管麗紅,陳卓敏,王占科,黃 杰,李麗萍,周 媛,王 康,關(guān)曉輝

(1.中國(guó)人民解放軍第九四醫(yī)院體檢中心，江西南昌 330002；2.中國(guó)人民解放軍第九四醫(yī)院護(hù)理部，江西南昌 330002；3.中國(guó)人民解放軍第九四醫(yī)院檢驗(yàn)科，江西南昌 330002；4.南昌大學(xué)附屬第三醫(yī)院檢驗(yàn)科，江西南昌 330008；5.南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院中醫(yī)科，江西南昌 330006；6.河北省復(fù)員軍人醫(yī)院護(hù)理部，河北邢臺(tái) 054000)

隨著人們生活水平提高，糖尿病發(fā)病率逐年升高[1]。血糖測(cè)定指血液葡萄糖濃度測(cè)定，是醫(yī)院檢驗(yàn)科常規(guī)實(shí)驗(yàn)室檢查項(xiàng)目，血糖測(cè)定不僅在診斷糖尿病和評(píng)估藥物治療效果方面，而且在評(píng)估糖尿病、肥胖和創(chuàng)傷感染患者胰島素抵抗方面，均具有重要參考價(jià)值[2-4]。血糖測(cè)定標(biāo)本質(zhì)量是保證血糖檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性的前提保證，靜脈血標(biāo)本采集質(zhì)量容易控制，血糖測(cè)定準(zhǔn)確性高，同一個(gè)標(biāo)本可重復(fù)測(cè)定，靜脈血標(biāo)本常用于血糖測(cè)定[5]。靜脈血標(biāo)本血糖測(cè)定需要及時(shí)檢測(cè)[6]，但醫(yī)院內(nèi)患者靜脈采血往往不在檢驗(yàn)科生化實(shí)驗(yàn)室內(nèi)完成，而是由專業(yè)的抽血護(hù)士在檢驗(yàn)科以外的門診部和體檢中心以及臨床科室完成，這不可避免造成標(biāo)本不能即刻檢測(cè)，到達(dá)檢驗(yàn)科實(shí)驗(yàn)室需要一定的放置時(shí)間。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，靜脈血標(biāo)本在檢測(cè)之前，放置時(shí)間越長(zhǎng)，血糖檢測(cè)結(jié)果越低，但詳細(xì)機(jī)理尚不完全清楚[7-8]。紅細(xì)胞是血液中主要有形成分，紅細(xì)胞離開人體后，有一定的存活時(shí)間，有文獻(xiàn)報(bào)道離體紅細(xì)胞具有攝取葡萄糖的作用[9-10]，因此，研究不同紅細(xì)胞濃度血標(biāo)本血糖下降程度變化，旨在探討離體血標(biāo)本內(nèi)葡萄糖下降機(jī)理及其與紅細(xì)胞濃度的關(guān)系，為制定不同紅細(xì)胞濃度靜脈血標(biāo)本血糖送檢時(shí)間，提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇本院體檢中心不同紅細(xì)胞濃度人群60例，男48例，女12例，年齡8～70歲，均否認(rèn)患有糖尿病、白血病、再生障礙性貧血等血液病。根據(jù)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(RBC)大小，參照RBC正常參考范圍(男性：4.5×1012/L～5.5×1012/L，女性：4.0×1012/L～5.0×1012/L)[11]，將入選人群分為3組：低紅細(xì)胞濃度標(biāo)本組(RBC-L組，n=20)，其中男性RBC小于4.5×1012/L，女性RBC小于4.0×1012/L；正常紅細(xì)胞濃度標(biāo)本組(RBC-N組，n=20)，其中男性和女性RBC均在正常參考范圍內(nèi)；高紅細(xì)胞濃度標(biāo)本組(RBC-H組，n=20)，其中男性RBC大于5.5×1012/L，女性RBC大于5.0×1012/L。男女構(gòu)成比、年齡構(gòu)成比、空腹血糖(GLU0)水平之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。所有研究對(duì)象均知情同意，各組基本情況見表1。

