丁 航，薛 雨，楊 勤，馬衛(wèi)列，李彩虹，張志珍*

(1.廣東醫(yī)科大學(xué) 生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室，廣東 東莞 523808；2.湛江市質(zhì)量計(jì)量監(jiān)督檢測(cè)所，廣東 湛江 524000)

近年來(lái)，不斷暴發(fā)流行由病毒引起的傳染病，病毒性疾病給人們的健康造成了極大的威脅。而目前臨床上用于治療流感病毒感染的藥物，存在耐藥性、神經(jīng)毒性以及胃腸道毒副作用等缺陷，急需發(fā)展新型抗流感病毒藥物，以解決目前面臨的流感防治問(wèn)題。我國(guó)研究和使用中藥的歷史悠久，用中藥治療流感,因其藥源豐富、價(jià)格低廉、治病效果好、使用安全而受到廣大人民群眾的信賴,并越來(lái)越被國(guó)際社會(huì)所接受，逐漸成為研究的熱點(diǎn)。對(duì)中藥的研究除了其有機(jī)成分外,微量元素所起的作用也日益受到人們的重視。越來(lái)越多的學(xué)者認(rèn)為,中藥中微量元素與其功效存在著一種必然聯(lián)系[1],它們?cè)诠πе姓嫉牡匚徊蝗莸凸馈?/p>

甘草始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，被列為上品。文獻(xiàn)報(bào)道，甘草具有抗菌、抗病毒、抗癌等多種活性[2]。魚(yú)腥草為三白草科蕺菜屬植物蕺菜Houttuynia cordata Thunb.的全草，主要含有揮發(fā)油、黃酮、生物堿、多糖、有機(jī)酸類(lèi)等活性成分，具有抗菌、抗病毒、增強(qiáng)機(jī)體免疫力、抗炎、抗腫瘤、抗過(guò)敏、平喘等功效[3]。金銀花為忍冬科植物忍冬Lonicera japonica的干燥花蕾。治療各種瘟疫癰腫病證，未見(jiàn)有毒副作用和耐藥性，能與其他西藥抗菌素藥物結(jié)合使用。近年來(lái)國(guó)內(nèi)外學(xué)者運(yùn)用現(xiàn)代理論，從科學(xué)的角度證實(shí)了金銀花具有抗流感病毒的作用[4-5]。穿心蓮Andrographis paniculata(Burm. f.) Nees為爵床科穿心蓮屬植物，性味苦寒，有清熱燥濕、瀉火解毒功效，被譽(yù)為“天然抗素”。具有抗炎、抗病毒、抗腫瘤等藥理作用而備受關(guān)注[6]。本研究將采用微波消解-ICP-MS 技術(shù)測(cè)定甘草、魚(yú)腥草、金銀花、穿心蓮這4種常見(jiàn)抗病毒中藥材的微量元素，從不同的角度和層次為這4種中藥的開(kāi)發(fā)和利用提供科學(xué)依據(jù)和理論基礎(chǔ)。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 試劑與儀器

甘草、魚(yú)腥草、金銀花、穿心蓮購(gòu)自湛江市區(qū)中藥材店。實(shí)驗(yàn)用的優(yōu)級(jí)純硝酸購(gòu)自廣州化學(xué)試劑廠，實(shí)驗(yàn)用水為超純水。鋅、錳、銅、鐵等元素標(biāo)準(zhǔn)溶液均為光譜純,由國(guó)家鋼鐵材料測(cè)試中心鋼鐵研究院總院和國(guó)家有色金屬及電子材料分析中心提供。

Thermo scientific X-sereies 2四級(jí)桿電感耦合等離子體質(zhì)譜儀；Milestone ETHOS ONE微波消解儀；METTLER TOLEDO XS205分析天平；Sartorins N-EVP111純凈水發(fā)生器。

