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        DNA倍體定量分析在宮頸上皮內病變的準確性研究

        2019-07-12 01:53:22龐國蓮王海兵李生強苗瓊
        中外醫(yī)療 2019年4期
        關鍵詞:宮頸癌

        龐國蓮 王海兵 李生強 苗瓊

        [摘要] 目的 探討DNA倍體定量分析在宮頸上皮內病變的初步篩查中的準確性。 方法 方便收集該院2017年1—12月期間同時進行DNA倍體定量分析且發(fā)現異倍體細胞的和陰道鏡活檢并有明確病理診斷的宮頸上皮內病變的病例800例,分析DNA倍體定量分析的準確性,與陰道鏡活檢的組織病理診斷相比,評價DNA倍體定量檢測作為宮頸上皮內病變的初步篩查手段的準確性。 結果 異倍體細胞為1~2個有564例,其DNA倍體定量分析病例與活檢病理診斷的符合率為84.22%(475/564);異倍體細胞≥3個的有236例,其DNA倍體定量分析病例與活檢病理診斷的符合率為90.25%(213/236)。 結論 DNA倍體定量分析有較高的準確性,是宮頸上皮內病變的初步篩查的一個重要手段。

        [關鍵詞] 宮頸上皮內病變;DNA倍體定量分析;宮頸癌

        [中圖分類號] R711.74;R737.33 ? ? ? ? ?[文獻標識碼] A ? ? ? ? ?[文章編號] 1674-0742(2019)02(a)-0038-03

        [Abstract] Objective To investigate the accuracy of DNA ploidy analysis in the initial screening of cervical intraepithelial lesions. Methods A total of 800 cases of cervical intraepithelial lesions with abundance of ploidy and colposcopic biopsy and clear pathological diagnosis were convenient collected from January to December 2017. The accuracy of quantitative analysis was compared with the histopathological diagnosis of colposcopy biopsy to evaluate the accuracy of DNA ploidy as a primary screening method for cervical intraepithelial lesions. Results There were 564 cases of aneuploid cells in 1-2 cases. The coincidence rate of DNA ploidy analysis and biopsy pathological diagnosis was 84.22% (475/564); 236 cases of aneuploid cells ≥3 cases and the coincidence rate between DNA ploidy quantitative analysis and biopsy pathological diagnosis was 90.25% (213/236). Conclusion The quantitative analysis of DNA ploidy has high accuracy and is an important means for the initial screening of cervical intraepithelial lesions.

        [Key words] Cervical intraepithelial lesion; Quantitative analysis of DNA ploidy; Cervical cancer

        宮頸癌是女性生殖系統中常見的惡性腫瘤之一,威脅著女性的身心健康。第四版宮頸癌診斷與治療指南指出,宮頸癌的發(fā)病率在女性惡性腫瘤中占第二位[1],在西方發(fā)達國家,因為國家的初步篩查,其發(fā)病率已在緩慢下降,而我國女性,特別是農村女性因經濟原因和對宮頸上皮病變疾病的預防意識不足,以及部分青少年女性的早熟和自我保護意識欠缺,發(fā)病率和死亡率還在上升[2]。宮頸癌的發(fā)病病因尚以明確[3],因此可以通過早期篩查,早發(fā)現,早治療來降低發(fā)病率和死亡率,DNA倍體定量分析技術是宮頸癌及宮頸癌前病變篩查比較經濟、簡便、可靠的方法,有研究結果顯示[4],宮頸脫落細胞的DNA倍體定量分析對檢測宮頸上皮內病變有較高的敏感性及特異性,該文方便收集該院2017年1—12月期間同時進行DNA倍體定量分析且發(fā)現異倍體細胞的和陰道鏡活檢并有明確病理診斷的宮頸上皮內病變的病例800例,就DNA倍體定量分析在宮頸上皮內病變的初步篩查中的準確性進行探討,與陰道鏡活檢病理診斷結果相比較,評價DNA倍體定量分析技術作為宮頸癌及宮頸癌前病變的初步篩查手段的意義。

        1 ?資料與方法

        1.1 ?一般資料

        方便收集云南省曲靖市第一人民醫(yī)院病理科婦科送檢DNA倍體定量分析及同時進行陰道鏡活檢且均為DNA倍體定量分析發(fā)現異倍體細胞的800例,年齡22~68歲,平均年齡45歲。且所有患者未曾用過任何藥物治療、避開月經期、不過性生活、不沖洗、無懷孕。

