宮鵬，張潔

1.安徽醫(yī)科大學(xué) 第一附屬醫(yī)院 高新分院，安徽 合肥 230088；2.安徽省醫(yī)學(xué)科學(xué)研究院，安徽 合肥 230061

朱茯神是朱砂與茯神共同炮制的結(jié)果。朱砂與茯神按照3∶100的比例拌染便制成了朱茯神這味藥。鎮(zhèn)靜安神、清熱解毒、利水，主治心悸失眠、煩躁不寧、健忘、驚悸、瘡癰腫毒、高熱神昏、吐血、視物不明?，F(xiàn)代研究表明，其可治療精神疾患、神經(jīng)性嘔吐、慢性支氣管炎、結(jié)核盜汗、急性菌痢、病毒性心肌炎、面神經(jīng)炎等病。近年來，中藥的質(zhì)量規(guī)范及用藥安全性備受關(guān)注，朱茯神的安全性也遭遇了廣大民眾的質(zhì)疑，因?yàn)橹燔蛏裰泻兄焐斑@種礦物藥，大家質(zhì)疑的焦點(diǎn)就是朱砂中的重金屬元素汞是否會引起中毒。一部分人認(rèn)為[1-3]，含有朱砂的朱茯神在臨床使用時(shí)可能會產(chǎn)生有毒物質(zhì)；另一部分則認(rèn)為[4-6]，臨床使用的朱茯神中，朱砂的量不足以使重金屬蓄積，且臨床使用的溫度也不至于使硫化汞析出汞或者氧化汞等有毒物質(zhì)。因此，本文采用正交試驗(yàn)，以煎煮液中汞元素的含量為指標(biāo)，優(yōu)選朱茯神的最佳煎煮工藝。

1 材料

冷原子吸收測汞儀(上海華光儀器儀表廠)；XT-9900A型智能微波消解儀(上海新拓分析儀器科技有限公司)；XT-9816-Ⅱ型樣品前處理加熱儀(上海新拓分析儀器科技有限公司)。

水飛朱砂、茯神由安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院提供；朱茯神自制；汞標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000 μg·mL-1)(國家有色金屬及電子材料分析測試中心，批號：GSB04-1729-2004)；硫酸、硝酸鉀及其他試劑均為分析純；水為超純水。

2 方法

2.1 正交工藝設(shè)計(jì)

選擇加水倍數(shù)(A)、煎煮時(shí)間(B)、煎煮次數(shù)(C)為考察因素，各因素取3個(gè)水平，因素水平設(shè)置見表1。

表1 因素水平表

2.2 冷原子吸收光譜法測定朱茯神煎煮液中汞元素的含量

2.2.1 汞元素標(biāo)準(zhǔn)儲備液的制備 精密量取汞元素標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000 μg·mL-1)1.0 mL，置100 mL量瓶中，加硝酸-重鉻酸鉀溶液至刻度，搖勻，精密量取0.5 mL，置100 mL量瓶中，加硝酸-重鉻酸鉀溶液至刻度，搖勻，制成50 ng·mL-1的汞標(biāo)準(zhǔn)儲備液(0～5 ℃貯存)。

2.2.2 供試品溶液的制備 精密吸取正交試驗(yàn)1～9號煎煮液各10.0 mL，至消化管中蒸至近干，加硝酸7 mL，按設(shè)定好的程序進(jìn)行微波消解，放涼，蒸至近干后，加水定容至10 mL，搖勻。分別吸取樣品溶液各5.0 mL，置測汞儀的汞蒸氣發(fā)生瓶中，分別加入氯化亞錫溶液1.0 mL，迅速蓋緊瓶蓋，隨后有氣泡產(chǎn)生，立即通過流速為1.0 L·min-1的氮?dú)?，使汞蒸氣?jīng)過氯化鈣干燥管進(jìn)入測汞儀中，從儀器讀數(shù)顯示的最高點(diǎn)測得其吸收值。

