解春寶，羅江蓉，向娜娜，傳良敏△

(1.四川省醫(yī)學科學院·四川省人民醫(yī)院檢驗科，四川成都 610072；2.四川省醫(yī)學科學院·四川省人民醫(yī)院運營部，四川成都，610072；3.川北醫(yī)學院，四川南充 637000)

目前用超速離心法將脂蛋白分為乳糜微粒(CM)、極低密度脂蛋白(VLDL)、低密度脂蛋白(LDL)、中間密度脂蛋白(IDL)、高密度脂蛋白(HDL)。CM主要在小腸黏膜中合成，顆粒最大，三酰甘油水平約為90%～95%，VLDL顆粒直徑次之，三酰甘油水平約為50%～65%，隨著血清中CM及VLDL水平升高，血清逐漸渾濁甚至呈奶油樣外觀。生化肝功能項目是評價肝臟功能的重要指標，提示臨床及指導臨床用藥。但在實際檢驗工作中，易發(fā)現(xiàn)脂血標本，尤其是高CM標本，其中含大量三酰甘油，檢測時大量的CM對生化結果產(chǎn)生影響。據(jù)文獻報道高速離心能消除脂血對生化檢測項目的干擾[1]?，F(xiàn)采用高速離心法處理樣本后對比離心前后數(shù)據(jù)，分析高速離心是否能消除脂血對生化肝功能項目[總蛋白(TP)、清蛋白(ALB)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、堿性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰基轉(zhuǎn)肽酶(GGT)、總膽汁酸(TBA)、總膽紅素(TBIL)、直接膽紅素(DBIL)]檢測的影響。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1樣本 收集50例臨床脂血標本，標本管為紅色真空采血管(不含抗凝劑)，血清標本外觀為奶白色。

1.1.2檢測項目 TP、ALB、AST、ALT、ALP、GGT、TBA、TBIL、DBIL共9項指標。

1.1.3儀器與試劑 儀器：HITACHI LABOSPECT 008全自動生化分析儀；中科中佳HC-2514高速離心機。試劑：TP：四川邁克(批號：507244)；ALB：四川邁克(批號：507236)；AST：四川邁克(批號：508271)；ALT：四川邁克(批號：510347)；ALP：四川邁克(批號：150817)；GGT(批號：160111)；TBA：四川邁克(批號：151124)；TBIL：四川邁克(批號：510332)；DBIL：四川邁克(批號：508268)。

1.1.4質(zhì)控品和校準品 質(zhì)控品購自美國伯樂，校準品購自四川邁克。

1.2方法

1.2.1質(zhì)量控制 檢測標本前檢測液體質(zhì)控血清，當質(zhì)控結果在控后開始樣本分析。

1.2.2樣本檢測 將50例樣本經(jīng)3 000 r/min離心5 min，在生化分析儀上檢測以下項目：TP、ALB、AST、ALT、ALP、GGT、TBA、TBIL、DBIL。再將標本經(jīng)18 000 r/min離心10 min處理，此時上層為懸浮脂質(zhì)，下層為清亮血清，棄去上層用吸管取下層清亮血清在生化分析儀上檢測。

2 結 果

高速離心組與常規(guī)離心組結果比較：ALP、GGT、TBIL 3項在高速離心后水平均升高，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。TP、ALB、AST、ALT、TBA、DBIL六項指標在高速離心前后水平無明顯變化，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.01)，見表1。

表1 高速離心前后生化結果比較

3 討 論

全自動生化分析儀目前多采用雙試劑、雙波長技術，結合凹面光柵進行后分光，分光后的波長由8～16個固定檢測器同時接收，對其中兩個波長的信息用兩具前置放大器放大并進行對數(shù)放大，求出其吸光度。當標本中三酰甘油水平過高，外觀表現(xiàn)為奶白色，其中大量的CM對入射光產(chǎn)生散射，對結果產(chǎn)生影響[2-3]，甚至出現(xiàn)負值。據(jù)文獻報道為消除脂血對檢測結果的影響臨床可采用的方法有以下幾種：生理鹽水稀釋法、乙醚抽提法、沉淀分離法、干化學法和高速離心法[1,4]。較常用的有高速離心法、生理鹽水稀釋法和乙醚抽提法[5-7]。這3種方法各自有其優(yōu)缺點：乙醚抽提法效率高，但其本身對某些生化項目有不確定影響，影響生化結果的準確性，而且乙醚為有機化學溶劑，對于長期在實驗室工作的人員健康不利；生理鹽水稀釋法簡單快捷，但隨著稀釋次數(shù)增加，檢測誤差也隨之增加；高速離心法可行性強，方法簡單易行，易于標準化。有研究報道高速離心方法本身對大部分生化項目無影響，但對一部分項目如肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脫氫酶(LDH)、α-羥基丁酸脫氫酶(HBDH)、肌酐(CRE)、尿酸(UA)、TP有差異，呈直線相關關系[8]。另外有研究發(fā)現(xiàn)高速離心法對血脂正常、外觀清亮的臨床標本及輕中度脂血標本無明顯意義，而對重度脂血標本某些生化項目有意義[9]。本實驗針對TP、ALB、AST、ALT、ALP、GGT、TBA、TBIL、DBIL等9項生化項目采用高速離心法進行，分析高速離心是否能消除脂血對生化肝功能項目檢測的影響。

本研究結果發(fā)現(xiàn)經(jīng)高速離心與常規(guī)離心檢測結果比較TBIL、GGT、ALP 3項水平差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)，而TP、ALB、AST、ALT、TBA、DBIL 6項水平差異無統(tǒng)計學意義(P>0.01)，同時提示高速離心降低脂血標本中CM干擾后，對部分生化肝功能檢測結果有意義。謝艷艷等[10]研究發(fā)現(xiàn)高速離心與常規(guī)離心比較大部分生化項目測定結果差異不明顯，部分生化結果CK-MB、DBIL、HBDH、LDH、CREA、UA、GLU有差異，呈直線相關。本文研究結果與文獻[11-13]報道不完全一致，可能原因如下：(1)標本量及標本所含三酰甘油不一樣，本實驗選取50例脂血標本(外觀奶白色)，標本量及脂血水平不一致可能是導致實驗結果不一致的原因；(2)實驗所用儀器、試劑及條件不一致；(3)脂血標本高速離心心后處理程序并沒有標準化，本實驗離心后采用吸管吸取下層清亮血清，與其他研究人員方法有一定的差異。

4 結 論

本研究提示高速離心可以消除脂血對部分肝功能檢測項目的影響，但是很有必要建立標準操作程序。