楊汝才 ， 楊勝林 *， 譚 斌 ， 王旭平 ， 周 璇 ， 楊世皓 ， 羅林麗 ， 祝永才

（1.貴州大學動物科學學院，貴州貴陽 550025；2.高原山地動物遺傳育種與繁殖教育部重點實驗室，貴州貴陽 550025）

辣木梗（Moringa oleifera power）與辣木葉及果實等相比雖營養(yǎng)成分含量較低，但其具有生產(chǎn)成本低，蛋白質(zhì)、粗脂肪、粗纖維含量高等優(yōu)點，閆文龍等（2008）將辣木梗作為添加劑添加到肉雞飼糧中發(fā)現(xiàn)，1%辣木梗粉在一定程度上可以提高肉雞免疫力，促進幼齡雞的生長發(fā)育。張幸怡等 （2017）以辣木梗葉替代基礎飼糧中50%苜蓿，探究其葉對泌乳奶牛生產(chǎn)性能及血漿生化、抗氧化和免疫指標的影響，結果發(fā)現(xiàn)，辣木梗粉可提高奶牛機體抗氧化能力和免疫功能。目前，我國家禽的生產(chǎn)面臨著蛋白質(zhì)以及飼料資源的高昂價格導致飼料成本增加，以及過度使用抗生素而產(chǎn)生抗原活性降低等問題。因此，尋找廉價、可用且安全的蛋白質(zhì)和能量的替代來源迫在眉睫。盡管辣木飼料在其他動物上的應用已有較多的報道，但在蛋鴨的應用報道不多。三穗鴨是我國優(yōu)質(zhì)地方名鴨，開發(fā)新型功能性飼料添加劑并應用于三穗鴨產(chǎn)業(yè)十分必要。本試驗旨在通過在飼糧中添加不同水平的辣木梗粉，研究其對1～28日齡蛋雛鴨生長、免疫及抗氧化功能的影響，以探求蛋雛鴨飼糧中辣木梗粉的適宜添加量，為蛋雛鴨飼養(yǎng)以及辣木的應用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗動物 試驗選用健康、平均體重為（41.01±4.51）g的 1日齡三穗蛋雛鴨 135只（公母鴨隨機分配），隨機分成3組（Ⅰ ～Ⅲ組），每組3個重復，每個重復15只鴨。

1.2 試驗飼糧與飼養(yǎng)管理 本試驗所采用基礎飼糧參照 NRC（1998）和臺灣畜牧學會（1993）建議的蛋鴨營養(yǎng)需要配制。Ⅰ組（對照組）飼喂基礎飼糧，Ⅱ、Ⅲ組在基礎飼糧中分別添加20、40 g/kg辣木梗粉。

辣木梗粉（過40目篩）購自昆明樵山記食品有限責任公司，其中有效成分含量為：粗蛋白質(zhì)12.1%、粗脂肪2.4%、粗纖維29.3%。試驗以粉劑的形式添加。試驗期4周（1～28日齡）。全期自由采食和飲水，保證足夠的光照，且各試驗組其他條件均保持一致，其余管理同蛋鴨常規(guī)飼養(yǎng)管理。基礎飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎飼糧組成及營養(yǎng)水平（風干基礎）

1.3 樣品采集與處理 試驗至第28天，從每個重復中選取健康、接近平均體重的試驗鴨5只，后頸靜脈采血5 mL左右，所采血液靜置后3000～3500 r/min離心15～20 min，收集血清分裝于離心管中，-20℃貯存?zhèn)溆谩?/p>

1.4 測定指標與方法

1.4.1 生長性能指標的測定 試驗開始前，對每個重復的試鴨進行稱重，記錄初生重。以周為單位，每周稱重1次，次日清晨空腹稱重。詳細記錄每周耗料量和體重，計算平均日采食量（ADFI）、平均日增重（ADG）、料重比（F/G）。以上測定指標均以重復為單位。

1.4.2 血清蛋白含量及免疫指標的測定 血清總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）含量均采用微量酶標法測定，血清免疫蛋白IgG、IgA、IgM則按照南京建成生物工程研究所的酶聯(lián)分析法（ELISA）進行測定。試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。試驗儀器為PowerWave XS型全波長酶標儀 （Biotek Instruments.Inc.USA）。

1.4.3 血清抗氧化指標的測定 血清中超氧化物歧化酶（SOD）活性、谷胱甘肽過氧化物酶（GSHPx）活性和丙二醛（MDA）含量均采用PowerWave XS型全波長酶標儀（Bio-tek Instruments.Inc.USA）進行測定，所用試劑盒均購自南京建成生物工程研究所，測定方法參照試劑盒的說明書進行。

