文│何東旭 周先建 王勛 顧玉美（南京天邦生物科技有限公司）

豬瘟（Classical swine fever，CSF）是由豬瘟病毒（Classical swine fever virus，CSFV）引起的嚴(yán)重危害養(yǎng)豬業(yè)的重大傳染病。目前發(fā)現(xiàn)的CSFV毒株可分為3個(gè)基因型和11個(gè)基因亞型，但CSFV抗原性比較保守，只有一個(gè)血清型，不同基因型間有很好的抗原交叉，中和抗體水平可以直接反應(yīng)疫苗免疫產(chǎn)生體液免疫力的高低。接種高效豬瘟細(xì)胞疫苗可以有效刺激機(jī)體產(chǎn)生體液免疫和細(xì)胞免疫，成為當(dāng)前有效防控豬瘟的重要手段。持續(xù)定時(shí)免疫的做法，因具有勞動(dòng)效率高、全群無(wú)遺漏、疫苗浪費(fèi)少的特點(diǎn)，在生產(chǎn)中得到廣泛的應(yīng)用，常見(jiàn)的免疫程序是種豬群每年定時(shí)進(jìn)行3次普免，兩次免疫間隔3個(gè)月，后備豬使用前按日齡定時(shí)進(jìn)行兩次免疫，兩次免疫間隔一般為1個(gè)月，仔豬通常在25～35日齡定時(shí)首免，間隔1個(gè)月左右加強(qiáng)免疫一次。本文采用間接ELISA法對(duì)國(guó)內(nèi)三個(gè)省4家連續(xù)使用同一廠家生產(chǎn)的高效豬瘟細(xì)胞苗，持續(xù)定時(shí)免疫1年以上的規(guī)?；i場(chǎng)不同階段豬群的豬瘟中和抗體水平進(jìn)行調(diào)查，以便于更好地了解，持續(xù)定時(shí)免疫豬瘟疫苗在臨床中的應(yīng)用效果。

表1 豬瘟中和抗體效價(jià)均值

一、材料與方法

1.血樣。由安徽、江蘇、福建三省4家規(guī)模豬場(chǎng)（500頭以上經(jīng)產(chǎn)母豬，連續(xù)使用同一廠家生產(chǎn)的高效豬瘟細(xì)胞疫苗1年以上的豬場(chǎng)）提供，共437份。

2.檢測(cè)試劑盒。BioChek豬瘟E2（CSFV-E2）抗體檢測(cè)試劑盒，產(chǎn)品代碼SK106。

3.試驗(yàn)方法。各場(chǎng)分群體采樣，1～6胎經(jīng)產(chǎn)母豬、后備豬、公豬、首免前1日仔豬（即25～35日齡豬只）、首免后20日保育豬（即45～55日齡豬只）、二免后30日商品豬（即90～105日齡豬只）及育肥豬（即120～150日齡豬只）豬分別隨機(jī)采集血樣，分離血清，-20℃保存待檢，檢測(cè)方法按試劑盒說(shuō)明書(shū)方法進(jìn)行。

二、結(jié)果與分析

1.豬瘟中和抗體效價(jià)均值及陽(yáng)性率。豬瘟中和抗體效價(jià)均值及陽(yáng)性率結(jié)果顯示（見(jiàn)表1、圖1）：種豬群豬瘟中和抗體效價(jià)均值均處于較高陽(yáng)性水平，且陽(yáng)性率均高于94%；首免后20日仔豬（45～55日齡）到二免后30日商品豬（90～105日齡）的豬瘟中和抗體效價(jià)均值呈上升趨勢(shì)，且到育肥中后期（120～150日齡）仍維持在較高水平，二免后30日保育期（90～105日齡）及育肥中后期（120～150日齡）陽(yáng)性率均高于80%，說(shuō)明持續(xù)定時(shí)免疫豬瘟高效豬瘟細(xì)胞苗能較好地激發(fā)各階段豬群產(chǎn)生免疫應(yīng)答，產(chǎn)生較好的臨床免疫效果。

