蘭連成,楊梅雄,唐 清,呂自力,云 翔,黃 麗,陳秀奇,單慶文

蘭連成,楊梅雄,唐清,云翔,黃麗,陳秀奇,單慶文,廣西醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院兒科 廣西壯族自治區(qū)南寧市 530021

呂自力,廣西醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院病理科 廣西壯族自治區(qū)南寧市 530021

核心提要：急性期腹型過敏性紫癜(henoch-schonlein purpura,HSP)患兒Th17、Tc17細胞表達增高,IL-17在全身及腸黏膜局部一致性表達增高,提示IL-17與腹型HSP的發(fā)病及腸黏膜損傷具有相關性;患兒腸道雙歧桿菌數量減少,雙歧桿菌/大腸桿菌比值＜1,提示腸道菌群失調與腹型HSP發(fā)病機制有關.

0 引言

過敏性紫癜(henoch-schonlein purpura,HSP)是兒童時期最常見的出血性疾病之一,是由免疫復合介導的累及全身多個器官,以小血管炎癥為主要病變的系統(tǒng)性血管炎;其臨床分型有單純皮膚型、腹型、腎型、關節(jié)型以及混合型HSP.該病的發(fā)生率呈逐年上升趨勢,而以皮膚紫癜伴有腹痛、惡心、嘔吐、便血等消化道癥狀為主要表現的腹型HSP可占本病的50%-75%[1,2],造成胃腸黏膜不同程度的損害.近年研究發(fā)現細胞免疫失調及細胞因子紊亂、腸道微生物屏障菌群結構改變與腹型HSP的發(fā)病及病程有關[3].

IL-17是一種強大的前炎性細胞因子,在介導炎癥反應過程中發(fā)揮中樞性調節(jié)作用[4].Th17與Tc17細胞是IL-17的兩大主要來源細胞,Th17細胞產生的IL-17與多種細胞因子協(xié)同作用參與體內固有免疫、黏膜免疫、血管新生等多種生理病理反應[5].Tc17細胞主要通過分泌IL-17、IFN-γ、TNF-α等細胞因子增強T細胞、中性粒細胞和巨噬細胞在炎癥部位的聚集.兩者的分化及在疾病中的作用受細胞因子微環(huán)境的調節(jié).IL-6與轉錄生長因子-β(tissue growth factor-β,TGF-β)是啟動Th17、Tc17細胞的分化的關鍵,IL-23對已分化的Th17、Tc17細胞起穩(wěn)定和維持其細胞特性的作用[6].IFN-γ是Th1細胞的主要效應因子,研究表明IFN-γ與IL-17之間即相互協(xié)調又相互拮抗.兩者之間的平衡紊亂可導致組織免疫病理的發(fā)生[5].

目前已有多項研究表明IL-17及Th17細胞在外周血中高表達與HSP的發(fā)病機制有關,IL-17可能通過介導炎癥反應促進HSP患者靶器官皮膚及腎小球的病理損傷[7,8].但關于IL-17與腹型HSP的發(fā)病及腸黏膜屏障損傷的研究較少,本研究通過檢測急性期腹型HSP患兒外周血Th17、Tc17細胞比例和外周血及十二指腸黏膜中IL-17及其相關細胞因子的表達以及腸道菌群結構變化,旨在探討外周血、腸黏膜IL-17及其相關細胞因子的變化在腹型HSP發(fā)病機制中的作用,以及了解腸道菌群失調與腹型HSP發(fā)病機制的關系,以期為臨床免疫治療腹型HSP提供一定的理論依據.

1 材料和方法

1.1 材料 選取2015-11/2018-02在廣西醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院兒科病區(qū)住院的確診為腹型HSP的急性期患兒26例為觀察組,其中男19例,女7例;年齡7.46歲±3.01歲.另取健康體檢兒童16例為健康對照組,其中男9例,女7例;年齡5.6歲±3.0歲.于清晨空腹時采集肘靜脈血3 mL,并留取糞便標本.兩組兒童在年齡、性別上的差異無統(tǒng)計學意義.選取20例接受胃鏡檢查的急性期腹型HSP患兒為病例組,其中男18例,女2例;年齡8.2歲±3.1歲.8例胃鏡檢查示無明顯黏膜病變的兒童為對照組,其中男3例,女5例;年齡10.62歲±3.72歲.于胃鏡檢查時采集十二指腸黏膜活檢組織標本.所有腹型HSP患兒的臨床診斷均符合《諸福棠實用兒科學》第八版診斷標準[9].排除其他自身免疫性疾病、過敏性疾病或感染、腫瘤性疾病.該臨床研究已經通過醫(yī)院倫理委員會審核,受試者及家屬對該研究均已知情同意.

