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        奶牛場口蹄疫免疫預(yù)防技術(shù)

        2019-07-12 06:48:08
        獸醫(yī)導(dǎo)刊 2019年13期
        關(guān)鍵詞:O型水皰口蹄疫

        口蹄疫(FMD)是由口蹄疫病毒(FMDV)引起的一種急性、熱性、高度接觸傳染性且能快速遠(yuǎn)距離傳播的動(dòng)物疫病。口蹄疫能感染豬、牛、羊等主要經(jīng)濟(jì)動(dòng)物和野生偶蹄動(dòng)物,易感動(dòng)物多達(dá)70余種。發(fā)病動(dòng)物的主要癥狀是精神沉郁、流涎、跛行、臥地,在其口鼻部、蹄部和母畜乳部等無毛部位發(fā)生水皰,水皰破裂后形成潰瘍和瘢痂??谔阋叩陌l(fā)病率高,但大部分成年家畜可耐過。幼畜則經(jīng)常不見癥狀而死,死亡率因病毒的毒力不同而有差異,嚴(yán)重時(shí)可達(dá)100%。口蹄疫可造成巨大經(jīng)濟(jì)損失和社會(huì)影響。該病是世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE)法定報(bào)告的動(dòng)物傳染病之一。我國于2005年5月24日,中國農(nóng)業(yè)部發(fā)布的《動(dòng)物病原微生物分類名錄》(農(nóng)業(yè)部第53號(hào)公告)中,將口蹄疫病毒列為一類動(dòng)物病原微生物??谔阋咭彩恰吨腥A人民共和國進(jìn)境動(dòng)物一、二類傳染病、寄生蟲病名錄》中進(jìn)境動(dòng)物必須檢疫的一類傳染病。

        一、口蹄疫病毒(FMDV)

        口蹄疫病毒屬微RNA病毒科的口瘡病毒屬(包括4種病毒,即牛鼻病毒A、牛鼻病毒B、馬鼻病毒A和口蹄疫病毒),口蹄疫病毒為典型代表毒株,也是人類確認(rèn)的第一個(gè)動(dòng)物病毒病原,開創(chuàng)了病毒學(xué)新紀(jì)元,是研究最深入的動(dòng)物病毒之一。

        1.口蹄疫病毒結(jié)構(gòu)。電子顯微鏡觀察,口蹄疫病毒顆粒呈圓形,表面光滑,直徑為27~30nm(圖1)。病毒粒子無囊膜,呈二十面體對(duì)稱,由蛋白衣殼包裹基因組RNA組成核衣殼。采用X線晶體衍射技術(shù)對(duì)多個(gè)血清型病毒衣殼的精細(xì)結(jié)構(gòu)進(jìn)行了解分析,衣殼由60個(gè)VP1、VP2、VP3和VP4分子組成,其中VP1~VP3位于病毒粒子表面,VP4位于內(nèi)部,并有一個(gè)十四烷基共價(jià)鍵連接到其氨基端。表面結(jié)構(gòu)蛋白VP1、VP2和VP3立體結(jié)構(gòu)相似,是由8個(gè)鏈狀β折疊桶(βB、βC、βD、βE、βF、βG、βH、βI)組成(圖1-a),β折疊桶之間由表面環(huán)結(jié)構(gòu)所連接,表面環(huán)含有病毒重要的表位。例如,VP1的βG和βH之間的GH環(huán)含有口蹄疫病毒最重要的抗原位點(diǎn)和識(shí)別整合素受體的RGD基序。VP1、VP2、VP3和VP4各一個(gè)分子組成一個(gè)原粒(圖1-b,e),相對(duì)沉降系數(shù)為5S,分子量約為8000ku,5個(gè)原粒組成一個(gè)五聚體(圖1-c,f),相對(duì)沉降系數(shù)為14S,浮密度為1.5g/mL,分子量為3.8×106ku,12個(gè)五聚體構(gòu)成完整病毒衣殼。自然培養(yǎng)或采用基因工程方法可以獲得口蹄疫病毒樣顆粒,不含核酸RNA,由VP1、VP3和 VP0(VP2和 VP4前體)組成,沉降系數(shù)為75S,分子量為47×106ku。病毒基因組由大約8400個(gè)核甘酸組成,為正鏈單股RNA分子。病毒衣殼和基因組共同組成完整病毒粒子(圖1-d,g),其表面不像其他微RNA病毒科成員有許多參與病毒——受體結(jié)合的溝或谷,而是相對(duì)比較光滑的球面,表面有一細(xì)小的環(huán)狀或纖突突起,五重軸中心點(diǎn)有一個(gè)小孔,可以允許小分子進(jìn)入病毒顆粒,如二乙烯亞胺(BEI)、氯化銫等可以進(jìn)入病毒顆粒。完整病毒粒子蔗糖密度梯度中的相對(duì)沉系數(shù)為146S,分子量為8.08×106ku,完整病毒顆粒146S(滅活疫苗的抗原)或75S空殼在酸性、堿性或一定溫度條件下降解為12S和5S粒子,降解后小分子(12S、5S)無免疫原性。