1.5 數(shù)據(jù)處理 試驗數(shù)據(jù)均采用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件進行單因素方差分析 （one-way ANOVA，LSD），用 Duncan’s法進行多重比較，以 P ＜0.05作為差異顯著性判斷標準，統(tǒng)計結果以“平均值±標準誤”表示。

2 結果與分析

2.1 飼糧辣木梗粉添加水平對蛋雛鴨生長性能指標的影響 由表2可知，Ⅱ組的ADFI為最高，分別比Ⅰ、Ⅲ組顯著提高8.6%和9.8%（P＜0.05），Ⅰ、Ⅲ組差異不顯著（P ＞ 0.05）；Ⅱ、Ⅲ組的ADG分別比Ⅰ組顯著提高11.8%和18.3%（P＜0.05），Ⅱ、Ⅲ組差異不顯著（P ＞ 0.05）；Ⅲ組的 F/G分別比Ⅰ、Ⅱ組顯著降低16.2%和14.1%（P＜0.05），Ⅰ、Ⅱ組組間差異不顯著（P＞0.05）。

表2 飼糧辣木梗粉水平對蛋雛鴨生長性能的影響

2.2 飼糧辣木梗粉添加水平對蛋雛鴨血清蛋白含量及免疫指標的影響 由表3可知，血清TP含量各組間無顯著差異（P＞0.05），但Ⅱ組比Ⅰ組提高15.07%，Ⅲ組比Ⅰ組提高28.21%；Ⅱ、Ⅲ組血清ALB含量比Ⅰ組分別顯著提高39.1%和49.5%（P＜0.05），試驗Ⅱ、Ⅲ組組間差異不顯著（P＞0.05）。

表3 飼糧辣木梗粉添加水平對蛋雛鴨血清蛋白含量的影響g/L

由表4可知，血清免疫蛋白IgG、IgA含量各組間差異不顯著（P＞0.05）；Ⅱ組的IgM 含量比Ⅰ組顯著提高了1.6%（P＜0.05），Ⅰ組與Ⅲ組以及Ⅱ組與Ⅲ組組間無顯著差異（P＞0.05）。

表4 飼糧辣木梗粉添加水平對蛋雛鴨血清免疫指標的影響 g/L

2.3 飼糧辣木梗粉添加水平對蛋雛鴨抗氧化指標的影響 由表5可知，各組間血清SOD、GSH-Px活性差異不顯著（P＞0.05）；Ⅱ組MDA含量比Ⅰ組顯著減少33.16%（P＜0.05），Ⅱ組與Ⅰ組及Ⅱ組與Ⅲ組組間差異不顯著（P＞0.05）。

表5 飼糧辣木梗粉添加水平對蛋雛鴨血清抗氧化指標的影響

3 討論

3.1 飼糧辣木梗粉添加水平對蛋雛鴨生長性能指標的影響 育雛期的體重在一定程度上可影響動物生長期的體重，因此，如何養(yǎng)好雛鴨是許多自繁殖場普遍關注的問題。作為非常規(guī)飼料的苜蓿草粉在鴨的飼糧中應用效果良好，添加適量的苜蓿草粉在一定程度上可促進育成鴨的生長 （陶曉東，2009）。為保持雛鴨有較高的生長速度和成活率，除使用常規(guī)飼料，添加維生素、礦物質(zhì)和微量元素外，要根據(jù)雛鴨的生理特點，合理使用一些非常規(guī)飼料，可提高雛鴨日增重，改善雛鴨生長性能（宋增廷等，2015）。 閆文龍等（2008）將辣木梗粉添加到肉雞飼糧中，飼料利用率略微提高。為研究辣木莖粉對鵝的飼用價值，李苗苗（2016）將辣木莖粉添加到清遠鵝飼糧中，當添加水平高于8%時，22～70日齡清遠鵝F/G顯著低于對照組。這與本試驗結果基本一致。本試驗結果表明，辣木梗粉添加水平為20 g/kg時可顯著提高蛋雛鴨的ADFI、ADG；辣木梗粉添加水平為40 g/kg時，F(xiàn)/G顯著低于試驗Ⅰ、Ⅱ組（P＜0.05）。這說明飼糧中添加適量的辣木梗粉有助于促進蛋雛鴨的生長。

3.2 飼糧辣木梗粉添加水平對蛋雛鴨血清免疫指標的影響 血清TP、ALB含量可反映機體蛋白質(zhì)的吸收和代謝狀況 （葉林超等，2014；耿光瑞等，2013）。血清TP由肝臟合成，其含量的高低直接反映出動物生長發(fā)育及生理狀態(tài)（車傳燕等，2013；劉慶華等，2012）。TP含量高是蛋白質(zhì)代謝旺盛的表現(xiàn)，有利于動物生長。血清中ALB的主要功能是維持滲透壓平衡，與機體免疫功能相關 （姜麗麗，2014；李萬佳，2014；解俊美等，2012）。 血清 TP 含量升高可降低飼料消耗，加快體蛋白質(zhì)的沉積，促進生長，同時還可維持機體的免疫水平（解俊美等，2012）。血清ALB含量升高，說明辣木梗粉能加強肝、腎功能，增強機體對蛋白質(zhì)的吸收和代謝，提高機體免疫功能（解俊美等，2012；張養(yǎng)東等，2009）。