1.2 方法

1.2.1 流式細胞術：取所收集外周血,經Ficoll密度梯度離心法分離獲得單個核細胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),加佛波酯離子霉素混合物、布雷非德菌素A/莫能霉素混合物于培養(yǎng)液混合,于37 ℃的體積分數為5%的CO2培養(yǎng)箱中刺激培5 h,收集培養(yǎng)后的細胞混合液.取上述細胞培養(yǎng)后的混合液,以CD3-PreCP、CD4-FITC、CD8-APC設門,固定破膜,17A-PE避光染色30 min,PBS洗滌后重新懸浮細胞上機檢測(FACSCanto Ⅱ流式細胞儀).

1.2.2 ELISA：血漿按照人IL-17、IL-6、IL-23、IFN-γELISA試劑盒說明書進行操作;使用全自動酶標儀檢測OD值,Curve Expert 1.4軟件繪制標準曲線,計算IL-17、IL-6、IL-23、IFN-γ的蛋白濃度.

1.2.3 HE染色：石蠟切片常規(guī)HE染色,由病理科兩位資深老師閱片,于光學顯微鏡下觀察十二指腸黏膜病理學改變.

1.2.4 RT-qPCR：按試劑盒說明提取組織RNA,逆轉錄合成cDNA.采用SYBR Green Ⅰ嵌合熒光法,應用美國ABI 7500熒光定量PCR儀進行擴增檢測.引物序列為：β-actin上游引物序列5'-GGCACCACACCTTCTAC AATGAGC-3',β-actin下游引物序列5'-GATAGCACAG CCTGGATAGCAACG-3';IL-6上游引物序列5'-GGTGT TGCCTGCTGCCTTCC-3',IL-6下游引物序列5'-GTTCT GAAGAGGTGAGTGGCTGTC-3';IL-17上游引物序列5'-GTGTCACTGCTACTGCTGCTGAG-3',IL-17下游引物序列5'-GT-GAGGTGGATCGGTTGTAGTAATCTG-3';IL-23上游引物序列5'-AGTGCCAGCAGCTTTCA CAGA-3',IL-23下游引物序列5'-AATCAGACCC TGGTGGATCCTT-3';IFN-γ上游引物序列5'-AGTGATGGCTGAACTGTCGC-3',IFN-γ下游引物序列5'-ACTGGGATGCTCTTCGAC-CT-3'.結果采用2-△△Ct法計算各目的基因mRNA的相對表達量.

1.2.5 免疫組織化學染色法：石蠟切片行免疫組織化學染色SP法檢測十二指腸黏膜中各細胞因子的表達,光鏡下觀察結果,細胞染色呈棕黃色或棕褐色顆粒為陽性,不著色為陰性.應用Image-Pro Plus 6.0病理圖像分析儀,采用光密度值法對其進行計量,求得平均值.