1.2 樣品制備

原藥樣品：把甘草、魚(yú)腥草、金銀花、穿心蓮用去離子水清洗干凈并烘干，將藥材碎成粉末。

1.3 測(cè)定前樣品的處理

稱取樣品粉末1.0 g(精確至0.001 g)放在微波消解罐中，加入10 mL濃硝酸，加蓋并旋緊管蓋放置過(guò)夜，按照微波消解儀標(biāo)準(zhǔn)操作步驟進(jìn)行消解。冷卻以后取出，緩慢打開(kāi)蓋排氣，用少量水沖洗內(nèi)蓋，將微波消解管放在控溫加熱板上100℃加熱30 min，冷卻用水定容至50 mL，混勻備用，同時(shí)做空白試驗(yàn)。

1.4 微波消解儀的工作條件

5 min內(nèi)800 W功率下升到100℃，恒溫5 min，然后5 min內(nèi)1000 W功率下，升到150℃，恒溫10 min，最后5 min內(nèi)1000 W功率下升到180℃，恒溫20 min。

1.5 測(cè)定

1.5.1 標(biāo)準(zhǔn)系列

見(jiàn)表1。

1.5.2 樣品測(cè)定

按表2 所述儀器的工作條件，用ICP-MS方法直接測(cè)定樣品中元素的含量。

表2 電感耦合等離子體質(zhì)譜儀儀器工作參數(shù)

2 結(jié)果與討論

2.1 方法學(xué)考察

表1中顯示,在本測(cè)定的工作范圍內(nèi)，各離子標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性關(guān)系良好。

2.2 樣品的測(cè)定結(jié)果

測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 常見(jiàn)抗病毒中藥微量元素的含量 (mg·kg-1)

2.3 討論

生物體內(nèi)的微量元素是指含量占生物體總質(zhì)量0.01%以下的元素。微量元素在人體中的含量雖少,但它們卻是生命活動(dòng)不可缺少的一部分[7]。鐵、鋅是人體必需的微量元素，是免疫功能的重要影響因素，其含量減少可造成機(jī)體抵抗力下降，這兩種元素與多種酶的組成和生理功能有關(guān)，機(jī)體中這些元素的缺乏可減弱免疫機(jī)制，降低免疫力，導(dǎo)致感染性疾病。研究表明，銅、鋅、鐵、鈣水平低下與反復(fù)感染關(guān)系密切[8]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,研究的4種抗病毒藥材中,鐵元素含量都是最豐富的,其中魚(yú)腥草中鐵含量最高,達(dá)到了253.27 mg/kg，錳和鋅含量次之,銅含量最少。鐵、錳、鋅、銅元素與這些中藥的抗病毒作用有關(guān)系，亦可能是它們發(fā)揮抗病毒作用的有效成分之一。具體這些中藥的鐵、錳、鋅、銅元素究竟如何影響其藥效的有待進(jìn)一步研究。

我國(guó)中藥資源極為豐富，中醫(yī)抗病毒有現(xiàn)實(shí)意義和廣闊前景,中藥在流感防治、治療問(wèn)題上具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì),深入研究中藥抗病毒的物質(zhì)基礎(chǔ)及其分子機(jī)制具有重要意義。而中藥大多都含有一定的微量元素，中藥的藥效、藥性以及毒理都與中藥微量元素有著密切的關(guān)系。近年來(lái),對(duì)中藥微量元素的研究使某些不能用傳統(tǒng)中醫(yī)理論解釋的中藥功效,可以通過(guò)微量元素的生理作用來(lái)解釋,這對(duì)中藥藥效的理論研究和發(fā)展,具有非常重要的意義[7]。有研究表明,中草藥含的微量元素不僅對(duì)人體內(nèi)微量元素含量有調(diào)節(jié)作用,一些微量元素含量豐富的藥材可以直接起到對(duì)各種疾病的直接或間接治療作用[7]。在前人的研究基礎(chǔ)之上,本實(shí)驗(yàn)利用微波消解-原子吸收分光光度法定量分析4種常見(jiàn)抗病毒中藥的微量元素含量,初步探討微量元素在這4種藥材中的含量水平及其與藥材藥效的關(guān)系。