劉學(xué)琦

【摘 要】全自動(dòng)生化分析儀已經(jīng)在臨床上廣泛應(yīng)用，給檢驗(yàn)人員增加了許多新課題，除了學(xué)習(xí)保養(yǎng)維護(hù)、操作以外，也要注意儀器使用流程和試劑的使用對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾，本文結(jié)合自己的實(shí)際工作分析探討了全自動(dòng)生化分析儀交叉污染的各種原因，盡量避免使用過(guò)程中發(fā)生交叉污染，以及發(fā)生交叉污染后怎樣找出原因。

【關(guān)鍵詞】全自動(dòng)生化分析儀;交叉污染

【中圖分類號(hào)】R443【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A【文章編號(hào)】1005-0019（2019）11--01

現(xiàn)代醫(yī)療不斷發(fā)展，目前，由于全自動(dòng)生化分析儀其準(zhǔn)確性高、測(cè)量速度快、消耗劑量少等優(yōu)點(diǎn)和多樣本、多項(xiàng)目的處理能力，給臨床上對(duì)疾病的診治以及健康狀態(tài)提供可靠的信息依據(jù)，已經(jīng)在各級(jí)醫(yī)院得到廣泛使用，成為醫(yī)院進(jìn)行生化分析的主要工具。但是現(xiàn)在多種全自動(dòng)生化分析儀都存在交叉污染的問(wèn)題，從而導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)誤差，每個(gè)檢驗(yàn)結(jié)果都會(huì)影響到醫(yī)生對(duì)疾病的診治，因此避免實(shí)驗(yàn)中發(fā)生交叉污染就變得尤為重要。本人根據(jù)檢驗(yàn)經(jīng)歷和實(shí)際情況，對(duì)全自動(dòng)生化分析儀交叉感染的原因及如何找出原因作以下分析報(bào)告。

一、全自動(dòng)生化分析儀交叉污染的種類

（一）試劑之間的化學(xué)污染

1.反應(yīng)進(jìn)程同時(shí)。上一個(gè)試劑的反應(yīng)結(jié)果對(duì)下一個(gè)試劑反應(yīng)進(jìn)程帶來(lái)了間接的干擾，因此，下一個(gè)項(xiàng)目檢測(cè)到的是這兩個(gè)試劑反應(yīng)的綜合結(jié)果。比如，上一個(gè)反應(yīng)的產(chǎn)物是過(guò)氧化氫，那么就會(huì)對(duì)以Trinders反應(yīng)時(shí)顏色的改變產(chǎn)生影響。像GLU對(duì)CREA反應(yīng)結(jié)果的干擾（氧化酶法）、CHOL對(duì)CREA反應(yīng)結(jié)果的干擾（酶法）、UA對(duì)CHOL測(cè)定結(jié)果的影響[1]。

2.試劑之間的直接污染。上一個(gè)檢測(cè)試劑中含有下一項(xiàng)檢測(cè)所需要的試劑，直接影響到下一項(xiàng)的檢測(cè)結(jié)果。比如，試劑淀粉酶中含有濃度較高的鈣離子、CK（NAC法）、CK-MB（NAC法）、ALP（IFCC法）、AMY（EPS法）、TP、GLU（氧化酶法）、ACP試劑里面含有濃度較高的鉀離子、TG等試劑里面含有一些鎂離子等等，以上這些試劑的交叉污染分別會(huì)對(duì)鈣離子、鉀離子（紫外酶法）、鎂離子的最后檢測(cè)結(jié)果造成影響。

3.上一個(gè)檢測(cè)的試劑中含有一些對(duì)下一個(gè)反應(yīng)檢測(cè)的底物有作用的試劑，造成下一個(gè)反應(yīng)的測(cè)定結(jié)果不準(zhǔn)確。比如，UA、TC等均含有磷酸鹽緩沖液，會(huì)對(duì)于其后P的測(cè)定產(chǎn)生影響、鐵能與鎂測(cè)定試劑的絡(luò)合劑結(jié)合，就會(huì)影響鐵與鐵絡(luò)合劑的結(jié)合。