        2.口蹄疫病毒的分類。血清型:1922-1953年,德、英、法三國學(xué)者發(fā)現(xiàn)并命名了口蹄疫病毒的7個(gè)血清型即 O、A、C、SAT1、SAT2、SAT3和Asia1型。至20世紀(jì)80年代后期已經(jīng)確定了70~80多個(gè)亞型,其中O型有10~11個(gè)血清亞型,A型大約有32個(gè)血清亞型,C型有5個(gè)血清亞型,Asia1型有3個(gè)血清亞型。隨著新毒株的不斷出現(xiàn),亞型分類越來越混亂,現(xiàn)已放棄亞型分類,采用拓?fù)湫头诸悺M負(fù)湫停涸赗ico-Hesse脊髓灰質(zhì)炎病毒基因分型的基礎(chǔ)上,根據(jù)變異度最大的VP1核酸序列,將同一血清型中關(guān)系密切的一組病毒分為不同拓?fù)湫?,拓?fù)湫投局昃哂忻黠@的地域性。目前O型口疫病毒有10個(gè)拓?fù)湫?,A型有3個(gè)拓?fù)湫汀型有8拓?fù)湫?、亞?型有1個(gè)拓?fù)湫停琒AT1、SAT2和SAT3分別有3、2和3個(gè)拓?fù)湫汀N覈?jīng)流行過的有O、A和亞洲1三個(gè)型,2018年7月1日亞洲1型退出免疫之后,主要流行毒株為O型和A型,其中O型的流行毒株有三個(gè)拓?fù)湫汀獤|南亞拓?fù)湫停ㄈ鏞/Mya98/BY/2010等)、中東-南亞拓?fù)湫陀纸蟹簛喭負(fù)湫停ㄈ鏞/Ind2001等)和古典中國拓?fù)湫停ㄈ鏞/GX/09-7等)。A型的流行毒株只有一個(gè)拓?fù)湫图皷|南亞拓?fù)湫停ㄈ鏏/Sea-97/G2 等)。

        3.口蹄疫病毒的易感動(dòng)物及感染特點(diǎn)??谔阋叩囊赘袆?dòng)物種類繁多。重要家畜如豬牛、羊等都易感,其中牛的發(fā)病率幾乎達(dá)100%,其次是豬,再次是羊及20多科70多種野生動(dòng)物。

        口蹄疫病毒變異性極強(qiáng),其7個(gè)血清型之間不能產(chǎn)生交叉免疫,因此防治口蹄疫相當(dāng)于防治7種不同的傳染病。同型內(nèi)不同病毒株的抗原性也有差異,而新毒株又不斷出現(xiàn),每出現(xiàn)一種新毒株,疫情就出現(xiàn)一次新高潮。