首免后20日仔豬（45～55日齡）中和抗體水平偏低，且首免前1日仔豬（25～35日齡）到首免后20日保育豬（45～55日齡）呈下降趨勢(shì)，首免后20日（45～55日齡）中和抗體陽(yáng)性率僅為33.3%，分析為首免時(shí)母源抗體水平較高，首免后抗體上升延遲所致，實(shí)際生產(chǎn)中可以根據(jù)母源抗體監(jiān)測(cè)情況，適當(dāng)延遲首免日或增加首免劑量。

2.豬瘟中和抗體效價(jià)離散度。豬瘟中和抗體效價(jià)離散度結(jié)果顯示（圖2）：1～6胎母豬以及公豬群中和抗體效價(jià)離散度相對(duì)其他群體而言更低，且各群體離散度相近，而相對(duì)其他群體來(lái)說(shuō)種豬群在實(shí)際生產(chǎn)過(guò)程中接受了更多次的定時(shí)免疫，這就說(shuō)明多次持續(xù)定期免疫可以有效提升豬群中和抗體水平的同時(shí)還能提升整體抗體水平的整齊度。調(diào)查結(jié)果還顯示，公豬抗體水平離散度在種豬群中表現(xiàn)為最低，說(shuō)明公豬免疫應(yīng)答水平相對(duì)其他群體表現(xiàn)最好，持續(xù)定期免疫后可以產(chǎn)生更整齊和有效的抗體水平。綜合整體調(diào)查結(jié)果可以說(shuō)明，持續(xù)定期免疫可以有效提升豬群豬瘟中和抗體水平和陽(yáng)性率，是一種非常有效的免疫方法。

三、討論

經(jīng)典豬瘟C株弱毒活疫苗對(duì)接種豬免疫保護(hù)率接近100%，免疫后3日即可產(chǎn)生良好的免疫保護(hù)，不僅能誘導(dǎo)完全的臨床保護(hù)（不發(fā)?。?，而且能產(chǎn)生完全的保護(hù)（不出現(xiàn)病毒血癥，不排毒），中和抗體通常在接種后2周產(chǎn)生，通過(guò)經(jīng)典豬瘟C株弱毒活疫苗免疫還可以有效阻止亞臨床感染的發(fā)生。一般來(lái)說(shuō)，抗體陽(yáng)性率達(dá)到80%以上，就可以有效阻止病毒在豬群的傳播。通過(guò)免疫實(shí)現(xiàn)豬群豬瘟中和抗體水平達(dá)到高效價(jià)、高陽(yáng)性率、高整齊度的狀態(tài)是豬瘟疫苗免疫的理想結(jié)果，而這一結(jié)果的實(shí)現(xiàn)除了受到豬瘟疫苗品質(zhì)，產(chǎn)品保存、運(yùn)輸條件等因素的影響以外，很大程度上還受到免疫程序可行性的影響。持續(xù)定時(shí)免疫的免疫方法因?yàn)榫哂锌尚行詮?qiáng)、執(zhí)行效率高、免疫無(wú)遺漏的特點(diǎn)在臨床得到了廣泛的應(yīng)用。生產(chǎn)中應(yīng)加強(qiáng)對(duì)持續(xù)定時(shí)免疫豬瘟疫苗臨床效果的監(jiān)測(cè)，以便于了解豬群豬瘟疫苗免疫的真實(shí)狀態(tài)，及時(shí)發(fā)現(xiàn)臨床應(yīng)用效果的不足，進(jìn)而進(jìn)行相應(yīng)改進(jìn)和調(diào)整，以確保豬群豬瘟疫苗的免疫效果，推進(jìn)我國(guó)豬瘟凈化工作進(jìn)程。

◎圖1 豬瘟中和抗體效價(jià)均值及陽(yáng)性率

◎圖2 豬瘟中和抗體效價(jià)均值及離散度