        1.2 ?標本的采集、DNA倍體的制片及分析

        婦科醫(yī)生用陰道擴張器擴開陰道,肉眼直視下將宮頸刷插入宮頸管內在子宮頸黏膜面順時針旋轉3至5圈后脫掉刷頭,將刷頭放入婦科專用的細胞保存液中,擰緊細胞保存液瓶蓋并貼上帶有患者名字的標簽送至病理科,由病理科技術員核對患者信息、接收標本并制片,首先將樣本保存瓶在振蕩器上震蕩5~10 s混勻,用吸管吸取8 mL樣本,加入事先準備好的細胞分離液的上層,1100轉離心2 min,棄上清液,后2 200 r離心5 min,棄上清液,視沉淀大小,用洗瓶向每個離心管中加入1~2 mL緩沖液,在振蕩器上震蕩混勻10~20 s,以完成細胞的沉淀及混勻,然后將沉降倉和預處理載玻片在制片版上固定好,水平放置;用吸管轉移0.5~1 mL細胞懸液至沉降倉中,靜置10 min來完成樣本的沉降,然后在沖洗、固定、由公司配置好的成品染液進行伊紅染色后晾干及封片;片子制備完成后采用全自動細胞 DNA 定量分析系統(麥克奧迪醫(yī)療診斷系統有限公司)對所有的DNA染色玻片進行掃描,每張玻片掃描細胞核數的最低值為5 000個,最高值為12 000個,判定此玻片為合格,全自動細胞 DNA 定量分析系統根據不同細胞核所具有的不同特征參數自動完成細胞分類和計數。

        1.3 ?DNA倍體定量分析結果判定標準及臨床建議

        異倍體細胞≥3個、DNA指數(DI)>2.5 的異倍體細胞或者細胞增殖比例大于細胞總數的10%,建議陰道鏡檢查或活檢;異倍體細胞為1~2個、DNA 指數(DI)>2.5的異倍體細胞或者細胞增殖比例在5%~10% 之間,建議4~6個月復查;無異倍體細胞則可定期進行正常篩查。

        1.4 ?陰道鏡活檢標本的制片及組織病理診斷

        陰道鏡醫(yī)生在陰道鏡下病變處進行4個點的標本采集、95%的酒精或10%的中性福爾馬林固定后送至病理科,由病理科工作人員取材、脫水、包埋、切片、染色及封片。然后由兩名副主任醫(yī)師做病理診斷。宮頸組織病理診斷分為慢性宮頸炎、CINI級(異型細胞局限于上皮的下1/3)、CINII級(異型細胞累及上皮層的下1/3至2/3)、CINIII級(增生的異型細胞超過全層的2/3但還未累及上皮全層)、原位癌(異型增生的細胞累及子宮頸黏膜上皮全層,但病變局限于上皮層內,未突破基膜)和浸潤癌。

        1.5 ?統計方法

        采用SPSS 19.0統計學軟件進行數據分析,以陰道鏡活檢組織的病理診斷為標準,計算DNA倍體定量分析的病例與陰道鏡組織活檢病理診斷的符合率。

        2 ?結果DNA倍體定量分析的準確性

        異倍體細胞為1~2 個有564例,其中活檢病理診斷為慢性宮頸炎的為89例,CINI級的為376例,CINII級的為56例,CINIII級的為43例,發(fā)現宮頸上皮病變的總數為475例,其DNA倍體定量分析病例與活檢病理診斷的符合率為84.22%(475/564);異倍體細胞≥3 個的有236例,其中活檢病理診斷為慢性宮頸炎的有8例,CINI級的有72例,CINII級的有70例,CINIII級或原位癌的有63例,發(fā)現宮頸上皮病變的總數為213例,其DNA倍體定量分析病例與活檢病理診斷的符合率為90.25%(213/236)。

