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        簡述豬細(xì)小病毒檢測方法的研究情況

        2019-07-08 03:53:33余新玲
        農(nóng)家科技中旬版 2019年3期
        關(guān)鍵詞:檢測方法研究

        摘 要:豬細(xì)小病毒是因?yàn)樨i細(xì)小病毒所引起的一種母豬繁殖障礙病,臨床特征包含有流產(chǎn)跟死胎等等,并會(huì)導(dǎo)致新生仔豬的大量死亡。只有做好豬細(xì)小病毒的及時(shí)有效檢測,并給予針對性的應(yīng)用措施,才能夠避免養(yǎng)殖場遭受到過大的經(jīng)濟(jì)跟社會(huì)損失,本文主要就豬細(xì)小病毒的檢測方法進(jìn)行了探究。

        關(guān)鍵詞:豬細(xì)小病毒;檢測方法;研究

        隨著我國養(yǎng)殖行業(yè)的不斷發(fā)展,使得養(yǎng)豬業(yè)也開始朝著規(guī)?;芗姆较虿粩噙M(jìn)行發(fā)展,使得豬群的跨區(qū)域交流機(jī)會(huì)變得越來也不多,豬細(xì)小病毒病的傳播速度也隨著加快,并朝著多病混合感染的方式進(jìn)行發(fā)展,對于養(yǎng)豬行業(yè)也會(huì)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。目前我國在進(jìn)行豬細(xì)小病毒的檢測過程中,主要是從血清學(xué)檢測以及分子生物學(xué)檢測兩個(gè)方面來進(jìn)行,對于各種病毒也能夠起到快速準(zhǔn)確的檢測效果。

        一、血清學(xué)檢測方法

        1.血凝跟血凝抑制試驗(yàn)

        血凝以及血凝實(shí)驗(yàn)作為最為簡便的一種檢測方式,在豬細(xì)小病毒檢測工作中也得到了廣泛的應(yīng)用。將誒主語PPV能夠?qū)θ?、猴、雞以及大鼠的紅細(xì)胞進(jìn)行聚集,一般實(shí)驗(yàn)室主要是將豚鼠的紅細(xì)胞作為凝聚細(xì)胞,并且具備有方法簡單易行的應(yīng)用優(yōu)勢,對于大批量樣品也能夠進(jìn)行快速有效的診斷,因此獲得了普遍的應(yīng)用。通過HI實(shí)驗(yàn)?zāi)軌驅(qū)贵w起到良好的檢測效果,在待檢血清進(jìn)行了滅活處理之后,通過紅細(xì)胞進(jìn)行吸附,能夠?qū)ρ逯械姆翘禺愋匝仄鸬搅己玫娜コЧ4送獠捎酶邘X土吸附的方式還能夠有效減少非康體型抑制因子,方法比較簡便,靈敏度也比較高,但是在該檢測模式中需要進(jìn)行紅細(xì)胞的現(xiàn)配,檢測程序也比較繁瑣。

        2.中和試驗(yàn)

        中和實(shí)驗(yàn)作為一種常用的PPV抗體檢測方法,能夠采用PPV跟被檢血清之中的抗體進(jìn)行綜合處理,在結(jié)合培養(yǎng)細(xì)胞病變狀況基礎(chǔ)上來進(jìn)行血清抗體滴度的計(jì)算工作。在采用中和試驗(yàn)方法來進(jìn)行豬細(xì)小病毒的檢測時(shí)具有非常高的特異性,但是操作流程復(fù)雜,完成一次試驗(yàn)所需時(shí)間往往要一周或者更長的時(shí)間,對于臨床診斷工作也就提出了更高的要求,難以滿足各項(xiàng)臨床診斷工作的具體要求。在中和試驗(yàn)檢測方法中,需要水準(zhǔn)比較高的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)以及病變結(jié)果判定技術(shù),因此對于實(shí)驗(yàn)室水平也會(huì)提出非常高的要求,難以在臨床上進(jìn)行廣泛的應(yīng)用跟推廣。

        3.酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)

        酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)?zāi)軌蛑苯訉⒖乖贵w免疫反應(yīng)的特異性跟酶的高效催化作用進(jìn)行有機(jī)結(jié)合,從而對多種病毒起到良好的檢測效果。采用該實(shí)驗(yàn)室檢測法能夠?qū)乖约翱贵w起到良好的檢測效果,并能夠?qū)ωi細(xì)小病毒進(jìn)行有效的檢測。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測法具備有特異性強(qiáng)、敏感度高、檢測快速以及高通量等應(yīng)用優(yōu)勢,在基層獸醫(yī)部門的大面積疫情普查工作中也獲得了良好的應(yīng)用效果。在田莉莉等人員所構(gòu)建的豬細(xì)小病毒VP2蛋白單克隆抗體檢測模式中,跟傳統(tǒng)的PCR檢測方式對比還有著更好的敏感度跟重復(fù)性,在豬細(xì)小病毒感染的早期診斷工作中也獲得了良好的應(yīng)用效果。

