譚宏偉，韓加敏，董 霞，王小平，周昱恒，董 坤

(1.重慶市畜牧技術(shù)推廣總站，重慶 401121；2.云南農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院，云南 昆明 650201；3.云南農(nóng)業(yè)大學食品科學技術(shù)學院，云南 昆明 65020；4.重慶市彭水苗族土家族自治縣畜牧發(fā)展中心，重慶 409600)

1 引言

蜜粉源植物是為蜜蜂提供花蜜和花粉的食物來源，是蜜蜂賴以生存、繁殖和發(fā)展的生活資料，是發(fā)展養(yǎng)蜂生產(chǎn)的物質(zhì)基礎[1]。

川續(xù)斷主要含有生物堿、皂苷、揮發(fā)油、多糖及其他生物活性成分[2]。豐富多樣的成分使其具有行血消腫、生肌止痛、續(xù)筋接骨、補肝腎、強腰膝、安胎等作用[3-19]。川續(xù)斷是一種中藥材也是一種蜜粉源植物，其多年生草本，頭狀花序球形，花期7～9月，果期9～11月[3]。近年來，醫(yī)藥市場對天然中藥材的需求量逐年增加[20]，川續(xù)斷的野生產(chǎn)量因被大量采摘而逐年下降，無法滿足人們的需求[21]，所以一些地區(qū)（如攀西地區(qū)[22]）進行了人工種植。

川續(xù)斷在重慶彭水地區(qū)屬野生蜜源，零星廣布，多生于田埂、林緣及荒地處，花粉和花蜜都很豐富，而且在生長多而集中處可采到此蜜[23]，其豐富的花粉可為該區(qū)域的蜜蜂提供一定的營養(yǎng)物質(zhì)?！吨袊鄯墼粗参铩酚涊d與之同屬植物續(xù)斷均為蜜源植物，但未見關于該種蜜源植物開花泌蜜等的研究報道。本研究通過對其開花方式及順序、開花期、蜜蜂采集習性及花冠和花粉的超微結(jié)構(gòu)研究，可為川續(xù)斷作為蜜源的開發(fā)利用提供一定的參考。

2 實驗方法

2.1 開花方式及順序

對觀察區(qū)域的川續(xù)斷花序進行標記、觀察和記錄，找出其開花方式及順序并進行統(tǒng)計，實驗中開花方式統(tǒng)計了200個花序。

2.2 開花期

對觀察區(qū)域川續(xù)斷的整體花期進行記錄，選取10個花序?qū)位ㄐ蚧ㄆ谶M行記錄與統(tǒng)計。

2.3 蜜蜂采集習性

選取1 m2川續(xù)斷生長區(qū)域，在3天晴朗日的8：00～18：00整點時統(tǒng)計該區(qū)域蜜蜂數(shù)量，緊接著跟著一只蜜蜂記錄其訪花（花序）數(shù)量及其在每個花序上的停留時間，直至蜜蜂離開觀察區(qū)域。

2.4 超微結(jié)構(gòu)研究

花冠采集后放入固定液中4℃冷藏保存，然后進行乙醇脫水，臨界點干燥后進行電鏡掃描；花粉采集后放入裝有變色硅膠的密封袋中干燥，然后進行電鏡掃描。利用Image J軟件對所拍圖像進行測量，利用Excel軟件對數(shù)據(jù)進行處理與分析。

3 實驗時間與地點

實驗于2018年8～9月在重慶市彭水苗族土家族自治縣摩圍山上進行。

4 結(jié)果與分析

4.1 開花方式及順序

川續(xù)斷為頭狀花序，球形，花序開花時可分為4個部位（如圖1）。

圖1 川續(xù)斷開花部位

川續(xù)斷根據(jù)開花時不同部位的先后順序不同，總體可分為3種方式。方式一：部位2最先開放，其次部位4，最后是部位1、3同時開放，由于部位3的面積較大，最后開完的一般是部位3。方式二：部位2和部位4同時開放，然后部位1、3開放方式基本與方式一一致。方式三：部位4最先開放，其次部位2，然后部位1、3開放方式基本與方式一一致。在川續(xù)斷的開放過程中也并不是全都按這3種方式來開放的，還有很少一部分順序方式比較雜，不是一個部位同時開放，而是有一二朵先開放，不好描述，歸為其他方式(如附圖)。