免疫球蛋白通常也稱為抗體，是機體產(chǎn)生體液免疫的標志（袁藝森，2014；張養(yǎng)東等，2009），廣泛存在動物的血液、組織液、淋巴液等分泌液中，是動物機體抵抗病原微生物重要的物質(zhì)，是機體體液免疫的主力；作為機體體液免疫功能的重要指標，由于其結構不同分為IgA、IgG、IgM、IgD和IgE五種，但是常規(guī)檢查時只檢查含量高的IgA、IgG、IgM 這三種（袁藝森，2014；張淑云，2011）。 本試驗結果表明，辣木梗粉添加水平可顯著影響血清ALB含量，辣木梗粉添加水平為40 g/kg時血清ALB含量達到最高；辣木梗粉添加水平為20 g/kg時免疫蛋白IgA、IgG、IgM在血清中的含量最高。這說明辣木梗粉對蛋雛鴨免疫系統(tǒng)有一定的調(diào)節(jié)作用。

3.3 飼糧辣木梗粉添加水平對蛋雛鴨抗氧化功能的影響 細胞的活力及功能的發(fā)揮部分依賴于其平衡的氧化還原狀態(tài)，當機體內(nèi)活性氧自由基（ROS）和自由基過量時，便會破壞平衡，導致細胞內(nèi)的一些大分子物質(zhì)（DNA、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)）過度氧化，造成細胞功能退化甚至凋亡（Mbikay，2012）。

抗氧化酶能夠清除自由基，抵御氧化損傷,細胞可通過激活SOD、GSH-Px等酶發(fā)揮自身的內(nèi)源性保護作用以對抗氧化應激（張幸怡等，2017）。SOD作用于超氧陰離子（O2-），使其轉(zhuǎn)化為過氧化氫（H2O2）和其他氫過氧化物，從而阻止O2-啟動的自由基連鎖反應（解俊美等，2012；楊芳等，2004）。GSH-Px可以幫助清除H2O2和許多有機氫過氧化物的酶和催化H2O2和還原脂質(zhì)過氧化物，防止脂質(zhì)過氧化物對機體生物膜和組織的損傷，并防止脂質(zhì)過氧化物進一步水解為有害物質(zhì)丙二醛，從而保護細胞膜結構和功能的完整性（解俊美等，2012；楊芳等，2004）。MDA則是脂質(zhì)過氧化物代謝的終產(chǎn)物，其高低反映了機體因氧自由基所導致的脂質(zhì)過氧化、細胞受損程度以及氧自由基代謝狀況（張彩虹等，2009；朱宏娟，2006）。

張幸怡等（2017）研究發(fā)現(xiàn)，飼喂用辣木梗葉替代基礎飼糧中50%苜蓿的試驗飼糧顯著提高了奶牛血漿中總抗氧化能力（T-AOC）以及抑制羥自由基能力 （P＜0.05），顯著降低了血漿中MDA含量（P＜0.05），顯著提高血漿中IgG的含量（P＜0.05）。由此可知，辣木梗粉可提高奶牛機體抗氧化能力和免疫功能（解俊美等，2012）。與本試驗結果基本一致，辣木梗粉對SOD和GSH-Px活性有較強的誘導能力，從而維持了動物體自身自由基的產(chǎn)生和清除的動態(tài)平衡 （解俊美等，2012）。本試驗發(fā)現(xiàn)，血清SOD、GSH-Px活性隨飼糧辣木梗粉添加水平的升高呈先上升后下降的趨勢，MDA含量則呈先下降后上升趨勢。MDA含量下降可能是因為辣木梗葉中含有抗氧化劑，可減少因脂質(zhì)過氧化作用所造成的損傷，抑制ROS和自由基的形成 （張幸怡等，2017；Allam等，2016；Ogbe等，2011）。

綜上結果表明，飼糧中適量添加辣木梗粉可提高蛋雛鴨機體SOD和GSH-Px活性，增強其抗氧化功能。

4 結論

飼糧中添加適量的辣木梗粉能夠提高1～28日齡蛋雛鴨機體的生長、免疫及抗氧化功能。綜合考慮各指標，辣木梗粉在蛋雛鴨飼糧中的適宜添加量為20 g/kg。