1.2.6 16S rDNA qPCR：所收集的糞便標本經室溫溶解后于電子分析天平上稱取0.2 g濕便,按試劑盒說明書要求提取DNA.標準菌株復活、接種培養(yǎng)后用試劑盒提取DNA作為標準品;雙歧桿菌上游引物序列5'-GGCTCGT AGGCGGTTCGTC-3',下游引物序列5'-GCCTTCGCCAT TGGTGTTCTTC-3';大腸桿菌上游引物序列5'-CATGCC GCGTGTATGAAGAA-3',下游引物序列5'-CGGGTAAC GTCAATGAGCAAA-3';根據兩種標準菌株DNA吸光度(A260值),配制各細菌DNA 106copies/μL-1010copies/μL濃度梯度的標準品溶液;PCR儀上設置采用絕對定量標準曲線法進行qPCR擴增.擴增結束時,根據7500 PCR儀分析系統(tǒng)軟件software v2.0所生成的標準曲線及其相關系數建立標準曲線方程(雙歧桿菌：Y=-3.42X+51.236,R2= 0.999,Eff%=96.06%;大腸桿菌：Y=-3.286X+47.258,R2=0.994,Eff%=101.53%).每份糞便標本所含的兩種細菌數量可通過循環(huán)數(CT值)與標準曲線比較得到,結果以每克濕便的細菌基因拷貝數的對數值表示.并計算雙歧桿菌/大腸桿菌(bifidobacterium and bifidobacterium/escherichia coli,B/E)比值以反應兒童腸道功能狀態(tài)及對健康的影響.當B/E比值≥1,表示腸道定植抗力正常;當B/E比值＜1,表示腸道定植抗力降低,菌群結構發(fā)生紊亂(菌群失調).

統(tǒng)計學處理采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進行分析,計量資料結果均采用mean±SD表示,兩組間均數比較若方差齊采用t檢驗,若方差不齊采用t'檢驗,所有假設檢驗用雙側檢驗,P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義.

2 結果

2.1 外周血中Th17、Tc17細胞比例 觀察組腹型HSP患兒外周血PBMCs中CD3+CD4+IL-17+T細胞(Th17細胞)比例、CD3+CD8+IL-17+T細胞(Tc17細胞)比例均較健康對照組兒童顯著升高,差異有統(tǒng)計學(P＜0.05);Th17/Tc17比值較健康對照組兒童差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05,見表1).

2.2 血清IL-6、IL-17、IL-23、IFN-γ蛋白含量 觀察組腹型HSP患兒血清IL-17、IL-23、IL-6較健康對照組兒童顯著升高,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);IFN-γ較健康對照組兒童稍高,但差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05,表2).

2.3 腹型HSP組患兒十二指腸黏膜組織病理形態(tài)改變 經HE常規(guī)染色后顯微鏡下觀察,結果示病例組腹型HSP患兒十二指腸黏膜主要表現為非異性慢性炎癥,20例患兒中有1例表現為輕度炎癥,19例表現為中度炎癥;伴或不伴糜爛或潰瘍等.黏膜內及黏膜下層可見炎細胞浸潤、出血、間質水腫、血栓形成、組織壞死等.其中有1例病例可見明顯的黏膜下層血管壁破壞及纖維素樣壞死,血管周圍中性粒細胞、嗜酸性細胞浸潤的血管炎性病變(圖1).

2.4 十二指腸黏膜組織IL-17、IL-6、IL-23、IFN-γ mRNA表達 病例組腹型HSP患兒較對照組兒童十二指腸黏膜IL-17、IL-6、IFN-γ mRNA表達水平顯著增高,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05),IL-23較對照兒童組稍高,但差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05,表3).

2.5 十二指腸黏膜組織IL-6、IL-17、IL-23、IFN-γ蛋白表達 免疫組織化學染色結果示IL-6、IL-17、IL-23、IFN-γ蛋白陽性表達主要分布于黏膜上皮細胞胞質.其中,IL-6、IFN-γ在對照組中基本不表達,在病例組陽性表達;IL-17、IL-23在對照組及病例組中均為陽性表達,見(圖2).光密度分析結果示病例組腹型HSP患兒較對照組兒童十二指腸黏膜IL-17、IL-6、IFN-γ平均光密度值顯著增高,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05),IL-23平均光密度值較對照兒童組稍高,但差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05,表4).

2.6 腸道雙歧桿菌、大腸桿菌數量及B/E比值 觀察組腹型HSP患兒糞便中雙歧桿菌數量及雙歧桿菌/大腸桿菌(B/E)比值較健康對照組兒童明顯下降,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);大腸桿菌數量較健康對照組兒童差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05,表5).