        二、分子生物學(xué)檢測方法

        1.PCR檢測技術(shù)

        PCR技術(shù)是一種體外擴(kuò)增特異DNA片段檢測技術(shù),其能夠?qū)CR技術(shù)跟電泳技術(shù)進(jìn)行有機(jī)的結(jié)合,并且有著特異性強(qiáng)以及敏感度高的應(yīng)用優(yōu)勢,在臨床PPV診斷工作之中也得到了廣泛的應(yīng)用。

        2.多重PCR診斷檢測技術(shù)

        多重PCR診斷檢測技術(shù)可以直接將多對特異性引物加入到同一PCR反應(yīng)體系之中,來對多個(gè)DNA模板或者同一模板之內(nèi)的不同區(qū)域進(jìn)行PCR擴(kuò)增,借此來獲得良好的病毒檢測效果。采用多重PCR技術(shù)能夠在一個(gè)PCR反應(yīng)管中進(jìn)行多個(gè)目的片段的擴(kuò)增處理,因此可以節(jié)省出大量的人力、時(shí)間跟物力,對于各種病毒導(dǎo)致的疾病也能夠起到良好的檢測效果。在進(jìn)行混合感染病原體的診斷過程中,采用多重PRC技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)對多種病毒的檢測工作,對于后續(xù)治療也有著積極的意義。

        3.可視化基因芯片檢測方法

        可視化芯片技術(shù)是在常規(guī)芯片檢測技術(shù)上延伸的一種病毒檢測技術(shù),該技術(shù)能夠在以往基因芯片技術(shù)基礎(chǔ)上,將待檢病原體的特異片段直接固定的芯片上,隨后采用標(biāo)記有生物素的靶基因跟病原體特異片段進(jìn)行雜交處理。在接入了經(jīng)過納米金標(biāo)記的鏈霉親和素之后進(jìn)行銀染處理,可以直接生成肉眼的光學(xué)捕捉信號(hào)。采用可視化基因芯片檢測方法,可以對豬微小病毒進(jìn)行快速準(zhǔn)確的診斷,因此近年來在病原檢測以及基因突變檢測等多個(gè)領(lǐng)域也得到了廣泛的應(yīng)用,具備有良好的應(yīng)用前景。

        三、結(jié)語

        豬細(xì)小病毒是導(dǎo)致豬群患上疫病的一個(gè)重要因素,對于我國養(yǎng)殖行業(yè)的發(fā)展以及居民的健康生長也會(huì)造成嚴(yán)重的影響。應(yīng)用最多的是血清學(xué)檢測技術(shù),該技術(shù)中的血凝以及血凝抑制試驗(yàn),能夠起到良好的豬細(xì)小病毒檢測效果。但是不同檢測方法在應(yīng)用過程中均存在有一定的局限性,要求相關(guān)獸醫(yī)部門能夠在結(jié)合當(dāng)?shù)鼐唧w情況的基礎(chǔ)上,進(jìn)行檢測方法的合理選擇跟不斷強(qiáng)化,這樣才能夠滿足該區(qū)域豬細(xì)小病毒的檢測需求。

        參考文獻(xiàn):

        [1]劉勝利,呂玉金,李文剛.豬細(xì)小病毒檢測方法的研究綜述[J].河南畜牧獸醫(yī)(市場版),2017,38(11):32-33.

        [2]南京農(nóng)業(yè)大學(xué).一種檢測豬細(xì)小病毒抗體的可視化蛋白芯片制備方法和檢測方法:中國,CN201810301162.7[P].2018-07-24.

        [3]劉立兵,王建昌,經(jīng)美, 等.豬細(xì)小病毒重組酶聚合酶擴(kuò)增快速檢測方法的建立[J].中國畜牧獸醫(yī),2017,44(11):3320-3326.

        [4]河南牧業(yè)經(jīng)濟(jì)學(xué)院.一種檢測豬細(xì)小病毒的基因芯片的制備方法及使用方法:中國,CN201710287489.9[P].2017-09-01.

        作者簡介:余新玲(1977-07-)女,河南確山人,本科,中級(jí)獸醫(yī)師。工作內(nèi)容及方向:動(dòng)物檢疫及動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督執(zhí)法。

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