表1 各組研究對(duì)象基本情況

1.2儀器與試劑 10 mL肝素鈉抗凝真空采血管由浙江康是醫(yī)療器械有限公司生產(chǎn)，血糖檢測(cè)試劑盒和MR2000型全自動(dòng)生化分析儀由深圳邁瑞生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)，臺(tái)式低速離心機(jī)由湖南長(zhǎng)沙湘儀離心機(jī)儀器有限公司生產(chǎn)。

1.3標(biāo)本處理和檢測(cè)方法 真空采血管空腹抽取肝素鈉抗凝全血標(biāo)本5～6 mL，充分混勻，防止標(biāo)本出現(xiàn)紅細(xì)胞凝集，并準(zhǔn)確記錄抽血時(shí)間(精確到分鐘)。抗凝血標(biāo)本離心后析出血漿，即刻放入全自動(dòng)生化分析儀標(biāo)本位，通過(guò)酶動(dòng)力法進(jìn)行血糖測(cè)定并記錄為GLU0。全自動(dòng)生化分析儀吸樣檢測(cè)后，取出血標(biāo)本，小心混合血標(biāo)本中血漿和紅細(xì)胞層，形成全血狀態(tài)，放置室溫(25.0±2.0)℃ 1 h，再離心后，檢測(cè)血糖并記錄為GLU1，再次搖勻血標(biāo)本，混合血漿和紅細(xì)胞層呈全血狀態(tài)，繼續(xù)放置1 h，再離心后檢測(cè)血糖并記錄為GLU2，同樣操作步驟，依次記錄全血標(biāo)本即刻及放置1、2、3、4、5、6、7、8、12和24 h后的血糖值為GLU0、GLU1、GLU2、GLU3、GLU4、GLU5、GLU6、GLU7、GLU8以及GLU12和GLU24，計(jì)算并比較各組血標(biāo)本室溫放置平均每小時(shí)血糖下降量和血糖下降累積量變化量。放置x小時(shí)的平均每小時(shí)血糖下降量計(jì)算公式為：ΔGLU/h=(GLUx-GLU0)/x；放置x小時(shí)血糖下降累積量計(jì)算公式為：ΔGLU=GLUx-GLU0。

2 結(jié) 果

2.1不同組血標(biāo)本不同放置時(shí)間血糖檢測(cè)結(jié)果變化 3組血液標(biāo)本隨著放置時(shí)間增長(zhǎng)，血糖檢測(cè)數(shù)值呈下降趨勢(shì)；RBC-N組和RBC-H組GLU2檢測(cè)數(shù)值均低于GLU0檢測(cè)值，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；3組血標(biāo)本GLU3檢測(cè)數(shù)值均低于該組GLU0檢測(cè)值，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。RBC-H組血液標(biāo)本GLU4檢測(cè)值低于RBC-N組，RBC-N組GLU4檢測(cè)值低于RBC-L組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。見表2。

表2 不同組患者血標(biāo)本不同放置時(shí)間血糖檢測(cè)值

注：與本組GLU0比較，*P<0.01；與RBC-N組比較，#P<0.01

2.2不同組血標(biāo)本不同放置時(shí)間平均每小時(shí)血糖檢測(cè)結(jié)果下降量變化 RBC-L組、RBC-N組和RBC-H組血標(biāo)本放置4 h后平均每小時(shí)血糖檢測(cè)值下降量均低于放置2 h內(nèi),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，血標(biāo)本平均每小時(shí)血糖檢測(cè)值下降量均隨放置時(shí)間呈下降趨勢(shì)，血標(biāo)本放置時(shí)間越長(zhǎng)，平均每小時(shí)血糖下降量越小。RBC-H組放置不同時(shí)間點(diǎn)內(nèi)平均每小時(shí)血糖檢測(cè)值下降量高于RBC-N組，RBC-N組高于RBC-L組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，同樣放置時(shí)間的血標(biāo)本平均每小時(shí)血糖檢測(cè)值下降量隨紅細(xì)胞濃度升高呈升高趨勢(shì)，血標(biāo)本紅細(xì)胞濃度越高，血糖下降量越大。見表3。

