質(zhì)量的最關(guān)鍵因素是崩解劑的選擇，本研究主要對崩解劑的種類和用量進行了正交優(yōu)化。以可溶性淀粉和糊精按3∶1的比例混合作為填充劑，以10%淀粉漿作黏合劑，以崩解時限為主要檢測指標，對預(yù)試驗篩選的羧甲基淀粉鈉（CMS-Na）、低取代羥丙基纖維素（L-HPC）和微晶纖維素（MCC）三種不同崩解劑進行考察。3種崩解劑的用量范圍分別為：CMS-Na 5%～9%，L-HPC 2%～4%，MCC 10%～20%。然后采取正交設(shè)計對各崩解劑的用量進行優(yōu)化（見表1）。

表1 正交試驗因素水平表

1.3.2 制備步驟 采取濕法制粒壓片的方法制備土霉素分散片[5]，崩解劑采取內(nèi)外加入法。具體制備過程：先稱取處方量的L-HPC、CMS-Na、MCC混合均勻；隨后分別稱取處方量的土霉素原藥、可溶性淀粉、糊精和50%崩解劑混合，加入適量10%淀粉漿，制成松、軟、黏、濕度適宜的軟材，過16目篩制粒，置于60℃干燥箱中烘干15 min；整粒過16目篩，加入潤滑劑聚乙二醇（PEG4000）和剩余的50%崩解劑混合，用單沖壓片機壓片即得到土霉素分散片。

1.4 土霉素分散片的質(zhì)量檢測

1.4.1 崩解時限檢查 按照《中國藥典》附錄XA規(guī)定的崩解時限檢查法[6]，取土霉素分散片各6片，分別置崩解儀吊籃的玻璃管中，溫度為37±1℃，啟動崩解儀，記錄崩解時間。

1.4.2 分散均勻性測定 按照《中國藥典》附錄IA有關(guān)片劑的規(guī)定[6]，分散片還應(yīng)該進行分散均勻性測定，方法：取分散片6片，加入裝有100mL水（水溫控制在15～25℃）的燒杯中，照崩解時限檢查法，選擇篩孔內(nèi)徑為710μm的不銹鋼篩網(wǎng)，振搖3 min，考察分散片是否全部崩解并通過篩網(wǎng)。

1.4.3 片重差異測定 取20片土霉素分散片，精確稱量每片片重，求得平均值，計算片重差異，然后進行統(tǒng)計分析[6]。

1.4.4 脆碎度檢查 按照藥典2015版附錄項下的檢查法進行測定[6]。取若干片分散片，使其總重量約為6.5 g，用吹風(fēng)機吹去脫落的粉末，精密稱重，置圓筒中，轉(zhuǎn)動100次，取出，同法除去粉末，精密稱重，計算減失重量。

1.4.5 溶出度測定 先建立土霉素含量測定方法[4]。精密稱取土霉素0.1 g，用適量稀鹽酸溶解并定容至100mL，得到1mg/mL的溶液，分別移取2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0mL于50mL容量瓶中，用水定容至刻度。以水為空白，在354nm處測定吸光度（A）值，將A值對濃度（C）進行線性回歸，得標準曲線方程：A=0.006874C-0.002389（r=0.9996，n=6）。結(jié)果表明，鹽酸土霉素在29.4～116.7μg/mL濃度范圍內(nèi)，吸光度與濃度呈良好的線性關(guān)系，精密度和回收率良好，可用于土霉素定量。

參考《中國藥典》附錄規(guī)定的方法測定溶出度[6]。以水為溶出介質(zhì)（500 mL），取最優(yōu)處方土霉素分散片和自制土霉素普通片，分別投入溶出度測定儀，設(shè)置溫度為37±0.5℃，轉(zhuǎn)速為75r/min，然后計時，至規(guī)定的取樣時間，每次吸取溶出液10mL（同時補充相同體積、相同溫度的水），立即用0.45μm微孔濾膜過濾（取樣至過濾應(yīng)在30s內(nèi)完成）。取澄清濾液，測定吸光度，并根據(jù)標準曲線計算藥物濃度，然后推算出每片的溶出度。