        3 ?討論

        目前早期篩查方法有巴氏涂片法,此方法敏感性及特異性較低,容易漏診和誤診;液基細胞學檢查方法因其取材和制片方法的改進,可以降低漏診率和誤診率,即對宮頸癌及癌前病變的篩查提高了準確率;HPV檢測篩查,主要通過分子生物學技術完成,HPV感染分中-低危險性(導致低級別宮頸鱗狀上皮內病變)和高危險型(導致高級別宮頸鱗狀上皮內病變、宮頸原位癌及浸潤癌);DNA倍體定量分析技術以通過測量細胞核內DNA含量的變化,在大體形態(tài)改變尚不明顯前既可檢測出病變細胞,對宮頸癌及癌前病變做出早期診斷;癌癥屬于染色體疾病,致癌物質和錯誤的有絲分裂可以產生異倍體而引發(fā)腫瘤的發(fā)生,異倍體引起數以千計的基因和他們編碼的蛋白失衡,腫瘤病理學研究顯示[5],細胞癌變時,其細胞核內的DNA結構和含量均會發(fā)生改變,DNA含量增多或出現DNA倍體異常細胞。而有研究顯示[6]宮頸癌是感染疾病,是可預防的疾病,是目前世界上唯一的在早期發(fā)現可以治愈的癌癥,大多浸潤性宮頸癌均有染色體異常改變,DNA異倍體的出現是染色體異常的表現,同時也是一種細胞癌變的特征指標,在CINⅡ、CINⅢ、CIS(原位癌)和浸潤癌病例中分別有59%、84%和87%有異倍體細胞出現;DNA 是細胞生長、分化、繁殖的基礎。每一個體細胞具有46條染色體,可配成 23 對,稱為二倍體,在生理狀態(tài)下,人體絕大多數的細胞處于靜止期,DNA含量固定不變,其DNA指數為1(DI=1),當細胞發(fā)生癌變時,細胞生長繁殖、染色體復制、加倍導致基因發(fā)生丟失、重組、融合、擴增等變化,使得細胞核內DNA 結構和含量也發(fā)生改變?yōu)榉钦扼w細胞。在癌變過程中,先有DNA結構和含量改變,后有細胞形態(tài)學改變,當DI≥2.5時,提示細胞惡變的可能。因此,通過分析細胞核內DNA含量的變化,測定被檢測細胞 DNA 水平,發(fā)現異常DNA 水平細胞,判斷細胞的生理狀態(tài)和病理改變,在形態(tài)改變不明顯前既可檢測出那些病變細胞,實現癌及癌前病變的早期診斷,而且DNA倍體定量分析對宮頸上皮內病變檢查具有簡便、經濟、可靠和減少漏診率的優(yōu)點,較常規(guī)細胞學方法在宮頸癌的早期發(fā)現及診斷方面更有優(yōu)勢,有研究表明[7],宮頸癌的I期治愈率≥90%,0期治愈率為100%,然而,從異倍體早期發(fā)展成惡性腫瘤是一個漫長的過程,因此早期篩查顯得尤為重要,宮頸癌的早期篩查與早期治療是治愈宮頸癌的主要手段,而DNA定量分析技術是宮頸癌早期篩查的重要手段。

        該研究結果顯示,在異倍體細胞為1~2 個的564例中,其DNA倍體定量分析結果與活檢病理診斷結果的符合率為84.22%(475/564);在異倍體細胞≥3 個的236例中,其DNA倍體定量分析結果與活檢病理診斷結果的符合率為90.25%(213/236),此結果說明DNA倍體定量分析結果與活檢病理結果有較高的符合率,其準確性比較可靠,可以作為宮頸上皮內病變的早期較可靠的篩查方法;該研究結果比某些文獻報道的結果[8]:DNA倍體定量分析結果與活檢病理診斷結果的符合率為61.91%要高,此差異可能與標本收集的數量、不同婦科醫(yī)生的取材標本量、不同病理技術人員的制片及DNA倍體定量分析系統參數的設置參數的多少有關。

        綜上所述,DNA倍體定量分析系統具有準確率高、敏感性強、重復性好、簡便經濟、出結果快及減少漏診及誤診率的優(yōu)點,其是一種很好的宮頸癌前病變及早期宮頸癌篩查方法,可作為大規(guī)模應用的一種新方法,結合陰道鏡檢查和病理活檢診斷,可以對宮頸癌前病變及宮頸癌做出早期診斷,能有效的指導宮頸癌的臨床治療,對宮頸癌判斷預后提供幫助,同時對降低宮頸癌的死亡率具有很大的意義。

        [參考文獻]

        [1] ?中國抗癌協會婦科腫瘤專業(yè)委員會.宮頸癌診斷與治療指南[J].中國實用婦科與產科雜志,2018,34(6):613-622.

        [2] ?王雙雙,李惠,唐福婷,等.細胞DNA定量分析及高危型HPV-DNA檢測在宮頸病變篩查中的應用[J].臨床與病理雜志,2017,37(4):791-795.

        [3] ?田玉旺,劉光,周建,等.細胞DNA定量分析技術在宮頸癌及癌前病變早期篩查中的應用價值[J].診斷病理學雜志,2013,20(7):425-428.

        [4] ?張云清,尹香利,韓慧慧.DNA倍體檢測對宮頸癌病灶中癌細胞增殖、侵襲活性的評估價值研究[J].海南醫(yī)學院學報,2018,24(7):789-792.

        [5] ?鐘萍萍,顧依群,王軍,等.DNA定量分析在宮頸癌篩查中的應用[J]. 中華病理學雜志, 2013, 42(7): 469-470.

        [6] ?Palsdottir K,Epstein E.A Pilot Study on Diagnostic Perfor- mance of Contrast-Enhanced Ultra sonography for Detection of Early Cervical Cancer[J]. Ultrasound Med Biol 2018, 44 (8): 1664-1671.

        [7] ?Raspollini MR,Lax SF,McCluggage WG.The central role of the pathologist in the management of patients with cervical cancer:ESGO/ESTRO/ESP guidelines[J].Virchows Arch 2018, 473 (1): 45-54.

        [8] ?余翔,吳春霞.液基細胞學檢查DNA定量分析在宮頸癌早期篩查中的應用研究及意義[J].湖南師范大學學報:醫(yī)學版,2017,14(4):142-144.

        (收稿日期:2018-11-07)

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