        口蹄疫病毒的感染性和致病力特別強(qiáng)。如一頭牛只要吸入10個(gè)感染單位的病毒就可發(fā)病,而病畜的排毒量又特別大,一頭病豬每天僅從呼吸道排出的病毒就高達(dá)108個(gè)感染單位。一頭病豬一天呼出的病毒可使1000萬頭牛發(fā)病。

        口蹄疫有多種傳播方式和感染途徑。該病不但可通過與病畜接觸傳播,還可通過空氣傳播。若氣象條件合適,病毒可向下風(fēng)方向傳播幾十甚至上百公里的距離。

        口蹄疫的潛伏期短,發(fā)病急。動(dòng)物感染口蹄疫病毒后最快十幾小時(shí)就可排毒,處于潛伏期的動(dòng)物、發(fā)病動(dòng)物及持續(xù)感染動(dòng)物均可引起易感動(dòng)物發(fā)病。

        動(dòng)物機(jī)體對(duì)口蹄疫病毒的免疫應(yīng)答程度較低。免疫注射動(dòng)物,甚至發(fā)病后康復(fù)動(dòng)物,再次受到同源病毒攻擊時(shí)只保持不再發(fā)病,其免疫系統(tǒng)不能完全抵抗病毒感染。

        二、奶牛發(fā)病時(shí)的臨床癥狀

        在所有易感動(dòng)物中奶牛最易感染口蹄疫病毒,感染后臨床表現(xiàn)十分明顯,以口腔和蹄部出現(xiàn)水皰為主要特征。牛群一旦感染口蹄疫病毒,傳染速度很快,出現(xiàn)相同癥狀的病牛數(shù)量急劇增加。牛自然感染口蹄疫病毒時(shí),潛伏期一般為2~14d,但是,隨著環(huán)境的變化,潛伏期亦可縮短或延長。

        患病初期,病牛出現(xiàn)急性發(fā)熱,體溫可以升高至40~41.5℃,稽留1~4d。伴隨精神沉郁、脈博加快、黏膜潮紅、反芻減弱和產(chǎn)奶量下降等癥狀。牛感染24h后出現(xiàn)病毒血癥,在病毒血癥期間,從多數(shù)組織中可檢測到病毒,其中蹄叉、蹄冠部和舌上皮組織中的病毒含量最高。

        病牛蹄部病變主要發(fā)生在蹄叉、蹄冠及蹄踵和趾間隙的柔軟皮膚,初期表現(xiàn)局部有熱感、紅和疼痛,之后形成小水皰,繼而融合為較大的水皰。水皰破潰時(shí)水液排出形成糜爛,其表皮常不完全脫落而干燥形成硬痂,有時(shí)蹄冠部發(fā)生多處水皰,互相連接融合,引起蹄冠與蹄緣分離,病愈后較長時(shí)間內(nèi),仍留有明顯的縫隙和痕跡,病牛因蹄部疾患常常舉步艱難。蹄部水皰破潰后,若護(hù)理良好、保持清潔干燥,經(jīng)10~14d可以自愈,否則病程很長,嚴(yán)重時(shí),蹄匣脫落。

        在蹄部發(fā)生水皰的稍前或同時(shí),出現(xiàn)口腔病變,一般是在舌背面出現(xiàn)環(huán)形、粗糙的白色隆起,隨著液體的積聚,隆起增大,有時(shí)多個(gè)水皰相互融合,凸現(xiàn)于正常的舌面組織使舌面凹凸不平。牛流出大量泡沫樣口涎,并掛滿口角與下唇。水皰破裂后,舌面露出紅色爛斑。病牛多因口腔疼痛不能吃草而日漸消瘦。水皰也會(huì)出現(xiàn)在齒齦、舌面、鼻鏡、唇內(nèi)、鼻前端及眼結(jié)膜等處,水皰一般較小,為綠豆或指頭蛋大小,破裂后形成局限性小爛斑。