2.2.3 汞元素標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 分別精密量取汞標(biāo)準(zhǔn)儲備液0、0.2、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mL置50 mL量瓶中，加硝酸溶液(1～9)稀釋至刻度，搖勻。分別吸取5.0 mL置測汞儀的汞蒸氣發(fā)生瓶中，分別加入氯化亞錫溶液1.0 mL，迅速蓋緊瓶蓋，隨后有氣泡產(chǎn)生，立即通過流速為1.0 L·min-1的氮?dú)?，使汞蒸氣?jīng)過氯化鈣干燥管進(jìn)入測汞儀中，從儀器讀數(shù)顯示的最高點(diǎn)測得其吸收值。然后打開吸收瓶上的氣通閥，將產(chǎn)生的剩余汞蒸氣吸收于高錳酸鉀溶液(50 g·L-1)中，待測汞儀上的讀數(shù)達(dá)到零點(diǎn)時(shí)，進(jìn)行下一次測定，同時(shí)做空白試驗(yàn)。以吸光度值為縱坐標(biāo)，濃度值為橫坐標(biāo)，得標(biāo)準(zhǔn)曲線：Y=0.010 9X+0.000 2，r=0.999 5(n=6)。

2.2.4 精密度試驗(yàn) 取汞元素標(biāo)準(zhǔn)溶液(2.0 ng·mL-1)，連續(xù)測定6次，RSD為1.84%。

2.2.5 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取汞元素標(biāo)準(zhǔn)溶液(2.0 ng·mL-1)，每隔30 min測定一次，共測定6次，RSD為1.87%。

2.2.6 重復(fù)性試驗(yàn) 精密吸取正交試驗(yàn)7號煎煮液10.0 mL，平行6份，依法測定，分別計(jì)算6份樣品溶液的含量，平均含量為390.12 ng，RSD為2.61%。

2.2.7 加樣回收率試驗(yàn) 精密吸取正交試驗(yàn)7號煎煮液5.0 mL，平行9份，至消化管中，分別加汞元素標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，蒸至近干，依法操作，分別計(jì)算汞元素的含量和加樣回收率，結(jié)果見表2。

表2 加樣回收率試驗(yàn)(n=9)

2.2.8樣品的測定 精密吸取9份正交試驗(yàn)煎煮液各10.0 mL，依法操作。將所測定吸光度值帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線中，計(jì)算試樣中的汞含量。

3 結(jié)果與分析

以冷原子吸收光譜法測定煎煮液中汞原子的含量為指標(biāo)，進(jìn)行方差分析，考察不同因素對煎煮結(jié)果的影響有無顯著性差異，結(jié)果見表3～4。

表3 L9(3)4正交試驗(yàn)工藝結(jié)果 ng

表4 方差分析表

注：F0.05(2，2)=19；F0.1(2，2)=9.0。

結(jié)果表明，煎煮液中汞元素的含量，主要和加水量及煎煮次數(shù)相關(guān)，但從篩選的條件看，煎煮液中汞的含量基本都在安全范圍內(nèi)(<1×10-6)。

4 討論

筆者還比較了朱茯神煎煮液直接測定汞含量和微波消解后測定的差異，發(fā)現(xiàn)微波消解后測出的數(shù)據(jù)較直接測定略高。考慮可能是由于部分硫化汞不溶物混懸于煎煮液中，若直接測定，不會產(chǎn)生汞蒸氣，使得測定結(jié)果偏低。而經(jīng)過硝酸處理并微波消解后，轉(zhuǎn)化為可溶性汞，故而測定結(jié)果較直接測定略高。

結(jié)合文獻(xiàn)報(bào)道[7-11]，朱砂中的可溶性汞元素是引起中毒反應(yīng)的主要原因，但通過正交試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，朱茯神煎煮液中的汞元素含量并不是很高，均小于10-6，在安全范圍內(nèi)。因此，只要在煎煮過程中控制加水量和火候，不要煮糊，朱茯神煎煮并不會引起中毒。但長期大劑量服用是否會引起汞元素在體內(nèi)的蓄積，還需要進(jìn)一步的藥理和毒理試驗(yàn)進(jìn)行進(jìn)一步的探討。