圖2 川續(xù)斷開花方式一

圖3 川續(xù)斷開花方式二

圖4 川續(xù)斷開花方式三

圖5 川續(xù)斷其他開花方式

對川續(xù)斷200個花序進行標記與觀察，并統(tǒng)計了各種開花方式的數(shù)量，結(jié)果如圖6所示。結(jié)果顯示，82.5%的川續(xù)斷花序以方式一開放，占大多數(shù)；其次是方式二，有12.5%；少數(shù)以方式三和其他方式開放，2種方式總共占5%。

圖6 川續(xù)斷不同開花方式統(tǒng)計

4.2 川續(xù)斷開花期

川續(xù)斷開花過程中，會從主枝上不斷長出新花序，從而總體花期較長，在彭水縣的總體花期為8～9月。

川續(xù)斷開花過程中，將其單花序分為開花期和敗花期。此開花期是指川續(xù)斷總狀球形花序上第一朵花開始開放至最后一朵花開放的時間；敗花期是指花序上所有花朵開放后開始變黃、凋謝及掉落，直至所有花朵掉落的時間。

結(jié)果如表1所示，川續(xù)斷單花序開花期4.48 d，最多6 d，最少3 d；單花序敗花期2.9 d，最多4 d，最少2 d；總花期7.38 d，最多9 d，最少6 d。

表1 川續(xù)斷花期時間

4.3 川續(xù)斷蜜蜂采集習性

觀察了蜜蜂從早上8：00到下午18：00整點時采集川續(xù)斷的數(shù)量、單只蜜蜂的采集頻率及在單花序上的停留時間，結(jié)果如圖7所示。

圖7 川續(xù)斷蜜蜂采集習性

一天中每個時段蜜蜂采集川續(xù)斷的數(shù)量差異不是特別大，只是在早上9：00以前可能氣溫太低，蜜蜂比較少，還可能沒有蜜蜂，但在9：00以后數(shù)量波動不大，在下午16：00達到最大值。單只蜜蜂的采集頻率變化就比較大，從8：00～12：00一直在上升，12：00開始下降，在12：00達到最大值，一只蜜蜂可以在觀察區(qū)域內(nèi)16.5個花序上停留。蜜蜂在11：00單花停留時間最長，為22.83 s。據(jù)觀察，蜜蜂可以在川續(xù)斷花序上停留的時間最長可以達到10 min以上，但不是整點觀察到的。

4.4 川續(xù)斷超微結(jié)構(gòu)

4.4.1 花管內(nèi)壁電鏡掃描

根據(jù)觀察，開始是猜測川續(xù)斷的蜜腺在花管內(nèi)壁上的，經(jīng)過電鏡掃描，在花管內(nèi)壁上只發(fā)現(xiàn)了一些細毛（圖8-B、C黑色圈處），德國C.K.施佩格爾發(fā)現(xiàn)尼泊爾老鸛草的花瓣基部有細毛，細毛之下也有分泌甜汁的腺體，這些分泌甜汁的腺體就是蜜腺[3]，但是川續(xù)斷細毛之下的結(jié)構(gòu)沒有觀察到。至于這些細毛是不是川續(xù)斷分泌花蜜的組織，還需要對其及花的其他部位進行研究才能確定。

圖8 川續(xù)斷花管內(nèi)壁掃描圖

4.4.2 花粉形態(tài)

花粉近等腰三角形，3個角上有萌發(fā)溝，沒有像三角形那樣輪廓分明，“邊”所在的面有一定的弧度。2邊長54.97(28.99～30.29)μm，底邊不包括萌發(fā)孔位置長 58.41(57.04～59.78)μm，最寬處長 73.50（65.50～84.36） μm，厚度約為16.06μm。萌發(fā)溝凹陷有線開口，開口長46.12（43.96～48.57） μm，寬3.71（2.57～4.38）μm，開口面積約為110.64μm2。具乳突狀紋飾，大小不一，分布不規(guī)則。

圖9 川續(xù)斷花粉電鏡掃描圖

5 結(jié)論

通過對川續(xù)斷的開花方式、開花期和蜜蜂采集習性的研究，川續(xù)斷單花序開花時一般分為4個部分、3種方式，總體花期2個月左右，單花序花期7.38 d，是蜜蜂喜愛采集的一種蜜源植物。得到了川續(xù)斷花粉超微結(jié)構(gòu)，但花蜜腺具體位置還有待進一步研究。

致謝：電鏡掃描由中國科學院東亞植物多樣性與生物地理學重點實驗室谷志佳協(xié)助完成，特此致謝！