        泌乳牛感染口蹄疫時(shí),乳頭皮膚亦可出現(xiàn)水皰。口蹄疫還會(huì)引起懷孕母牛流產(chǎn)、死胎或分娩出帶病毒的犢牛。此外,病變也見于鼻咽部、食道和瘤胃,亦見于母牛陰道基膜和公牛陰囊皮膚。成年發(fā)病牛的死亡率通常比較低,而發(fā)病犢牛死亡率高。新生牛呈急性經(jīng)過而不形成水皰性病損,經(jīng)過1~2d,因心肌炎而死亡。

        成年病牛一般1~2周后即可痊愈,部分病例由于繼發(fā)細(xì)菌感染,使病變過程復(fù)雜化,口腔出現(xiàn)深層潰瘍、壞死和膿腫,并可能發(fā)展為咽炎、支氣管炎,肺水腫和肺氣腫;蹄冠部化膿,出現(xiàn)壞死性蜂窩織炎,發(fā)生感染的關(guān)節(jié)與腱鞘松弛,有時(shí)伴隨敗血癥而導(dǎo)致病牛死亡。部分病牛康復(fù)后,可能發(fā)生繼發(fā)癥,表現(xiàn)為精神沉郁,食欲減退,換毛過程停滯,奶產(chǎn)量降低。有些病牛出現(xiàn)心肺性喘息和咳嗽,心博減弱,脈博無力,心悸亢進(jìn)和心律不齊,瘤胃蠕動(dòng)減弱,有時(shí)出現(xiàn)抽搐興奮或精神沉郁。

        三、口蹄疫免疫技術(shù)

        目前,我國政府批準(zhǔn)用于預(yù)防口蹄疫的疫苗包括單價(jià)、雙價(jià)或三價(jià)滅活油佐劑疫苗、合成肽疫苗及基因工程亞單位疫苗。其中合成肽疫苗僅用于豬口蹄疫的防控,基因工程亞單位疫苗因其抗原分子量小、免疫原性弱而未能大面積推廣使用。滅活疫苗因效果良好而且質(zhì)量穩(wěn)定,是當(dāng)前乃至今后畜牧業(yè)生產(chǎn)中預(yù)防口蹄疫的主要疫苗。

        1.疫苗選擇。2018年7月1日,我國宣布亞洲1型口蹄疫退出免疫,目前至今后主要用于牛羊的口蹄疫疫苗有以下幾種。

        1)牛口蹄疫O型、A型雙價(jià)滅活疫苗。O型、A型病毒,滅活前的病毒含量分別至少107.0TCID50/mL,用于預(yù)防牛、羊O型、A型口蹄疫。注射后15d產(chǎn)生免疫力,免疫期為6個(gè)月。牛、羊深部肌內(nèi)注射,6月齡以上牛4mL/頭,6月齡以下牛和1歲以上羊2mL/頭,6月齡以下的羊1mL/只。

        2)口蹄疫O型、A型二價(jià)滅活疫苗(O/MYA98/BY/2010株+Re~A/WH/09株)。本品系用口蹄疫病毒O型O/MYA98/BY/2010株、重組A型Re~A/WH/09毒株分別接種BHK~21懸浮細(xì)胞,收獲細(xì)胞培養(yǎng)物,分別經(jīng)濃縮純化、二乙烯亞胺(BEI)滅活后與ISA206佐劑按比例混合乳化制成疫苗。用于預(yù)防牛、羊O型和A型口蹄疫,免疫期為6個(gè)月,肌肉注射,牛1mL/頭,羊0.5mL/只。

        3)口蹄疫(A型)滅活疫苗(AF/72株)。本品系用牛源A型口蹄疫病毒AF/72株細(xì)胞毒,接種BHK-21細(xì)胞,通過濃縮培養(yǎng)法培養(yǎng),收獲細(xì)胞培養(yǎng)物,經(jīng)二乙烯亞胺(BEI)滅活后,加礦物油佐劑混合乳化制成。用于預(yù)防牛A型口蹄疫,免疫期為6個(gè)月,肌肉注射,6月齡以上成年牛2.0mL/頭,6月齡以下犢牛1.0mL/頭。