3 討論

Th17、Tc17細胞是體內重要的免疫調節(jié)細胞,在致病原的刺激下其細胞活化增強并產生大量的IL-17介導炎癥免疫應答.研究已證實Th17、Tc17細胞比例增加與銀屑病、免疫性血小板減少性紫癜、哮喘、變態(tài)反應性接觸性皮炎、流感、黑色素瘤等疾病的發(fā)病有關[10].國內外研究表明HSP患者外周血存在Th17細胞及IL-17高表達[3,11,12],但其作用機制尚未明確.且關于Tc17細胞的表達變化與HSP發(fā)病的關系的研究未見報道.本研究結果顯示腹型HSP患兒外周血中Th17、Tc17細胞比例均顯著增高,Th17/Tc17細胞比值無顯著改變;提示腹型HSP患兒存在Tc17和Th17細胞分化異常,但兩者各自分化的程度可能并無相關性.而血漿中IL-17、IL-6、IL-23水平顯著增高,IFN-γ水平無顯著改變.提示了該細胞因子微環(huán)境促進Th17、Tc17細胞分化增加,并引起全身性(系統(tǒng)性)的IL-17表達增高,可能與腹型HSP發(fā)病密切相關.

表1 健康對照組及觀察組PBMCs中Th17、Tc17細胞比例(mean ± SD)

表2 健康對照組及觀察組血漿IL-6、IL-17、IL-23、IFN-γ含量(mean ± SD)

表3 對照組及病例組十二指腸黏膜組織IL-6、IL-17、IL-23、IFN-γ mRNA的表達(mean ± SD)

表4 對照組及病例組十二指腸黏膜組織IL-6、IL-17、IL-23、IFN-γ平均光密度(mean ± SD)

腹型HSP患兒消化道癥狀表現明顯,與胃腸黏膜屏障受損有關.本研究發(fā)現腹型HSP患兒的十二指腸黏膜組織病理改變?yōu)榉翘禺愋缘难装Y改變,少部分病例可觀察到血管壁纖維素樣壞死及炎癥細胞滲出的血管炎癥改變,與Louie等[13]研究結果一致,提示腹型HSP患兒腸黏膜損傷的病理生理基礎為炎癥反應狀態(tài).Zhu等[14]研究發(fā)現IBD患兒血清和腸黏膜中IL-17和IL-23水平均增高,并且與疾病的嚴重程度呈正相關.近年研究發(fā)現機體組織病理損傷與炎癥狀態(tài)下IL-23的表達水平增加導致致病性Th17細胞(IL-17+IFN-Y+Th17細胞)分化增加有關.該細胞產生的IL-17和IFN-γ協(xié)同介導的炎癥反應在實驗性自身免疫性腦脊髓炎(experimental allergic encephalitis,EAE)及炎癥性腸病(inflammatory bowel disease,IBD)等自身免疫性及炎癥性疾病中發(fā)揮重要作用[15].Li等[16]研究發(fā)現IBD患者腸黏膜組織細胞中致病性Th17細胞占Th17細胞一定的比例,在活動性炎癥病變部位發(fā)生累積.目前關于IL-17和IFN-γ在HSP發(fā)病機制中作用關系尚不明確.國內外研究報道HSP患兒外周血Th17細胞及IL-17表達增加而Th1和IFN-γ表達下降[3,11],因此,一般認為Th17細胞及IL-17與HSP的發(fā)病有關,而Th1和IFN-γ與HSP的發(fā)病可能無明顯相關性.然而,Gülhan等[17]通過免疫組化法檢測則發(fā)現HSP患者腎組織中IFN-γ和IL-17的表達顯著增高,并推測IFN-γ和IL-17可能通過促進炎癥反應在HSP腎炎中起一定作用.本研究通過RT-qPCR及免疫組化法檢測發(fā)現病例組腹型HSP患兒十二指腸黏膜IL-17、IL-6、IFN-γ mRNA及蛋白表達水平均顯著增高,IL-23mRNA及蛋白表達水平表達略高,因此推測十二指腸黏膜中產生IL-17的Th17細胞分化增強,可能與部分Th17細胞轉變成致病性Th17細胞有關,導致IL-17與IFN-γ表達增高,兩者協(xié)同作用可能介導腹型HSP腸黏膜炎癥反應,促進腸黏膜損傷過程.