2 結(jié)果與分析

2.1 崩解劑篩選結(jié)果 分散片與普通片的主要區(qū)別在于崩解時間不一樣，因此本研究主要對崩解劑進行了優(yōu)化，其結(jié)果見表2。采用極差法對不同崩解劑組合的崩解時間進行分析，得出3種崩解劑對崩解時間的影響順序為A＞C＞B，即CMS-Na對崩解時間影響最大，其次是MCC，最后是L-HPC。3種崩解劑的最優(yōu)組合是A3B2C3。

表2 崩解劑篩選正交試驗結(jié)果

驗證試驗：由于最后得到的崩解劑組合并未包括在9次試驗中，故進行了驗證試驗。按處方A3B2C3制備分散片，平行操作3次，結(jié)果3份樣品的崩解時限分別為45、37、41s，平均41s。可見驗證試驗和正交試驗結(jié)果一致，表明該處方穩(wěn)定可行，所制得的三批分散片外觀光潔、完整，在水中崩解快，符合分散片的各項質(zhì)量指標。

2.2 最優(yōu)處方土霉素分散片的質(zhì)量評價

2.2.1 片重差異測定 20片土霉素分散片的片重及平均片重結(jié)果見表3。根據(jù)《中國藥典》規(guī)定的片重差異限度計算各片的片重差異[6]，并判斷各片是否符合規(guī)定。結(jié)果表明，制得的分散片片重差異在-2.810%～2.621%，符合《中國藥典》規(guī)定的“0.3 g以下片劑的片重差異在±7.5%內(nèi)”，說明本研究研制的土霉素分散片片重差異符合要求。

表3 土霉素分散片片重差異分析

2.2.2 分散均勻性測定 結(jié)果顯示：所選取的6片分散片全部在3 min內(nèi)崩解并通過710 μm篩網(wǎng)，符合《中國藥典》規(guī)定[6]。

2.2.3 脆碎度檢查 結(jié)果顯示：所選取的分散片在規(guī)定時間內(nèi)減失重量為0.27%，未檢出斷裂、龜裂和粉碎的藥片，符合藥典規(guī)定。

2.2.4 溶出度測定 按照《中國藥典》附錄XC規(guī)定的方法測定溶出度，計算每個藥片在不同時間點的累積溶出度[6]，繪制分散片和普通片的溶出度曲線（圖1）。從圖1可以看出，土霉素分散片在30min時的累積溶出度已經(jīng)達到85%，而普通片的溶出度僅為55%，分散片的溶出速率明顯大于普通片，更有利于藥物的吸收和療效的發(fā)揮。

圖1 土霉素分散片和普通片的溶出度曲線圖

3 小結(jié)

控制分散片質(zhì)量的主要因素是結(jié)合主藥的性質(zhì)選擇能快速崩解溶出的適宜輔料，崩解劑的種類和量直接影響到分散片的內(nèi)在質(zhì)量[5]。本試驗選擇L-HPC、CMS-Na、MCC三種崩解劑聯(lián)合使用，比單用一種崩解劑效果更好，而且在制備工藝中采用內(nèi)外加法，既有利于崩解，又利于溶出，提高了分散性。

CMS-Na是一種白色無定形粉末，由于分子結(jié)構(gòu)特殊致其在水中容易分散并溶脹，吸水后可膨脹至原體積的300倍，是性能優(yōu)良的崩解劑。MCC具有海綿狀的多孔管狀結(jié)構(gòu)，具有優(yōu)良的填充性和崩解性，常用于調(diào)節(jié)溶出速率。L-HPC具有很大的表面積和孔隙度，所以有很好的吸水速度和吸水量，其吸水膨脹率在500%～700%，崩解后的顆粒較細，利于藥物溶出。

通過以上試驗結(jié)果分析得出，鹽酸土霉素分散片崩解迅速、溶出度高，符合分散片制劑要求，所用輔料價格便宜，且制備工藝簡單，適合工業(yè)化生產(chǎn)，具有良好的開發(fā)利用價值。