李長于，廖上富，胡 丹，葉 濤

(浙江方圓檢測集團(tuán)股份有限公司，浙江 杭州 310018)

苯系物是一種重要的化工原料，通常包括苯、甲苯、乙苯、對(duì)二甲苯、間二甲苯、異丙苯、鄰二甲苯和苯乙烯等化合物，被廣泛應(yīng)用于染料、合成橡膠、建筑材料、裝飾材料、人造板家具中。研究表明，苯系物是水體、空氣、土壤中常見的有機(jī)污染物，其毒性很大，已被世界衛(wèi)生組織確定為強(qiáng)烈致癌物，嚴(yán)重威脅人類健康。圓珠筆是青少年兒童學(xué)習(xí)的必備文具，它是一種通過球珠滾動(dòng)帶出書寫介質(zhì)形成字跡的書寫工具。按照書寫介質(zhì)油墨粘度材質(zhì)的不同可將圓珠筆分為油性圓珠筆(書寫介質(zhì)為油性油墨)、水性圓珠筆(書寫介質(zhì)為水性墨水)和中性筆(書寫介質(zhì)的粘度介于水性和油性之間)。在圓珠筆生產(chǎn)過程中，部分商家為了降低成本，有時(shí)會(huì)加入溶解性更好的有機(jī)溶劑原料來增強(qiáng)圓珠筆筆芯的書寫流利性，同時(shí)讓產(chǎn)品在使用過程中散發(fā)出一些香味來吸引顧客，而這些原料可能含有過量苯系物，且香味越重，苯系物的含量可能會(huì)越高。青少年若是在學(xué)習(xí)中長期使用這類圓珠筆文具，會(huì)造成慢性苯系物中毒，引起造血和免疫機(jī)能損傷，甚至?xí)l(fā)白血病。近年來，國內(nèi)外對(duì)苯系物的文獻(xiàn)報(bào)道主要集中在空氣[1]、水體[2-5]、土壤[6-8]、膠黏劑[9-10]、涂料[11-13]、塑料材質(zhì)產(chǎn)品[14-16]、人造板[17]、橡皮[18]和修正液[19]等方面，而對(duì)于圓珠筆中苯系物的檢測尚未見報(bào)道。目前，苯系物的測定方法主要有氣相色譜法、氣相色譜-質(zhì)譜法等，前處理通常采用頂空、吹掃捕集、熱脫附、頂空固相微萃取和溶劑萃取法等，尤其以頂空和頂空固相微萃取為主。

本文以頂空作為進(jìn)樣方式，建立了氣相色譜-質(zhì)譜法測定圓珠筆中苯系物的含量。該方法前處理簡單、快速、成本低，同時(shí)利用質(zhì)譜檢測器定性準(zhǔn)確的特點(diǎn)，很好地避免了氣相色譜法檢測過程中的假陽性結(jié)果，適用于圓珠筆中苯系物的快速檢測。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

7890A GC/5975C MSD氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(美國Agilent公司)，配Chemstation數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)；TurboMatrix 40 Trap頂空進(jìn)樣器(美國PerkinElmer公司)。

苯、甲苯、乙苯、對(duì)二甲苯、間二甲苯、異丙苯、鄰二甲苯和苯乙烯8種苯系物標(biāo)準(zhǔn)品純度均大于99.0%，購于美國AccuStandard公司；甲醇(HPLC級(jí)，美國天地公司)。

1.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

準(zhǔn)確稱取8種苯系物標(biāo)準(zhǔn)品各10.0 mg(精確至0.1 mg)于10 mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容，分別配制成1 000 mg/L的單標(biāo)儲(chǔ)備液，然后吸取各單標(biāo)儲(chǔ)備液0.1 mL至同一10 mL容量瓶中，用水稀釋配制成8種苯系物質(zhì)量濃度均為10 mg/L混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。