表5 健康對照組及觀察組腸道雙歧桿菌、大腸桿菌細菌量和B/E比值(mean ± SD)

圖1 十二指腸黏膜組織HE染色.A：正常對照組黏膜(×40);B：病例組黏膜大量炎癥細胞浸潤(×40);C：病例組黏膜中性粒粒細胞、嗜酸性細胞浸潤(×100);D：病例組黏膜下層出血(×40);E：病例組黏膜下層小血管管壁破壞及纖維素樣壞死(×100);F：病例組黏膜肌層小血管腔官腔內血栓形成(×100).

圖2 十二指腸黏膜組織免疫組織化學染色.A、C、E、G：對照組;B、D、F、H：病例組;A、B：IL-6在十二指腸黏膜中的表達(×400);C、D：IL-17在十二指腸黏膜中的表達(×400);E、F：IL-23在十二指腸黏膜中的表達(×400);G、H：IFN-γ在十二指腸黏膜中的表達(×400).

本研究通過探討各細胞因子在外周血及十二指腸黏膜中表達的變化趨勢,結果發(fā)現腹型HSP患兒IL-17、IL-6表達水平在局部及全身的表達呈一致性增高,證實了IL-17在腹型HSP的全身性免疫及局部黏膜免疫均發(fā)揮重要作用.然而,IFN-γ、IL-23表達水平在局部及全身性的表達均存在一定的差異.本研究病例組及對照組兒童十二指腸黏膜組織均表達IL-23,病例組十二指腸黏膜IL-23mRNA及蛋白表達水平較對照組略增高,但血漿中的IL-23蛋白表達水平較對照組顯著增高,考慮可能與本研究中十二指腸黏膜樣本量較小有關,有待擴大樣本進一步證實.另外,本研究觀察組血漿IFN-γ蛋白的表達較健康對照組并無明顯變化,與國內外研究結果一致[11,18],然而病例組IFN-γ mRNA及蛋白表達水平在十二指腸黏膜組織中表達顯著增高,我們推測腹型HSP患兒腸黏膜局部可能存在同時分泌IL-17、IFN-γ的致病性Th17細胞,該細胞多在腸道炎癥部位累積,但其確切原因及機制有待進一步探討.

近年來,研究發(fā)現IL-17與腸道共生微生物在維持胃腸黏膜屏障的穩(wěn)態(tài)發(fā)揮重要作用[19,20].腸道共生菌尤其是分段絲狀細菌(segmented filamentous bacteria,SFB)可以產生細胞外三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)及血清淀粉樣蛋白A(serum amyloid protein A,SAA)等分子,通過各類Toll樣受體(toll like receptor,TLR)等相關信號通路調節(jié)腸黏膜固有層Th17細胞的發(fā)育.Th17細胞產生的IL-17則通過刺激上皮細胞分泌抗菌肽以增強上皮細胞屏障功能,從而阻止致病菌的繁殖.雙歧桿菌可上調腸道Treg細胞的分化以恢復腸黏膜免疫耐受功能,抑制Th17細胞的過度活化,從而減輕IL-17介導的炎癥反應[21].反之,腸道菌群失調時,腸黏膜屏障受損,一些致病菌侵襲力增強,誘導Th17細胞過度活化、增殖并產生大量的效應因子IL-17,IL-17通過募集炎癥細胞及炎癥因子等介導炎癥反應以清除病原菌,但強烈及持續(xù)的炎癥反應則造成腸黏膜局部病理損傷[22].本研究發(fā)現腹型HSP患兒腸道有益菌雙歧桿菌數量明顯下降,潛在致病菌大腸桿菌數量無明顯變化,B/E比值下降且B/E比值＜1,證實了腸道存在菌群失調.由此推測腹型HSP患兒腸道菌群失調,致病菌侵襲力增強可能刺激Th17細胞分泌IL-17增加,從而擴大了IL-17介導的腸黏膜免疫及炎癥反應過程,進而加重了腸黏膜屏障損傷.

總之,本研究發(fā)現腹型HSP患兒外周血及腸黏膜均存在IL-17的高表達,IL-17及其相關細胞因子參與了腹型HSP患兒全身及腸黏膜局部的炎癥反應,腸道菌群失調可能促進IL-17介導的炎癥反應過程.與腹型HSP的發(fā)病及黏膜屏障損傷機制密切相關,但其具體的作用途徑與機制尚有待深入研究探討.此外,因本研究為小樣本研究,所獲結論有待將來擴大樣本進一步研究證實.