        4)口蹄疫O型、A型二價(jià)滅活疫苗(O/HB/HK/99株+AF/72株)。本品含滅活的口蹄疫O型(O/HB/HK/99株 )、A型(AF/72株 ) 病毒,滅活前的病毒含量分別至少為107.0TCID50/mL。用于預(yù)防牛口蹄疫O型、A型病毒引起的口蹄疫,免疫期為6個(gè)月,肌肉注射 2mL/頭。

        5)口蹄疫O型、A型二價(jià)滅活疫苗(OHM/02株+AKT~I(xiàn)II株)。疫苗中含有滅活的口蹄疫O型毒株(OHM/02株)和A型Ⅲ系鼠化弱毒株(AKT-III株),滅活前的病毒含量均至少為107.5LD50/0.2mL。用于預(yù)防牛、羊O型、A型口蹄疫,免疫期為6個(gè)月,頸部肌肉注射,牛2.0mL/頭,羊1.0mL/只。

        6)口蹄疫O型滅活疫苗(OJMS株)。本品系用口蹄疫病毒O型病毒接種BHK-21細(xì)胞培養(yǎng),收獲懸浮細(xì)胞培養(yǎng)物,經(jīng)二乙烯亞胺(BEI)滅活,加礦物油佐劑混合乳化制成。用于預(yù)防牛、羊O型口蹄疫,肌肉注射,牛2.0mL/頭,羊1.0mL/只。

        7)口蹄疫O型滅活疫苗(OS株)。含滅活的口蹄疫O型病毒,滅活前每0.1mL病毒含量應(yīng)至少為107.0TCID50,或每0.2mL病毒含量應(yīng)至少為107.0LD50。用于預(yù)防牛、羊、鹿和駱駝O型口蹄疫,免疫期為4~6個(gè)月。肌肉注射,牛、鹿和駱駝2mL/頭(峰),羊1mL/只。

        8)口蹄疫O型滅活疫苗(OHM/02株)。疫苗中含滅活的口蹄疫O型病毒OHM/02株,滅活前的病毒含量應(yīng)至少為107.0LD50/0.2mL。用于預(yù)防牛、羊O型口蹄疫,免疫期為6個(gè)月。肌肉注射,牛2.0mL/頭,羊1.0mL/只。

        2.免疫操作。免疫前要嚴(yán)格做好接種器具(注射器,針頭、鑷子以及有關(guān)容器等)的消毒準(zhǔn)備工作。

        1)最好使用一次性注射器,或者使用牲畜專用的可定量注射器,注意注射器定量卡是否松動(dòng),用前高壓滅菌或煮沸消毒法消毒至少15min。

        2)使用12~16號(hào)針頭。針頭的消毒應(yīng)采用高壓蒸汽法。

        3)毛剪和鑷子使用前應(yīng)高壓滅菌或煮沸消毒法消毒至少15min。

        4)滅菌后的注射器與針頭應(yīng)放置于無菌盒內(nèi)備用。免疫接種工作由獸醫(yī)防疫人員或養(yǎng)殖場獸醫(yī)人員執(zhí)行。做好養(yǎng)殖場獸醫(yī)人員的技術(shù)培訓(xùn),嚴(yán)格按接種操作要求進(jìn)行。接種前應(yīng)備有足夠的碘酊棉球、注射器、針頭、抗過敏藥物以及免疫記錄本等。免疫注射時(shí)應(yīng)適當(dāng)保定動(dòng)物,嚴(yán)禁使用“飛針”注射。接種前將疫苗緩慢充分搖勻,防止氣泡影響疫苗劑量的準(zhǔn)確性。疫苗在使用過程中應(yīng)保存在保溫箱內(nèi),注意防凍、防曬,疫苗必須在2~8℃之間保存,切不可凍結(jié)。吸出的疫苗不可回注于疫苗瓶內(nèi),每瓶疫苗啟用后,限當(dāng)日用完,超過24h則廢棄。