2.3不同組血標(biāo)本不同放置時(shí)間血糖檢測(cè)值下降累計(jì)量變化 RBC-L組、RBC-N組和RBC-H組血標(biāo)本放置4 h后血糖下降累計(jì)量均高于放置2 h(P<0.01)，且血標(biāo)本血糖下降累計(jì)量均隨放置時(shí)間呈增多趨勢(shì)，血標(biāo)本放置時(shí)間越長(zhǎng)，血糖下降累計(jì)量越高。RBC-H組放置不同時(shí)間點(diǎn)血糖下降累計(jì)量高于RBC-N組，RBC-N組高于RBC-L組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，同樣放置時(shí)間的血標(biāo)本血糖下降累計(jì)量，隨紅細(xì)胞濃度升高呈升高趨勢(shì)，血標(biāo)本紅細(xì)胞濃度越高，血糖下降量越大。見表4。

表3 不同組血標(biāo)本不同放置時(shí)間平均每小時(shí)血糖

注：與本組2 h內(nèi)數(shù)據(jù)比較，*P<0.01；與同樣放置時(shí)間RBC-N組數(shù)據(jù)比較，#P<0.01

表4不同組血標(biāo)本不同放置時(shí)間血糖累計(jì)下降量

放置時(shí)間RBC-L組(n=20)RBC-N組(n=20)RBC-H組(n=20)2 h0.38±0.050.70±0.040.96±0.074 h0.68±0.04?#1.24±0.08?1.84±0.09?#8 h1.12±0.14?#2.00±0.01?2.96±0.31?#12 h1.44±0.07?#2.64±0.30?3.60±0.54?#24 h2.40±0.18?#3.84±0.22?4.80±0.57?#

注：與本組2 h內(nèi)數(shù)據(jù)比較，*P<0.01；與同樣放置時(shí)間RBC-N組數(shù)據(jù)比較，#P<0.01

3 討 論

檢驗(yàn)科是檢驗(yàn)患者標(biāo)本的醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室[12]，檢驗(yàn)結(jié)果質(zhì)量控制包括分析前、分析中和分析后，其中分析前是檢驗(yàn)結(jié)果質(zhì)量控制的重要環(huán)節(jié)[13]，研究標(biāo)本離體后標(biāo)本內(nèi)檢驗(yàn)指標(biāo)信息變化，對(duì)改善標(biāo)本分析前質(zhì)量控制具有指導(dǎo)意義。靜脈血標(biāo)本離開人體后隨著放置時(shí)間延長(zhǎng)，葡萄糖水平明顯下降[14]。

靜脈血標(biāo)本離體后標(biāo)本內(nèi)葡萄糖水平變化和人體內(nèi)血葡萄糖水平變化不同。人體內(nèi)血糖變化取決于體內(nèi)葡萄糖來(lái)源和去路的比較[15]，而靜脈血離體后標(biāo)本內(nèi)的葡萄糖不會(huì)再有來(lái)源，也不存在人體運(yùn)動(dòng)消耗葡萄糖的情況，離體后血標(biāo)本內(nèi)葡萄糖水平下降與離體后血標(biāo)本后內(nèi)葡萄糖的去路有關(guān)。血標(biāo)本內(nèi)沒(méi)有體內(nèi)組織細(xì)胞，只有血液細(xì)胞，血標(biāo)本離體后葡萄糖去路與血細(xì)胞具有攝取葡萄糖能力有關(guān)。

靜脈血葡萄糖測(cè)定是測(cè)定血漿或血清中的葡萄糖濃度，并不包括血液中紅細(xì)胞內(nèi)的葡萄糖濃度。從理論上講，靜脈血標(biāo)本離體后葡萄糖去路有2種途徑，一是葡萄糖直接被降解，二是葡萄糖進(jìn)入紅細(xì)胞、白細(xì)胞等細(xì)胞內(nèi)。由于外周血標(biāo)本紅細(xì)胞數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于白細(xì)胞數(shù)量，血漿葡萄糖進(jìn)入紅細(xì)胞內(nèi)可能是導(dǎo)致血液標(biāo)本離體后血糖下降的主要原因。