4.反應(yīng)條件如pH等影響下一項(xiàng)的反應(yīng)條件，因此改變反應(yīng)進(jìn)行的速率。比如，直接膽紅素（釩酸鹽氧化法）試劑里面含有表面活性劑的酒石酸鹽緩沖液，就會(huì)影響ALT的活性，干擾最終測(cè)定結(jié)果[2]。

我們的全自動(dòng)生化分析儀在使用不久后，發(fā)現(xiàn)用酶法檢測(cè)肌酐時(shí)的結(jié)果不穩(wěn)定，有時(shí)候連著好幾個(gè)樣本肌酐值都高于正常參考值很多，單獨(dú)重新測(cè)定時(shí)，結(jié)果又恢復(fù)正常，經(jīng)過(guò)檢查，我們排除了攪拌棒、比色杯、加樣針等幾個(gè)方面的原因，我們懷疑可能是因?yàn)闄z測(cè)順序出現(xiàn)錯(cuò)誤：先測(cè)定了葡萄糖，緊接著測(cè)了肌酐，所以，我們做了一個(gè)實(shí)驗(yàn)。

隨機(jī)抽取病人標(biāo)本9份做三次檢測(cè)，第一次和日常測(cè)定順序相同，第二次單獨(dú)測(cè)定肌酐，第三次在葡萄糖和肌酐的檢測(cè)中插入AST和ALT檢測(cè)，然后測(cè)定這9份標(biāo)本。三次檢測(cè)肌酐。結(jié)果三次測(cè)試數(shù)據(jù)為：第一次測(cè)試=112.7μmol/L，第二次測(cè)試=73.1μmol/L，第三次測(cè)試=72.9μmol/L。顯而易見，第一次與第二次檢測(cè)結(jié)果差距較大，第二次和第三次檢測(cè)結(jié)果差距細(xì)微。這就說(shuō)明試劑葡萄糖對(duì)于肌酐檢測(cè)結(jié)果有很大影響，后來(lái)我們又查找了一些資料，并向請(qǐng)教了專家，找到了原因。

（二）樣品交叉污染

1.比色杯的交叉污染。生化分析儀的比色杯一般都是反復(fù)使用的，每個(gè)比色杯使用完畢后，進(jìn)行清洗，然后繼續(xù)使用于下一個(gè)項(xiàng)目的檢測(cè)。如果比色杯清洗不徹底或者粘附力增強(qiáng)時(shí)，就可能吸附一些上一個(gè)項(xiàng)目中的試劑，那么這些殘留的試劑就會(huì)對(duì)下一個(gè)項(xiàng)目的檢測(cè)產(chǎn)生一定的影響。

2.攪拌棒的交叉污染。在樣本與試劑混合以后，往往會(huì)用攪拌棒加以攪拌，使混合均勻。如果攪拌棒清洗不徹底或者粘附力強(qiáng)，那么殘留在攪拌棒上面的試劑或者樣品就會(huì)對(duì)下一個(gè)項(xiàng)目的檢測(cè)產(chǎn)生影響。

3.試劑吸針、樣品吸針的交叉污染?，F(xiàn)在大部分全自動(dòng)生化分析儀都是采用了雙試劑檢測(cè)樣本，試劑中R1與R2的吸取和吐出，，一般情況下只配一套試劑針。如果試劑針清洗不徹底，或者粘附力增強(qiáng)時(shí)，殘留在上面的試劑就有可能會(huì)對(duì)下一個(gè)項(xiàng)目的檢測(cè)造成干擾。除此之外，另一個(gè)不容忽視的問(wèn)題是許多全自動(dòng)生化分析儀長(zhǎng)期頻繁使用，使得試劑針和加樣針磨損嚴(yán)重，或者吸頭沒有及時(shí)更換，使試劑針或者取樣針密封層逐漸變大，發(fā)生泄漏問(wèn)題，造成樣本間或試劑間相互污染。