        嚴(yán)格按照產(chǎn)品說明書中限定的劑量免疫。注射部位要準(zhǔn)確,動(dòng)作要熟練,確保免疫劑量準(zhǔn)確足量。吸取疫苗時(shí)應(yīng)在疫苗瓶邊緣插入一支進(jìn)氣針頭,吸苗針頭應(yīng)從瓶塞中央進(jìn)人并固定在瓶塞上專用于吸取疫苗,另安裝注射針頭用于疫苗接種。接種前應(yīng)仔細(xì)定量,在注時(shí)針頭上覆蓋棉球,將針筒排氣溢出的疫苗液吸積于棉球上,并將其收集于專用瓶內(nèi)集中處理。進(jìn)氣針頭、吸取針頭和注射針頭三者之間應(yīng)嚴(yán)格分開使用,注射器嚴(yán)禁在疫苗瓶內(nèi)排空氣。注射部位用碘酊或70%酒精棉擦凈消毒。牛注射部位為頸部上1/3處深層肌肉。

        3.免疫不良反應(yīng)的預(yù)防及處理。

        通常大多數(shù)牛在接種疫苗后不會(huì)出現(xiàn)明顯的不良反應(yīng),而少數(shù)牛常會(huì)出現(xiàn)一過性的精神沉郁、食欲下降,注射部位出現(xiàn)短時(shí)輕度炎性水腫等局部或全身性異常表現(xiàn),這都是注苗后的正常反應(yīng)。但有時(shí)會(huì)發(fā)生反應(yīng)程度嚴(yán)重(如過敏反應(yīng),表現(xiàn)為缺氧、黏膜發(fā)紺,呼吸困難、口流白沫,全身肌肉顫抖、出汗,嘔吐食物、虛脫或驚厥等臨床癥狀)或出現(xiàn)反應(yīng)的牛數(shù)量較多的情況,原因通常是由于疫苗的質(zhì)量低劣、注射劑量過大、操作錯(cuò)誤、接種途徑或使用對(duì)象不準(zhǔn)等因素引起。即便如此,我們?nèi)钥梢酝ㄟ^一些預(yù)防和應(yīng)急措施最大程度地減少注射疫苗的不良反應(yīng)和損失。

        1)不良反應(yīng)的預(yù)防。接種前后一周內(nèi)飼料中可適當(dāng)添加小劑量的左旋咪唑、亞硒酸鈉和維生素E等免疫增強(qiáng)劑類物質(zhì)。不要使用腎上腺素類的激素藥物或免疫抑制性藥物(如鏈霉素、新霉素、卡那霉素、四環(huán)素等)或抗病毒藥物。

        在免疫接種前必須進(jìn)行牲畜健康狀況、體質(zhì)等生理狀況的檢查,病畜、弱畜、孕畜可暫緩接種,其免疫嚴(yán)格按說明書要求進(jìn)行及時(shí)補(bǔ)免。

        免疫接種最好選擇在溫度適宜、天氣晴朗的時(shí)候進(jìn)行,特別是豬的免疫應(yīng)盡量避開陰雨天,夏季在早晚涼爽時(shí)進(jìn)行,冬天在中午溫暖時(shí)進(jìn)行。

        免疫接種前應(yīng)盡可能避免動(dòng)物一些劇烈活動(dòng)(如長途運(yùn)輸、轉(zhuǎn)群、采血等),防止牲畜處于應(yīng)激狀態(tài),在接種過程中更應(yīng)采取必要措施以避免過分驅(qū)趕或抓取牲畜。

        免疫后須給牲畜適當(dāng)時(shí)間休息,同時(shí)兌制多維電解質(zhì)水供其自由飲用,并密切觀察是否出現(xiàn)異常反應(yīng),對(duì)表現(xiàn)持續(xù)高熱的牲畜除了供給充足的多維電解質(zhì)水之外,還需采取退熱措施。

        2)不良反應(yīng)的處理

        一般反應(yīng):個(gè)別牛注射疫苗后出現(xiàn)輕度精神萎靡或不安,食欲減少和體溫稍高等情況,一般不需要治療,將其置于適宜環(huán)境下1~2d,癥狀即可自行減輕或消失,不必采取治療措施。