文章亮點

實驗背景

腸黏膜屏障的損傷、免疫系統(tǒng)紊亂、腸道菌群失調可能是腹型過敏性紫癜(henoch-schonlein purpura,HSP)的重要發(fā)病機制之一,然而對于免疫因子與腸黏膜屏障損傷的關系尚不清楚.

實驗動機

本研究主要探討急性期腹型HSP患兒外周血及十二指腸黏膜中IL-17及其相關細胞因子的表達變化及其與腸道黏膜防御屏障(簡稱黏膜屏障)的關系,擬明確全身及局部黏膜IL-17等免疫細胞因子在腹型HSP發(fā)病機制中的作用,同時了解腸道菌群失調與腹型HSP的關系.所獲的結果將有可能為臨床探索新的腹型HSP治療策略提供一定的理論依據.

實驗目標

本研究旨在明確全身及局部黏膜IL-17等免疫細胞因子在腹型HSP發(fā)病機制中的作用,同時了解腸道菌群失調與腹型HSP的關系.本研究表明IL-17及其相關細胞因子可能介導全身性及腸黏膜局部的炎癥反應,腸道菌群失調則可能加重了IL-17的炎癥反應,與腹型HSP的發(fā)病及黏膜屏障損傷機制具有相關性.進一步擴大樣本及研究腸黏膜機械屏障的損傷情況,分析腸道免疫屏障、生物屏障、機械屏障三者之間的相關性,將有可能為本研究結論提供更有力的依據,甚至為臨床特異性免疫治療及益生菌治療腹型HSP提供更多依據.

實驗方法

本研究(1)采用了流式細胞術：流式細胞術可以檢測某種細胞的不同細胞亞群的百分比(比例).(2)ELISA檢測：操作簡便、靈敏度高、特異性高,可定量檢測蛋白含量.(3)(RT-PCR)：特異性檢測不同基因的表達情況,可計算基因的相對表達量.(4)免疫組化法：可對待測指標在組織中的表達進行定位檢測,通過軟件可進行定量分析.(5)組織HE染色：是觀察組織病理學改變的常用方法.(6)細菌16S rDNA法：特異度高,可以定量檢測待測細菌的含量.

實驗結果

本研究已達到預期的實驗目標.本研究結果主要發(fā)現了腹型HSP患兒表達Th17、Tc17細胞明顯增高;腹型HSP患兒外周血IL-17、IL-6、IL-23水平增高,IFN-γ水平無明顯改變;腹型HSP患兒十二指腸黏膜組織病變主要為非特異性慢性炎癥,部分可見血管炎性病變;腹型HSP患兒十二指腸黏膜IL-17、IL-6、IFN-γ mRNA及蛋白表達水平均明顯增高,IL-23mRNA及蛋白表達水平增高不明顯;腹型HSP患兒雙歧桿菌數量、雙歧桿菌/大腸桿菌(B/E)比值下降(P＜0.05).大腸桿菌數量無明顯改變.本研究結果提示了IL-17及其相關細胞因子通過介導全身性及腸黏膜局部的炎癥反應,腸道菌群失調則可能擴大了IL-17介導的炎癥反應過程,與腹型HSP的發(fā)病及黏膜屏障損傷機制密切相關.可能為臨床特異性免疫治療和(或)及益生菌治療腹型HSP提供一定的理論依據.

實驗結論

本研究發(fā)現Tc17細胞在腹型HSP患兒外周血中高表達;IL-17在腹型HSP患兒黏膜組織中高表達,與外周血高表達趨勢一致;IFN-γ在腹型HSP患兒黏膜組織中高表達.可能與炎癥部位的致病性Th17細胞(IFN-γ+IL-17+T細胞)產生IFN-γ有關.

展望前景

在獲取足夠大的研究樣本例數的基礎上.對不同指標間可能存在的作用關系進行更深的探索.本研究未來研究的方向是：(1)完成腸黏膜機械屏障相關指標的研究.進一步探討腸道機械屏障、免疫屏障、生物屏障三者之間的關系.(2)研究IL-17及其相關細胞的表達水平與腸黏膜炎癥程度是否存在相關性.