總之，試劑的種類繁多，試劑中的化學(xué)成分也非常復(fù)雜，各個(gè)廠家提供的試劑說(shuō)明書不能完全說(shuō)明試劑的組合成分，所以往往很難判斷試劑之間交叉污染的原因。因此，檢驗(yàn)人員在進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，要合理安排項(xiàng)目的測(cè)試順序，對(duì)于精確安排好的項(xiàng)目測(cè)試順序，也不能隨意更改[3]。所需要的試劑，要科學(xué)性、合理性的組合放置，相同酸堿度的放在一起，反應(yīng)原理相同的放在一起。沖洗時(shí)使洗液壓力與壓縮空氣的壓力適中，把試劑吸針、樣品吸針以及攪拌棒沖洗干凈并吹干。對(duì)試劑針進(jìn)行特別沖洗，比如沖洗次數(shù)增加，必要的時(shí)候可以加入堿性清洗液或酸性清洗液進(jìn)行沖洗這樣可以有效減弱交叉感染。

二、全自動(dòng)生化分析儀交叉污染的判別

第一，把某一種試劑當(dāng)做樣本，進(jìn)行整套項(xiàng)目的綜合測(cè)定，仔細(xì)觀察每一項(xiàng)的測(cè)定結(jié)果從而進(jìn)一步確定發(fā)生試劑交叉污染造成直接或間接影響的項(xiàng)目?；蛘甙岩环輼颖疽环譃槎?，其中一份加入生理鹽水或者其他合適的稀釋液，另外一份加入等量的其他試劑，同時(shí)檢測(cè)，仔細(xì)觀察檢測(cè)結(jié)果的變化，從而進(jìn)一步確定發(fā)生試劑交叉污染時(shí)造成直接或間接影響的項(xiàng)目。第二，交叉污染初步測(cè)試，假設(shè)有啊，a，b，c三個(gè)項(xiàng)目，，標(biāo)本是混合血清，按照下面的測(cè)試順序：a，a，a，a，a，b，a，c，a，b，b，b，b，b，c，b，c，c，c，c，c，測(cè)試的結(jié)果分別為：a1，a2，a3，a4，a5，ba-b，ab-a，ca-c，ac-a，b1，b2，b3，b4，b5，cb-c，bc-b，c1，c2，c3，c4，c5（bc-b表示c項(xiàng)目對(duì)a項(xiàng)目發(fā)生污染時(shí)a的測(cè)試值，其他類同），把a(bǔ)2到a5、b2到b5、c2到c5的四次檢測(cè)平均值分別當(dāng)做a、b、c三個(gè)項(xiàng)目沒有發(fā)生交叉污染時(shí)的測(cè)定值，如果（ab-a/a*100%）< 95%或者>105%，那么強(qiáng)烈支持b對(duì)a有交叉污染。如果，以上初步試驗(yàn)證明b對(duì)a有污染，就可以進(jìn)行下面實(shí)驗(yàn)進(jìn)行確認(rèn)，檢測(cè)順序?yàn)閎，a，a，a，觀察結(jié)果b，a1，a2，a3，如果（a1/a3*100）< 95%或者>105%，說(shuō)明b對(duì)a有交叉污染。從a1到a3的檢測(cè)結(jié)果，可以進(jìn)行確認(rèn)b受到交叉污染的程度是不是逐漸減輕。

綜上所述，為了確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，避免發(fā)生交叉污染，首先儀器應(yīng)該運(yùn)轉(zhuǎn)正常，對(duì)儀器定期維護(hù)、保養(yǎng)，檢驗(yàn)人員能夠熟練操作儀器而且了解各種反應(yīng)，做好實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)評(píng)工作和質(zhì)控工作，實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境質(zhì)量對(duì)檢測(cè)結(jié)果也會(huì)有一定影響，還要做好各種試劑之間的交叉污染的評(píng)估和調(diào)查工作，這樣就可以設(shè)置實(shí)驗(yàn)檢測(cè)程序，試劑科學(xué)合理的組合，攪拌棒、比色杯、試劑針清洗徹底，是使全自動(dòng)生化分析儀避免交叉污染最有效的辦法，使其提供的數(shù)據(jù)更具準(zhǔn)確性和可靠性。

參考文獻(xiàn)

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