        急性不良反應(yīng):極個(gè)別牛注射苗后可能出現(xiàn)急性過敏反應(yīng),呼吸加快、眼結(jié)膜充血、發(fā)抖、皮膚發(fā)紫、口吐白沫、頻頻排便、后肢不穩(wěn)或倒地抽搐,如搶救不及時(shí)很可能死亡。一般需盡快肌注地塞米松磷酸鈉30mg,皮下注射0.1%鹽酸腎上原素5mL。若發(fā)生過敏反應(yīng)病牛體溫超過40℃,可注射復(fù)方氨基比林。若發(fā)生過敏反應(yīng)的病牛心臟衰竭、皮膚發(fā)紫,可注射安鈉咖,注意保溫,并給予充足、干凈的飲水。

        最急性不良反應(yīng):迅速皮下注射0.1%鹽酸腎上腺素5mL,20min后根據(jù)緩解程度,可重復(fù)同劑量再注射一次。對(duì)休克牛,除上述方法外,還要迅速針刺耳尖、尾根、蹄頭、大脈穴,放少量血,迅速將去甲腎上腺素10mg加入10%葡萄糖注射液1500mL,靜脈滴注,待其蘇醒、脈律恢復(fù)后,再將VC 5g、VB6 3g加入5%葡萄糖注射液2000mL靜脈滴注,然后再用5%的碳酸氫鈉注射液500mL靜脈滴注即可。

        4.免疫程序。根據(jù)疫苗種類和群體免疫抗體水平制定適宜的免疫程序,并嚴(yán)格按免疫程序?qū)嵭忻庖呓臃N工作,但根據(jù)突發(fā)事件和實(shí)際情況的變化可以調(diào)整免疫程序。生產(chǎn)母牛,每年普免2~3次。犢牛,出生后3~4個(gè)月首免,間隔3~4周二免。種公牛,每年普免3次。補(bǔ)充免疫:按程序免疫之后經(jīng)免疫抗體檢測針對(duì)免疫抗體產(chǎn)生不佳的??蛇M(jìn)行補(bǔ)免。緊急免疫:當(dāng)?shù)匕l(fā)生疫情時(shí),要對(duì)疫區(qū)、受威脅區(qū)域的全部易感動(dòng)物進(jìn)行一次強(qiáng)化免疫。

        5.免疫標(biāo)識(shí)與免疫檔案

        1)養(yǎng)殖場應(yīng)每季度提前向動(dòng)物防疫主管部門申報(bào)養(yǎng)殖種類、養(yǎng)殖數(shù)以及所需的動(dòng)物標(biāo)識(shí)數(shù)量,年存欄1000頭以上場須自行配備動(dòng)物標(biāo)識(shí)識(shí)讀器。

        2)對(duì)動(dòng)物免疫接種后須按照《畜禽標(biāo)識(shí)和養(yǎng)殖檔案管理辦法》中的規(guī)定,建立免疫檔案,加施牲畜標(biāo)識(shí)。

        3)免疫接種后應(yīng)及時(shí)認(rèn)真地填寫免疫接種記錄表,內(nèi)容包括疫苗名稱、接種日期、舍號(hào)、欄號(hào)、年齡、免疫頭數(shù)、免疫劑量、疫苗信息(類別、生產(chǎn)廠家、有效期、批號(hào)等)以及接種人員,針對(duì)每一頭牲畜建立規(guī)范性的免疫檔案。

        6.口蹄疫監(jiān)測。監(jiān)測措施是口蹄疫防控和流行病學(xué)調(diào)查的重要內(nèi)容和手段之一,所有影響口蹄疫發(fā)生與擴(kuò)散的風(fēng)險(xiǎn)因素都屬于監(jiān)測范圍。而規(guī)模養(yǎng)殖場口蹄疫發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)的監(jiān)測內(nèi)容主要是場區(qū)環(huán)境帶毒檢測,場區(qū)外環(huán)境的疫情調(diào)查、牲畜過往活動(dòng)情況、牲畜帶毒情況以及畜群免疫狀況等。