1.3 色譜-質(zhì)譜條件

1.3.1 色譜條件平衡溫度70 ℃；進(jìn)樣溫度80 ℃；傳輸線溫度90 ℃；平衡時(shí)間40 min；進(jìn)樣時(shí)間：0.05 min。毛細(xì)管色譜柱：HP-INNOWax(60 m×320 μm×0.25 μm)；進(jìn)樣口溫度：150 ℃；載氣：高純He(純度≥99.999%)；流速：1.3 mL/min；進(jìn)樣方式：分流進(jìn)樣，分流比5∶1；升溫程序：初溫35 ℃，保持5 min，以5 ℃/min升至100 ℃，再以30 ℃/min升至220 ℃，保持1 min。

1.3.2 質(zhì)譜條件電離方式為EI，離子源溫度230 ℃，四極桿溫度150 ℃；測定模式為全掃描(Fullscan)和選擇離子監(jiān)測(SIM)，質(zhì)量掃描范圍：29～100 amu；溶劑延遲：7.5 min。

1.4 樣品前處理

準(zhǔn)確稱取圓珠筆筆芯中的油墨0.1 g(精確至0.1 mg)試樣置于20 mL頂空瓶中，加水至10 mL，加入1 g氯化鈉，立即密封，按儀器操作條件進(jìn)行測定。

2 結(jié)果與討論

2.1 色譜柱的選擇

實(shí)驗(yàn)選用HP-5MS(30 m×250 μm×0.25 μm)、HP-INNOWAX(60 m×320 μm×0.25 μm)和VF-1301MS(30 m×250 μm×1.0 μm) 3種不同毛細(xì)管色譜柱考察分離效果。

表1 8種苯系物保留時(shí)間和選擇離子Table 1 Retention time and selected ions of eight benzene homologues

*quantitation ion(定量離子)

圖1 8種苯系物總離子流圖Fig.1 Total ion chromatogram of eight benzene homologues1.benzene,2.toluene,3.ethylbenzene,4.p-xylene,5.m-xylene,6.isopropylbenzene,7.o-xylene,8.styrene

結(jié)果發(fā)現(xiàn)：沸點(diǎn)相近的對(duì)二甲苯和間二甲苯在HP-5MS和VF-1301MS柱上作為共流出物出峰，且鄰二甲苯和苯乙烯不能完全分離，而在HP-INNOWax柱上8種苯系物分離度良好，因此選擇HP-INNOWax柱作為分離柱。

2.2 特征碎片離子的選擇

在全掃描模式下，對(duì)8種苯系物進(jìn)行氣相色譜-質(zhì)譜分析，選擇豐度高、干擾低的特征離子作為定量離子(表1)，同時(shí)選擇豐度較高、干擾較低的2個(gè)特征離子作為定性離子，通過定性離子與定量離子豐度比值對(duì)目標(biāo)化合物進(jìn)行定性。8種苯系物的總離子流圖見圖1。

2.3 平衡溫度的選擇

選擇0.02 mol/L苯系物混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，在平衡時(shí)間為30 min時(shí)，考察平衡溫度(45、50、55、60、65、70、75 ℃)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。結(jié)果表明，隨著溫度的升高，氣相中的苯系物濃度隨之增大，70 ℃時(shí)基本達(dá)到氣液平衡飽和狀態(tài)?？紤]到溫度過高時(shí)，樣品中其他揮發(fā)性干擾物質(zhì)會(huì)對(duì)苯系物的檢測產(chǎn)生影響，同時(shí)溫度過高，也會(huì)導(dǎo)致水蒸氣大量進(jìn)入，從而降低氣相中目標(biāo)化合物的相對(duì)濃度，影響質(zhì)譜檢測器的壽命。綜合考慮，最終選擇平衡溫度為70 ℃。

2.4 平衡時(shí)間的選擇

實(shí)驗(yàn)考察了平衡時(shí)間為10、15、20、25、30、40、50 min時(shí)對(duì)分析結(jié)果的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，隨著平衡時(shí)間的延長，氣相中苯系物的濃度隨之增大，考慮到檢測的時(shí)效性，且40 min時(shí)樣品已基本達(dá)到平衡，最終選擇平衡時(shí)間為40 min。