為了研究離開體內(nèi)的血標(biāo)本內(nèi)葡萄糖去路及其機(jī)理，筆者選擇不同RBC的血糖正常人群作為研究對(duì)象，觀察外周血標(biāo)本離體后不同放置時(shí)間血糖下降量與紅細(xì)胞濃度的關(guān)系，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，靜脈血標(biāo)本離體后2 h血糖測(cè)定濃度就明顯低于即刻檢測(cè)的血糖結(jié)果，并隨標(biāo)本放置時(shí)間延長(zhǎng)而呈降低趨勢(shì)，降低速度與RBC呈正比，血標(biāo)本紅細(xì)胞濃度越高，血糖降低速度越快，提示高紅細(xì)胞濃度人群的外周血標(biāo)本血糖測(cè)定更需要及時(shí)送檢，因其血標(biāo)本血糖濃度下降速度更快。血標(biāo)本內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)量多，攝取的葡萄糖量也多，可能是高紅細(xì)胞濃度血標(biāo)本血糖下降速度更快的原因之一。低紅細(xì)胞濃度的貧血患者血標(biāo)本血糖下降速度較慢，可能與標(biāo)本內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)量少，攝取的葡萄糖也相對(duì)少有關(guān)。有文獻(xiàn)報(bào)道，紅細(xì)胞膜上有葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體[16]，離體后抗凝血標(biāo)本內(nèi)紅細(xì)胞可能仍具有攝取和轉(zhuǎn)運(yùn)葡萄糖的能力。

在醫(yī)院血糖檢測(cè)具體實(shí)踐中，很難做到靜脈血標(biāo)本離體后即刻就進(jìn)行血糖測(cè)定。如果能準(zhǔn)確記錄靜脈血標(biāo)本采血時(shí)間，研究血標(biāo)本不同放置時(shí)間下降規(guī)律，包括每小時(shí)血糖下降量和累積下降量等，對(duì)科學(xué)糾正標(biāo)本離體一定時(shí)間后的血糖檢測(cè)不準(zhǔn)確性具有重要意義。筆者研究發(fā)現(xiàn)，離體靜脈血標(biāo)本血糖下降存在一定的規(guī)律，離體靜脈血標(biāo)本平均每小時(shí)血糖下降量(離體血漿葡萄糖消失的量)不僅與RBC呈正比，而且還與放置時(shí)間呈反比，單位時(shí)間葡萄糖下降量，隨著離體標(biāo)本體外放置時(shí)間延長(zhǎng)，呈下降趨勢(shì)，提示離體靜脈血標(biāo)本內(nèi)的紅細(xì)胞攝取紅細(xì)胞的能力隨放置時(shí)間延長(zhǎng)而降低。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，離體靜脈血標(biāo)本2 h內(nèi)血糖下降量速度最快，正常紅細(xì)胞濃度標(biāo)本離體2 h后，血糖平均每小時(shí)下降0.35 mmol/L，離體4 h，平均每小時(shí)下降0.31 mmol/L，高紅細(xì)胞濃度外周血標(biāo)本血糖下降速度更快，而低紅細(xì)胞濃度的貧血標(biāo)本血糖下降速度相對(duì)慢，提示靜脈離體血標(biāo)本血糖下降與紅細(xì)胞數(shù)量和活性有關(guān)。

結(jié)果還發(fā)現(xiàn)，盡管離體血標(biāo)本平均每小時(shí)血糖下降量隨放置時(shí)間呈下降趨勢(shì)，但隨著放置時(shí)間延長(zhǎng)，血糖下降累積量越來(lái)越大，尤其RBC-H組血糖累積下降量更明顯，如果患者血糖為低血糖或血糖偏低，靜脈血標(biāo)本放置24 h，血糖檢測(cè)值可能會(huì)出現(xiàn)結(jié)果為0的現(xiàn)象，提示對(duì)于低血糖患者或血糖在正常參考范圍上限附近的人群，血糖測(cè)定標(biāo)本更應(yīng)該及時(shí)進(jìn)行檢測(cè)，否則血糖檢測(cè)結(jié)果可能嚴(yán)重影響臨床醫(yī)生對(duì)疾病和亞健康程度的準(zhǔn)確判斷。離體靜脈血標(biāo)本血糖下降機(jī)理可能還涉及其他因素，紅細(xì)胞濃度可能只是其中的一種影響因素。靜脈血標(biāo)本離體后血糖變化詳細(xì)機(jī)理，值得進(jìn)一步研究。