        1)監(jiān)測范圍。①牛群:養(yǎng)殖場內(nèi)牛群發(fā)病、帶毒及抗體水平的檢測。②場區(qū)內(nèi)環(huán)境:含飼料、飲用水等帶毒監(jiān)測。③場區(qū)外環(huán)境:關(guān)注養(yǎng)殖場周邊范圍內(nèi)的疫情動(dòng)態(tài),包括疫情調(diào)查,場區(qū)附近過往易感動(dòng)物(牛、羊、豬)活動(dòng)情況等。

        2)監(jiān)測頻率。①集中監(jiān)測:1年2次,分春秋季。春季集中監(jiān)測在5月底前完成,秋季集中監(jiān)測在11月底前完成。②日常監(jiān)測:各養(yǎng)殖場根據(jù)生產(chǎn)的實(shí)際情況隨時(shí)自行監(jiān)測,必要時(shí),結(jié)合當(dāng)?shù)乜谔阋吡餍袪顩r增加監(jiān)測次數(shù)。一旦發(fā)現(xiàn)疑似病例,應(yīng)緊急封鎖疫點(diǎn)、控制發(fā)病動(dòng)物及同群牲畜,并立即報(bào)告當(dāng)?shù)貏?dòng)物防疫監(jiān)督部門。

        3)監(jiān)測內(nèi)容和方法。①臨床檢查:由飼養(yǎng)員負(fù)責(zé)每日例行的臨床檢查,即仔細(xì)觀察牛只是否表現(xiàn)口蹄疫臨床典型癥狀(如食欲減退、發(fā)熱、口及乳房部位出現(xiàn)水皰、跛行、喜臥等)。一旦發(fā)現(xiàn)異常情況,應(yīng)立即報(bào)告養(yǎng)殖場獸醫(yī)和負(fù)責(zé)人員。②實(shí)驗(yàn)室檢測:由養(yǎng)殖場獸醫(yī)診療室(若技術(shù)和裝備條件允許)負(fù)責(zé)實(shí)施,進(jìn)行血清樣品的抗體檢測。

        液相阻斷酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(LB-ELISA)用于口蹄疫免疫抗體水平的檢測和評(píng)價(jià),是OIE推薦的國際標(biāo)準(zhǔn)方法之一。根據(jù)口蹄疫的流行和免疫情況,有時(shí)需檢測多個(gè)血清型的免疫抗體。

        正向間接血凝試驗(yàn)(IHA)適用于口蹄疫免疫抗體水平的大規(guī)模監(jiān)查。雖非國際標(biāo)準(zhǔn)方法,但因其操作簡便,價(jià)廉。在基層獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室仍有較大應(yīng)用價(jià)值。

        4)樣品采集。①采樣原則:根據(jù)檢測目的采集相應(yīng)樣品,采集的檢測樣品要有代表性,樣品的采集、保存、運(yùn)輸要按國家《口蹄疫防治技術(shù)規(guī)范》技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。②采樣數(shù)量:樣品采集總量應(yīng)根據(jù)養(yǎng)殖場實(shí)際的養(yǎng)殖規(guī)模、牲畜用途、畜群大小確定?;驹瓌t是必須符合統(tǒng)計(jì)學(xué)要求。③采樣時(shí)間:為監(jiān)測養(yǎng)殖場動(dòng)物血清抗體水平,評(píng)估疫苗免疫效果,應(yīng)分別在注苗前和注苗后30d采集血清樣品1次進(jìn)行檢測。

        5)檢測結(jié)果的判定。液相阻斷ELEA,免疫后30d抗體效價(jià)≥26為免疫合格。

        6)免疫效果的評(píng)價(jià)。存欄豬群免疫抗體合格率≥70%,牛群免疫抗體合格率80%時(shí),表明家畜群體的免疫水平達(dá)到了國家規(guī)定要求。未達(dá)抗體合格標(biāo)準(zhǔn)的,應(yīng)及時(shí)進(jìn)行補(bǔ)免。

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