2.5 方法的線性關(guān)系及檢出限

由于圓珠筆中的油墨基質(zhì)較為復(fù)雜，檢測過程中可能會(huì)存在基質(zhì)效應(yīng)(ME)，影響方法的靈敏度及定量準(zhǔn)確性。實(shí)驗(yàn)過程中分別用水直接稀釋及加入空白樣品后加水稀釋配制相同濃度的8種苯系物混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，根據(jù)公式ME=(空白基質(zhì)溶液中目標(biāo)物的響應(yīng)值/純?nèi)軇┲邢鄳?yīng)目標(biāo)物的響應(yīng)值-1)×100%計(jì)算，結(jié)果顯示，8種目標(biāo)物基質(zhì)效應(yīng)均小于20%，基本可以忽略，所以實(shí)驗(yàn)采用純水稀釋的混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。

分別吸取10 mg/L混合標(biāo)準(zhǔn)溶液適量至20 mL頂空瓶中，用水稀釋至10 mL，配制成8種苯系物質(zhì)量濃度為0.005、0.01、0.02、0.05、0.1、0.2、0.5 mg/L的系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，在優(yōu)化條件下測定。以各苯系物定量離子峰面積(y)對(duì)其質(zhì)量濃度(x，mg/L)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果顯示，在0.005～0.5 mg/L質(zhì)量濃度范圍內(nèi)，8種苯系物峰面積與其質(zhì)量濃度的線性關(guān)系良好。稱取0.1 g陰性空白樣品至20 mL頂空瓶中，加入0.01 mL 1 mg/L苯系物混合標(biāo)準(zhǔn)溶液(即空白樣品加標(biāo)水平為0.1 mg/kg)，按“1.4”步驟進(jìn)行處理，上機(jī)測試，分別以3倍信噪比(S/N=3)和10倍信噪比(S/N=10)計(jì)算該方法檢出限(LOD)和定量下限(LOQ)。8種苯系物的線性方程、相關(guān)系數(shù)、LOD及LOQ見表2。

表2 8種苯系物的線性方程、相關(guān)系數(shù)、檢出限和定量限Table 2 Linear equations,correlation coefficients,limits of detection(LODs) and limits of quantitation(LOQs) of eight benzene homologues

2.6 方法的回收率及精密度

稱取0.1 g樣品3份，分別加入1 mg/L混合標(biāo)準(zhǔn)溶液0.05、0.1、0.5 mL，即得到添加水平分別為0.5、1.0、5.0 mg/kg加標(biāo)樣品，在優(yōu)化條件下測定。結(jié)果顯示，8種苯系物平均回收率為86.0%～104%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.3%～9.6%(表3)。

表3 圓珠筆中8種苯系物加標(biāo)回收率及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(n=5)Table 3 Spiked recoveries and RSDs of eight benzene homologues in ball-point pen(n=5)

圖2 陽性樣品色譜圖Fig.2 Chromatogram of a positive sample1.benzene,2.toluene,3.ethylbenzene,4.p-xylene,5.m-xylene,6.isopropylbenzene,7.o-xylene,8.styrene

2.7 實(shí)際樣品檢測

應(yīng)用本方法對(duì)市售6款共25批次風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測圓珠筆樣品進(jìn)行測試，根據(jù)保留時(shí)間和離子豐度比定性。結(jié)果顯示，其中8批次樣品均有8種苯系物檢出，其他批次樣品也有6種或7種物質(zhì)檢出，樣品中目標(biāo)物質(zhì)的檢出率為100%，含量為0.04～29.13 mg/kg，結(jié)果見表4,典型的陽性樣品色譜圖如圖2所示。

3 結(jié) 論

圓珠筆作為青少年兒童學(xué)習(xí)中必備的學(xué)習(xí)用具，市場需求量大，而揮發(fā)性苯系物可能作為高風(fēng)險(xiǎn)因素存在于圓珠筆中，在使用時(shí)對(duì)人體造成的安全隱患應(yīng)引起重視。本文建立了圓珠筆樣品中苯系物快速靈敏的頂空/氣相色譜-質(zhì)譜分析方法,采用頂空作為進(jìn)樣方式，無需復(fù)雜前處理操作，簡便快捷，準(zhǔn)確度高，檢出限低，具有較高的實(shí)用價(jià)值，可應(yīng)用于檢測機(jī)構(gòu)大批量樣品的檢測。

表4 樣品測定結(jié)果Table 4 Measurement result of the sample (mg/kg)

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